GB∕T 20552-2023 长牡蛎（正式版）

2023-12-28发布国家标准化管理委员会I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件代替GB/T20552—2006《太平洋牡蛎》,与GB/T20552—2006相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：a)更改了分类地位(见4.2,2006年版的3.2);b)更改了可量性状比值(见5.2,2006年版的4.1.2.1);c)删除了壳高与壳长、壳长与体重的关系式(见2006年版的4.1.2.3);d)删除了生化遗传学特征及检测方法(见2006年版的第7章、8.2);e)增加了分子遗传学特性描述及检测方法(见第8章、9.5);f)增加了判定规则(见第10章)。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国农业农村部提出。本文件由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口。本文件起草单位：中国海洋大学。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：——2006年首次发布为GB20552—2006,2017年转为推荐性国家标准GB/T20552—2006;——本次为第一次修订。1本文件界定了长牡蛎[Crassostreagigas(Thunberg,1793)]的术语和定义，确立了学名与分类，规定了主要形态结构特征、生长与繁殖特性、细胞遗传学特性与分子遗传学特性，描述了相应的检测方本文件适用于长牡蛎的种质鉴定和检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法GB/T22213水产养殖术语GB/T32757贝类染色体组型分析3术语和定义GB/T22213界定的以及下列术语和定义适用于本文件。壳顶至壳腹缘的最大距离。壳长shelllength垂直于壳高、与两壳绞合线平行方向的前后缘间最宽部分的长度。4学名与分类4.2分类地位gigas(Thunberg,1793)。软体动物门(Mollusca),双壳纲(Bivalvia),牡蛎目(Ostreida),牡蛎科(Ostreidae),巨蛎属(Cras-sostrea)。5主要形态结构特征5.1外部形态2明显。壳顶腔深，并常具有白垩色的沉积物。壳表白垩色到紫褐色。长牡蛎外形见图1。//h标引序号说明：1——右壳；l——壳长；h——壳高。1龄～2龄长牡蛎的壳高为53mm～162mm,壳长为26mm～92mm,壳高与壳长的比值为5.3.3鳃：左右各1对，共4片。6生长与繁殖特性1龄长牡蛎壳高为53mm～114mm,壳长为26mm～68mm,质量为8g～53g;2龄长牡蛎壳高为78mm～162mm,壳长为46mm～92mm,质量为53g～214g。3数百万粒至数千万粒。7细胞遗传学特性7.1染色体数染色体组型见图2,染色体核型公式为：2n=20m,NF=40,其中，m指中部着丝粒染色体，NF指XKXKX×8×<XXXKKNXXKX下图2长牡蛎染色体组型8分子遗传学特性线粒体COI基因碱基参考序列如下(621bp):ATAGTATTTGGATTTTGAGCTGTTCTTGCGGGAACTAGGTTATTCGTTGGAGACTTTATAACCCTGGAGCTAAGTTTTTAGACCCCGTGA100GCTTCTAGTAGCAGACATGCAATTTCCTCGATTAAATGCATTTAGATTTT250GAGTTTTGCCAGGGTCTCTTTATCTTATGCTTATGTCTAACATTGTAGAA300AACGGAGTTGGGGCAGGGTGAACAATTTACCCTCCTTTATCAACTTACTC3504TTATCATGGAGTTTGTATAGACCTTGCAATTCTAAGCCTTCACCTTGCTG400GTATTAGCTCTATTTTCAGGTCAATTAATTTCATAGTAACGATTAGAAAT450ATGCGATCTGTTGGGGGCCATTTACTAGCACTATTCCCTTGATCTATTAA500GGTTACTTCATTCTTGCTTTTGACTACTCTCCCAGTTTACTATACTTTTGACTGATCGTCATTTTAATACCTCTTTTTTTGACCCT600GTCGGAGGGGGGGACCCTGT621种内K2P遗传距离小于2%。9检测方法按照GB/T18654.2的规定执行。9.2主要形态结构特征在充足光线下肉眼观察。壳高和壳长按照定义用游标卡尺测量。用游标卡尺测量壳高和壳长，用电子秤称量质量。查询养殖记录。通过显微镜观察生殖细胞分辨性别。通过显微镜观察排放的生殖细胞判断生殖方式。肉眼观察性腺的发育程度并结合显微镜观察生殖细胞判断繁殖季节。卵的浓度，进而计算怀卵量，测3次取平均值。5在显微镜下观察卵的形态。9.4细胞遗传学特性采用成体鳃组织法，将长牡蛎在0.005%的秋水仙素海水中处理10h,取鳃组织用含0.05%秋水仙素的海水处理45min,其余操作按照GB/T32757的规定执行，其中，低渗时间为30min～45min,解离时间为50min,热滴片法滴片。9.5分子遗传学特性按附录A执行。10判定规则10.1当检测结果符合第5章和第7章的要求，可判定该种质时，按第5章和第7章的要求判定。10.2当出现下列情况之一时，增加检测第6章和第8章要求的内容，依据检测结果进行辅助鉴定：a)第5章和第7章的项目无法进行检测或者判定时；b)第三方提出要求时。6(规范性)取闭壳肌100mg,按照标准的酚-三氯甲烷抽提法或者使用试剂盒进行DNA提取。COI-F:5'-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3',COI-R:5'-TAAACTTCAGGGTGAC-A.3PCR扩增KCl;100mmol/L(NH)₂SO₄;15μL的10×PCR缓冲液[200mmol/LTris-HCl,pH8.4;200mmol/Lmmol/LMgCl₂],加