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文档简介

植物组织培养试题库(整理)一、填空题植物组织培养成功与否,一方面取决于培养材料本身的性质;另一方面取决于培养基的种类和成分。2.一个已停止分裂的成熟细胞转变为____分生______状态,并形成___细胞团_______的现象称为"脱分化"。3植物组织培养技术的三大难题分别为褐变、污染和玻璃化。4具有防止褐变作用的维生素是_____维生素C____。5病毒在植物体内的运转方式有短距离运转和长距离运转两种,前者经过胞间连丝向邻近细胞中扩散,速度很慢。后者通过寄主植物韧皮部的疏导组织随着营养输送进行转移,速度很快。6、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进_____根_____的生长,这时___分化_____占主导地位;比值高促进__苗___的生长,这时__分裂__占主导地位;悬浮培养的材料必须达到悬浮培养物质分散性多、细胞核较小均一性好和生长迅速等三个要求。7、连续培养是指在培养过程中,以不断抽取

用过的培养基并注入

新鲜的培养基

,使培养不断得到养分补充,保持其稳定状态的培养。8.培养基的母液一般是配成大量元素,微量元素,维生素和_氨基酸_4类存放备用。MS培养基中组成大量元素的盐类分别是_硝酸钾_和_硝酸铵_。9.一般情况下,细胞分裂/生长素的比值高,有利于愈伤组织长_芽_,比值低有利于长_根_。10.在植物的材料灭菌中,酒精的浓度用70%~75%,处理时间一般在几秒至几十秒范围,是靠_使蛋白质凝固_杀菌的;升汞的浓度一般用1%~2%,处理的时间在5~10min范围,升汞是靠_Hg2+_杀菌的;杀菌剂中的次氯酸钠是靠_ClO-_杀菌的。11.培养植物适宜的温度大多在_25±2℃_,光照强度在_1000lx_,光照时间在_16h_。12、进行热处理植物脱毒的温度在__85℃___左右。13、配制螯合态铁盐需要的成分是__FeSO4·7H2O__和_Na2-EDTA_。14、培养基中有机态N素营养主要是硝态氮和铵态氮。15、原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交,其融合的方式分为_自发融合_和_诱导融合__两类。16、从再生植株倍性来看,小孢子培养通常产生单倍体植株,胚培养通常产生二倍体植株,胚乳培养通常产生三倍体植株。17.进行植物组织培养最基本的前提条件是配置培养基。18.离体叶片在诱导愈伤组织的培养基上培养,一般从

叶缘

叶脉

处容易发生愈伤组织。19.某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定,对其灭菌时不能进行高压蒸汽灭菌,而要进行过滤方法除菌。20配制培养基时,一般先配制母液,其目的在于__使用方便__和__用量准确_。21分生区域内无维管束,病毒只能通过___胞间连丝__传递。22在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__正比__,而与脱毒效果成_反比_。二、单项选择题1、(C)可作为植物外植体的表面消毒剂是。A.漂白粉和水B.次氯酸钠溶液和聚乙二醇C.氯化汞和新洁尔灭D.酒精和氯化钠2、(B)大多数植物组织培养最适温度一般为℃。A.37±1℃B.26±2℃C.16±2℃D.4±2℃(A)在适宜的培养条件下,还可使愈伤组织长期传代生存下去,这种培养称为。A.继代培养B.再分化培养C.胚状体培养D.驯化4、(B)大多数植物组织培养培养基最适pH为。A.5.0-7.0B.5.0-6.0C.3.0-4.0D.7.0-8.05、(A)外植体褐变的原因是。A.外植体中的多酚氧化酶被激活,使细胞的代谢发生变化。B.外植体中的琥珀酸脱氢酶被激活,使细胞的代谢发生变化。C.外植体中的磷酸化酶被激活,使细胞的代谢发生变化。D.外植体中的三磷酸腺苷酶被激活,使细胞的代谢发生变化。6.植物组培初代接种易污染的可能原因_BC_。A材料过嫩B材料过老C接种材料过大D每瓶接种数量太少7.影响培养基凝固程度因素有__AD_______。

A琼脂的质量好坏;B高压灭菌的时间;C高压灭菌的温度;D培养基的PH8.愈伤组织不分化、生长过旺、疏松,其原因有_C_A糖的浓度过高B培养基的渗透压过低C生长素和分裂素过高D生长素和分裂素过低9.有一种植物经初代培养得到4株无菌苗,以后按每36天继代增殖一次,每次增殖倍数为3倍,一年后繁殖苗有_CA3×410株B4×312株C4×310株D3×412株是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种方式。连续培养过程中,不断注入新鲜培养基,排掉等体积的用过的培养基,培养液中的营养物质得到不断补充。9、驯化或炼苗:在移植之前必须对试管苗进行提高其适应能力的锻炼,使植株生长粗壮,增强小苗体质以提高移苗成活率。同时进一步将瓶内植物打开进行炼苗。使试管苗慢慢适应外界环境。这个过程叫做驯化或炼苗。有瓶炼和盘炼,移栽方式有容器移栽和大田移栽。五、简答题(一)、某培养基的配方是MS+BA1.5mg/L+NAA2.5mg/L+IBA1.0mg/L+2.5%蔗糖+0.7%琼脂粉。MS母液的浓度分别是:大量元素50倍,微量元素100倍,铁盐20倍,有机物100倍;BA母液浓度1.0mg/ml,NAA母液浓度0.5mg/ml,IBA母液浓度0.2mg/ml。要配制800ml该培养基,需要吸取各种母液各多少ml?分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克?(要求写出计算步骤)大量元素:800/50=16ml微量元素:800/100=8ml大量元素:800/50=16ml微量元素:800/100=8ml铁盐:800/20=40ml有机物:800/100=8mlNAA=0.8*2.5/0.5=4mlIBA=0.8*1/0.2=4ml蔗糖=800*2.5%=20g琼脂粉=800*0.7%=5.6gMs绿色书23页表(二)、如何减轻试管苗玻璃化现象?如何防止外植体的真菌污染?1.(第四章21页)(1)利用固体培养方法,增加琼脂浓度,降低培养基中的渗透势,造成细胞吸水阻遏。或提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂,减少培养基中植物材料可获得的水分,这也可以抑制玻璃化的发生。

(2)适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度。或者,适当增加培养基中Ca、Mg、Mn、K、P、Fe、Cu、Zn元素含量,降低N和CL元素比例,特别是降低胺态氮的浓度,提高硝态氮量。

(3)增加自然光照。因为自然光中的紫外线能促进试管苗成熟。

(4)改善培养器皿的气体交换状态封口膜

(5)在培养基中添加其他物质。如添加马铃薯汁可降低油菜的玻璃苗的产生频率。2.(第三章11页)在接种前要求无菌室内做到用空气循环过滤装置使空气过滤灭菌或通过紫外线照射灭菌外,再利用超净工作台接种前,应开机15min以达到空气的充分过滤灭菌。而且接种时严格操作,如在接种前去掉橡皮筋,打开棉塞时动作要轻及去掉瓶塞后瓶子应拿成斜角,最好瓶口放在酒精火焰的前方等等。(三)、简答出一般茎段是怎样选材消毒和接种的?选材:较幼嫩的材料,器官的生理状态和发肓年龄,外植体的大小为0.5-1.0cm(第三章3页)消毒:自来水较长时间冲洗+70%酒精浸泡植物种+无菌水冲洗2~3次+2%~10%NaClO(0.1%HgCl2)12min+无菌水冲洗3次。(第三章5页)接种:①左手拿三角瓶或果酱瓶,用右手轻轻取下封口膜或盖子

②将三角瓶或果酱瓶的口靠近酒精灯火焰,瓶口稍微倾斜,这样瓶口外部在火焰上旋转灼烧数秒钟,后用镊子将外植体送入瓶中。(第四章4页)

六、论述题为什么茎尖培养可获得无特定病毒植株?怎样获得无特定病毒的试管苗?获得的无病毒苗用一种方法鉴定其真的无特定病毒的植株?1).感染病毒植株的体内病毒的分布并不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染深度越低,生长点则几乎不含或含病毒很少。

2).1.了解植物携带何种病毒,病毒在体内的分布位置2.母体植株的选择和预处理3.茎尖的剥离4.脱毒效果检测

3).取培养植株的叶片置于研钵中,加入少量的水和等量的0.1mol/L磷酸缓冲液(pH

7.0),磨成匀奖,将其涂抹在指示植株叶片上,在指示植物的叶片撒上金刚砂,通过轻轻摩擦使汁浸入叶片表皮细胞而又不损伤叶片。5分钟后用清水清洗叶面。将指示植株放于防蚜虫网罩的温室内。然后视其病斑的有无,来判断是否脱除了病毒。请阐述马铃薯脱毒和快繁的程序。为什么试管苗在经过热处理和茎

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