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文档简介
SampleTitle
关于bDNA技术的相关问题解答SampleTitlebDNA技术平台
branch-DNA(bDNA)技术原理是“三明治”核酸杂交,该技术的扩增特点是不经过呈指数增长的扩增过程,放大倍数确定,重复性,稳定性高。可以对mRNA做精确的定量检测及动态水平研究。它克服了传统的real-timePCR技术中的种种缺陷与不确定因素,无需抽提纯化RNA,无需反转录,无需PCR扩增,只要将样本用特定裂解液裂解后,经探针杂交与信号放大即可迅速得到更加精确的实验结果。除各种普通样本外,该技术对qPCR很难分析的血液样本与保存多年后mRNA高度降解的FFPE样本同样具有极高的准确度与重现性。SampleTitlebDNA技术的根本的生物学反响流程Amplificationcalculation:amplifierno.(6,20)xlabelprobeno.(4;20)xtreeno.(3;6-8)SampleTitleQuantiVirusTMassaycomponent(BasedonbDNAplatform)
Component1:
Coated96wellCapturePlate
CapturePlate(96-wellplate)UniversalCaptureProbe
Component2:
TargetSpecificProbeSetProbeSetCE’sLE’sBP’sSubstrateGlowLuminescenceAmplifierlabelAlkalinephosphataseconjugatedoligosBranchedDNA(Amplifier)
Component3:
bDNASignalAmplificationReagentsSampleTitleComponent1:Coated96wellcaptureplate(96孔捕获包被板〕该96孔板底包被有几百万支的单链DNA捕获探针,其序列为通用序列〔universalsequence),以3’端结合组分2〔探针组〕中的检测探针CE(CaptureExtender).Component2:TargetSpecificProbset(特制检测目标探针〕检测目标探针主要是由CE,LE,BL三个探针组成。CE主要连接被检测物和延长探针〔LE〕,LE和bDNA放大探针组结合,BL用于降低非特异性结合。Component3:bDNA信号放大局部bDNA信号放大探针为单链DNA,分两步逐级放大信号,共400倍信号放大,最终以化学发光,光信号表达。见以下图bDNA技术各组分解析SampleTitle具体的常规操作流程SampleTitle通过测得的光子数转换成的COPY数,为何代表的是真正病毒的活动度?
1,软件内设了标准曲线2,阳性质控明确知道mRNA拷贝数值,我们的公式可准确转换光子数到拷贝数。3,结合bDNA的工作原理图,HPVE6/E7
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