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文档简介

人脐带间充质干细胞操作规范一、人脐带间充质干细胞的分离和培养.准备5个培养皿，打开放在超净台中，将消毒过的平剪×1，弯剪×2，有齿镊射0，通风0.在、和入5l在入5l;将盛放脐带的器皿用酒精消毒外表面后放入超净台，用弯嘴钳取出脐带放入#培养皿，清洗残留血渍，用第2把弯嘴钳配合挤出脐带血管内的积血;4.将脐带转移至#培养时1.至成3cm(皿.离2和1入皿;.将剥至50ml，2000rpm离心5min;8.至0l中;.以5至5入4l养2+%S+%e+%MA+0匀;.第2每3(.培养43)用瓶液1化;.，0m离心5.用0m到;.按入0l液+2%UltroserG+1%Glutamine+1%MEMNAA)每3液;15.细胞融合率达到按:3传代。二、细胞传代.在代;.取0作;.(预留0l)入3l去;.入2l化3入1l终;.用0l，0m心5.弃上清液，加入适量脐带无血清培养液重悬细胞，按/瓶接种，每瓶培养液终体积为0l。三、细胞冻存.液(FBS+10%DMSO):取50ml入FB加入O入C藏;72.液2000rpm离心5，按l过1.C箱;.4hC存;.用5为0l。四、细胞复苏.于C净;.至50ml入20~30ml，2000rpm离心5.入0l，0m离心5.弃上清液，加入适量脐带无血清培养液重悬细胞，按/瓶接种，每瓶培养液终体积为0l。五、细胞

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