生物化学与基础分子生物学实验智慧树知到期末考试答案章节答案2024年中山大学

生物化学与基础分子生物学实验智慧树知到期末考试答案+章节答案2024年中山大学在进行琼脂糖凝胶电泳实验时，一位同学在琼脂糖未完全凝固时就拔梳子开始上样，那么可能造成的结果是（

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答案:电泳时条带不齐###不同孔道的样品交叉污染###加样时“枪头”容易戳破孔槽而导致样品渗漏以下关于米氏常数（Km）的表述，正确的有（

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答案:不同的酶Km值也不同###对于同一个酶，当它催化不同的底物时，Km值会发生变化在PCR反应中，以下哪些调整可以提高产物的特异性？（

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答案:适当减少模板DNA的浓度###减少反应的循环次数###适当减少引物的浓度以下操作中有可能导致米氏常数和最大反应速率测定出现明显偏差的有（

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答案:底物溶液在倍半稀释过程中操作失误###加入所有试剂后，采用轻敲酶标板的方式进行混匀###数据处理时，未舍弃出现明显偏差的数据点，直接进行拟合在以下定量方法中利用肽键发生反应的有（

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答案:BCA法###Lowry法在紫外检测时，关于比色皿光面和毛面的说法，不正确的是（

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答案:在拿取比色皿时，手接触哪一个面都是可以的###放入检测仓时，如果光面和毛面放反了，会导致检测得到的光吸收值大于实际值ELISA实验中，为提高实验的准确性和可信性，应设置足够的空白对照，包括（

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答案:不加入一抗的空白对照###不加入二抗的空白对照###不加入显色底物的空白对照###不加入蛋白样品的空白对照从原理上分析：在进行qRT-PCR时，与PCR反应相比，需要额外加入的试剂是（

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答案:SYBR

Green探针或其他荧光探针###逆转录酶一幅规范的数据图必须具备的信息包括哪些？（

）。

答案:横纵坐标轴的数据刻度###横纵坐标轴标题及单位###图表标题关于抗原或抗体固相化的过程，正确的说法包括（

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答案:固相化指的是将抗原或者是抗体吸附在固相表面的过程###固相化后的抗体或抗原的免疫原性不受影响当进行生物化学实验时，如果检出的信号过低，不会影响对实验结果的判断。（

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答案:错提取核酸时，如果得到的是杂质含量较少的产品，那么这一产品测得的OD260/OD280

的比值可能为（

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答案:1.9###2.0竞争性抑制剂会影响底物与酶的结合，在米氏方程中表现为

Km

与

Vmax

同时下降。（

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答案:错在进行SDS实验时，一位同学在浓缩胶未完全聚合时就拔梳子开始上样，那么可能造成的结果是（

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答案:电泳时条带不齐###不同孔道的样品交叉污染###无法完全上样，样品溢出加样槽二代测序技术（高通量测序技术）与Sanger测序法相比，主要的改进包括（

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答案:使用桥式PCR技术###使用固相载体（如芯片）###使用荧光探针实时记录数据###使用了边合成边测序技术ELISA实验检测得到的信号较弱甚至是无信号，可以采用哪些方法进行调整？（

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答案:更换缓冲液，特别是孵育缓冲液的配方###延长包被或孵育的时间，或提高孵育的温度###更换吸附力更强的ELISA板使用紫外吸收法进行蛋白质定量，而获得的蛋白质样品总量较少，可以选择的仪器包括（

）。

答案:酶标仪###NanoDropTM

超微量紫外分光光度计只要自己能记住，什么时候写实验记录都是没问题的。（

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答案:错在ELISA或Western

Blot实验中，封闭液可以用5%脱脂奶粉溶液代替。（

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答案:对在PCR反应中，适当提高模板DNA的浓度可以提高扩增产物的特异性。（

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答案:错如果

PCR

实验中，实验组经电泳分离后出现明显拖尾条带，可以通过提高退火温度来进行调整。（

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答案:对由于酶标板在仪器检测时默认所有孔内的液体高度是一样的，所以即便在加样时某些孔内出现了液滴挂壁现象也不影响检测结果。（

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答案:错在使用NanoDrop检测紫外吸光度时，如果待测试样内含有表面活性剂会导致检测失败。（

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答案:对在质粒的碱裂解法提取中，由于质粒的天然超螺旋状态，因此，复性时比染色体DNA要慢。（

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答案:错在细菌转化的实验中，如果涂布了市售感受态细胞的平板上没有长出菌落而涂布了自制感受态细胞的平板上长出了较多菌落，说明市售感受态细胞一定是失效了。（

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答案:错PCR反应中，复性温度应高于引物的Tm值。（

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答案:对感受态细胞制备中，钙离子的作用主要是使细胞膜呈现液晶态。（

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答案:对酶活力的国际单位（IU）是指在优化的条件下，1

min内转化

1

µM

底物所需的酶量。（

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答案:错如果实验室的ELISA板刚好用完了，可以用96孔板代替ELISA板进行实验。（

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答案:错在紫外检测时，所谓的空白扣减就是指将实验样品检测得到的吸收值减去空白对照样品（参比管）的吸收值。（

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答案:对如果一个待分离蛋白质是具有四级结构的蛋白质，使用SDS进行分离，并使用考马斯亮蓝法进行染色。那么，样品是否用巯基乙醇处理对于电泳结果会有什么影响？（

）

答案:是否使用巯基乙醇处理对产生的条带数量可能没有影响以下关于ELISA实验各个步骤的描述，不正确的是（

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答案:所有的洗涤步骤都是使用PBS缓冲液进行洗涤质粒提取后，可以使用氯仿/酚抽提、异丙醇沉淀等方法进一步除去残存的蛋白质和核酸，得到纯化的质粒DNA。（

）

答案:对在进行不同组别的实验数据之间的比较分析时，可以采用柱形图的作图方式展示。

（

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答案:对以下哪个标志代表了该化学品属于腐蚀性危险品？

（

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答案:当某一个实验技术的英文名称以“immuno-”作为前缀时，代表这一项技术主要利用了（

）

答案:抗原-抗体反应在提取质粒DNA时的核心操作是柱层析，在提取RNA时的核心操作是萃取。（

）

答案:对使用酶标仪进行紫外检测时，当酶标板的内壁出现明显挂壁液滴时，对实验结果不会有明显的影响。（

）

答案:错实验室安全的首要原则是保证人员安全和环境安全。（

）

答案:对

答案:偏大酶促动力学测定实验中，最重要的操作要领是（

）

答案:注意控制时间，保证孔间反应时间一致

答案:比色皿厚度（如图所示）在进行土豆酪氨酸酶活力测定时，某位同学计算得到的酶活力是

0.03

IU，但在计算结束后发现光径采用了默认的

1

cm

而不是实际测量时的

0.6

cm。那么，这位同学实验得到的实际酶活力应为（

）

答案:0.05

IU有机溶剂沉淀蛋白质是蛋白质分离的重要方法。下列描述中与有机溶剂沉淀法无关的是（

）

答案:低浓度下表现为盐溶现象，高浓度下表现为盐析现象在以下哪一因素对离心效果没有明显影响？（

）。

答案:环境温度在PCR反应中，以下哪些调整可以提高反应的产量？（

）

答案:提高反应体系中Mg2+的浓度凝胶过滤层析法分离不同蛋白质的原理是（

）

答案:凝胶内部的微孔结构像筛子一样区分不同蛋白质的大小

答案:凝胶的浓度变小了，所以特定条带在该凝胶中的迁移速度会变大。天然状态的质粒主要存在状态是（

）

答案:超螺旋以下哪个ELISA方法无法实现信号的放大，所以灵敏度偏低？

（

）

答案:直接法进行PCR时，如果分别以基因组DNA和质粒DNA作为模板来说，在同样的体系中基因组DNA的需要量往往比质粒DNA的要少。

答案:错限制性内切酶切割DNA链，产生的是具有粘性末端的产物。

答案:错进行常规PCR时，定制的PCR引物使用脱盐纯化进行纯化就可以了。

答案:对如果需要进行多重定量PCR检测，也就是在同一个体系里同时检测多个目的基因片段，可以使用SYBRGreen探针。

答案:错对新冠肺炎疑似患者进行的核酸检测的实质是进行实时定量的逆转录PCR实验。

答案:对逆转录PCR（RT-PCR）使用的起始原料（模板）是

答案:mRNA限制性内切酶作用的实质是使DNA水解断裂，破坏磷酸二酯键。

答案:对如何能够尽量避免在PCR反应出现非特异性扩增？

答案:调整缓冲体系中的溶液组成成分###减小加入的模板DNA或聚合酶的量###重新设计引物以下关于琼脂糖凝胶电泳的叙述，不正确的是

答案:只要分子量大小一致，不同的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率是一样的PCR反应最主要是利用了DNA哪方面的性质？

答案:变性与复性以下关于本次实验的操作，正确的是

答案:所使用的耗材应为无菌的一次性耗材###可以根据实验所需的管数，现将基础的试剂配好混匀后分装至各试验管###无论是DNA聚合酶还是限制性内切酶，都应在所有试剂全部加完之后最后加入下列关于实时荧光PCR技术中探针的描述，正确的是

答案:由于加入探针的量是有限的，因此在PCR反应进行到后期时，检测到的荧光值会出现检测平台###Taqman探针利用的是荧光能量共振转移的原理###Taqman探针是需要根据具体扩增片段进行特定设计的所谓的“退火”，其实就是双链DNA变性解链后，发生复性的过程。

答案:对PCR反应没有出现预期的扩增产物，有可能的原因包括

答案:引物设计不合适###缓冲体系不合适或体系中存在蛋白酶抑制剂###PCR循环设置条件未优化###模板含量过低以下哪一种试剂不属于PCR反应所需的原料？

答案:NTP提取质粒DNA时，通过控制体系温度的变化实现DNA的变性与复性。

答案:错本次实验中，提取质粒DNA的本质是利用分子的溶解度差异实现的。

答案:对在氯化钙法中，质粒DNA进入细胞内的前提条件是DNA与钙离子形成复合物并黏附于细胞膜上。

答案:对只要在体系中维持足够高的浓度，外源基因可以直接到宿主细胞的细胞核内。

答案:错当DNA发生变性后，以下说法不正确的是

答案:溶解性增强关于本次实验中固体LB培养平板的配制过程，不正确的操作时

答案:加入抗生素（如卡那霉素）后再整瓶进行高压灭菌关于超微量紫外分光光度计的叙述，正确的是

答案:检测时不需要比色皿###当检测样品体积较少使用可避免因大比例稀释所带来的误差###如果待测样品溶液内包含表面活性剂，则不能使用质粒DNA在碱性条件下，会发生什么改变？如果将体系条件恢复到中性，又会发生什么改变？

答案:变性；复性下列关于氯化钙法制备感受态细胞和转化质粒，不正确的说法是

答案:整个过程全程都在0℃条件下进行要确保实验过程中的无菌操作，我们可以采用哪些方法对实验中使用到的试剂、耗材和工作环境进行消毒灭菌？

答案:化学剂消毒法###过滤除菌法###湿热灭菌法###干热灭菌法细菌细胞浸泡在CaCl2低渗溶液中足够长的时间后，细胞变为膨胀的球形状态。

答案:对提取质粒DNA时，是依靠其与基因组DNA的哪方面性质差异实现分离提取的？

答案:结构###分子大小以下关于本次实验步骤的叙述，正确的是

答案:获取足够多的处于对数生长期的受体菌###转化质粒时，质粒DNA的含量应控制在5~50ng范围内，过多或过少均会导致实验的失败ELISA实验的最后一步——发光底物的检测中，加入终止液后，什么时候进行检测都可以。

答案:错在ELISA实验中，一抗包被完毕的酶标板可以直接进行下一步，即加入样品溶液孵育的步骤。

答案:错在实验设计没有问题的情况下，洗板是否彻底成为了ELISA实验成败的关键。

答案:对关于多道移液器的使用注意事项，正确的选项包括

答案:慢吸慢放以确保吸液体积准确无误###一旦吸头碰到孔内其他液体，立即更换新的洁净吸头###确保各个道次之间的吸液体积一致关于夹心法和竞争法异同点的描述，不正确的选项是

答案:最终的检测，都是看检测信号的强弱，检测信号越强，代表待测蛋白质的含量越丰富以下关于洗板这个步骤的描述，错误的是

答案:如果检测结果背景偏低，有可能是洗板不充分导致的夹心法中，一抗和二抗识别的抗原表位应该是同一个。

答案:错96孔板虽然可以吸附抗原或抗体，但是不能够参与免疫反应。

答案:对以下关于ELISA实验设计与优化的叙述，正确的是

答案:首先要确保所选择的一抗是适用于ELISA实验的###如果标准曲线线性较差，可以考虑重新溶解标准品，且在开盖前进行离心###更换底物溶液或重新配制底物溶液有助于提高检测信号ELISA法最终检测的信号实际上是

答案:标记在二抗上的酶将底物转化为有色产物的光吸收ELISA实验中，包括哪些单元操作？

答案:利用多道移液器加样与混匀###洗板###使用酶标仪进行紫外检测以下关于ELISA实验中非特异性结合的描述，不正确的是

答案:非特异性结合与目的蛋白和抗体之间的亲和结合相比，结合力微不足道，不会影响实验结果抗原或抗体可以通过哪些作用力吸附到固相载体上？

答案:亲水键###疏水力###静电力（离子键）###共价作用力如果一个小分子药物与特定靶标蛋白质结合后会导致该蛋白质变构，那么，可以使用电泳技术进行分析鉴定。

答案:对抗原-抗体反应是机体免疫系统针对外源性物质进行免疫的反应本质，因此，借助抗原-抗体反应开展的检测技术只能针对病原体进行检测。

答案:错蛋白质样品经电泳分离后，凝胶可直接进行Westernblot显色。

答案:错在聚丙烯酰胺凝胶聚合过程中，加入的过硫酸铵属于

答案:催化剂一般来说，我们描述蛋白质的空间结构变化不涉及到下列哪一级结构的改变？

答案:一级结构对于一个蛋白质来说，无论其是否变性，理论上都可以进行SDS分离。

答案:对一般来说，WesternBlot法有哪些主要步骤？

答案:显色###转膜###抗体孵育###电泳分离对于一个具有四级结构的蛋白质来说，进行SDS分离后，可能得到的条带情况是

答案:同时出现多个条带，分子量对应的蛋白质既包括单体，也包括高级结构在聚丙烯酰胺凝胶电泳中加入SDS的目的是

答案:破坏蛋白质结构中的共价键###屏蔽分子自身所带电荷对迁移率的影响如果电泳分离蛋白质样品的分离效果不佳，分辨率不好，下列哪种调整方式不会取得明显的改善？

答案:增大样品的上样量在配制聚丙烯酰胺凝胶时必须使用通风橱是因为下列哪些试剂属于有毒物质或易燃物质？

答案:丙烯酰胺###TEMED###过硫酸铵在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中，分子的迁移率与什么有关？

答案:空间结构###所带电荷###分子量大小在进行WesternBlot实验时，分离蛋白质采用的电泳技术应为

答案:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳在酶促反应动力学中，可以使用倍半稀释法进行底物溶液的配制，关于这一方法，正确的说法包括

答案:该方法实际上就是按照1:1的比例逐级进行溶液的稀释###在进行倍半稀释法时，每一个浓度溶液的完全混匀至关重要###该方法可以避免低浓度底物溶液在直接配制时所产生的操作误差以下关于酶标仪的描述，正确的是

答案:酶标仪需要配合多孔板使用###在使用酶标仪检测的过程中，可以同时对多个孔道内的紫外吸收值或光吸收值进行检测###酶标仪的本质是紫外分光光度计或光电比色计在使用多道移液器进行加样时，放液一定要保证枪头尖端抵靠在容器内壁或浸入溶液下方。

答案:对只要是在相同条件下测定同一个酶的同一个反应，那么通过v-[S]图和双倒数图测定得到的结果是相同的。

答案:错当体系中存在酶的竞争性抑制剂时，关于Km和Vmax值的描述正确的是

答案:Vmax不变，Km增大下列关于酶促反应速率和酶活力之间的关系，正确的是

答案:酶的活力计算公式与酶促反应速率的计算公式从本质上说都利用了朗伯比尔定律对于一个给定的反应，影响酶活力的因素包括

答案:是否存在抑制剂###反应体系温度###反应体系酸碱度###底物浓度对于酶促反应来说，可以认为反应速率越大，酶的活力越高。

答案:对如果一个抑制剂不与酶的活性中心结合，只是结合酶的其他部位而导致酶发生变构，这属于不可逆抑制。

答案:错在双倒数图中，拟合得到的直线与y轴的交点是

答案:1/Vmax从反应动力学的角度分析，酶促反应是

答案:既有一级反应，也有零级反应米氏常数的单位其实表征的是浓度。

答案:对酶促反应动力学实验要获得较为可信的结果，可以采取的措施包括

答案:精确加样###精确控制反应时间###精确控制反应温度###合理设置复孔及对照组由粗酶纯化获得精酶的过程中，酶的比活力随着酶的纯度提高而提高。

答案:对有机溶剂沉淀法比盐析法分辨率高，可以用于蛋白质的精度纯化。

答案:错当柱床体积相同时，细而长的凝胶柱往往比短而粗的凝胶柱对不同分子量大小的蛋白质的分离效果更高。

答案:对蛋白质分离纯化的前处理可以采用的方式包括

答案:研磨破碎###超声破碎###酶解在绘制凝胶层析柱纯化土豆酪氨酸酶的洗脱曲线时，酶标仪在480nm处光吸收测量的是

答案:产物多巴色素（多巴红）的生成以下关于有机溶剂沉淀法分离土豆酪氨酸酶的实验描述不正确的是

答案:有机溶剂沉淀法相对于盐析，分辨率更高，蛋白质活性更易保留，使用得也更广泛###实验中保持冰上操作的目的是为了避免蛋白酶对土豆酪氨酸酶的降解该实验在制备土豆匀浆时，需要加入抗坏血酸，这样做的主要目的是

答案:防止实验原料氧化凝胶层析法一种常用的蛋白质纯化技术。以下关于凝胶层析法的描述不准确的是

答案:葡聚糖凝胶交联度越高，凝胶颗粒内网孔结构越紧密，对蛋白质的纯化效果越好如果目的蛋白质与杂质的分子量差异明显，那么可以采用哪些细分级分离方法？

答案:分子筛层析###SDS电泳###超速离心在利用凝胶层析色谱法纯化蛋白质时，分子量大的蛋白质比分子量小的蛋白质先从层析柱上洗脱下来。

答案:对有机溶剂沉淀法中影响蛋白质沉淀效果的因素包括

答案:体系温度###是否存在金属离子###目的蛋白的浓度###溶液pH值粗分级分离最主要是利用了物质之间的什么性质差异进行的？

答案:溶解度关于有机溶剂沉淀法分辨率的描述不准确的是哪个

答案:土豆酪氨酸酶精酶的质量是由Bradford法测量得到的精酶浓度和接收得到的洗脱液总体积相乘计算的紫外检测的光路方向跟生物化学实验没有太大关系，知不知道无所谓。

答案:错当待测样品检测得到的紫外吸收值高于标准曲线中最高浓度的吸收值时，可以直接将吸收值带入线性拟合方程中进行计算。

答案:错紫外检测前进行调零（zero）的目的是扣除比色皿及溶液自身的紫外吸收。

答案:对Lowry法和BCA法都是在双缩脲法的基础上，加入了提高灵敏度的步骤。

答案:对在进行考马斯亮蓝染色比色法测定蛋白质含量时，配制样品时应做到

答案:每一管中加入考马斯亮蓝染料后立即混匀样品溶液从结构特征上来说，蛋白质定量检测一般可以利用哪些化学结构？

答案:特征性元素###某些氨基酸的R基团###肽键下列哪一个氨基酸的含量对紫外吸收法的结果无明显影响？

答案:甘氨酸当你需要对蛋白质样品进行精确定量，且样品所处的溶液环境可能存在一些检测干扰因素时，你应该选择哪种定量方法？

答案:BCA法考马斯亮蓝主要是利用哪些作用力与蛋白质相互结合的？

答案:疏水力###静电相互作用凯氏定氮法的本质是滴定法。

答案:对下列哪些蛋白质定量方法利用了双缩脲反应进行检测？

答案:BCA法###Lowry法（福林酚法）紫外吸收法检测蛋白质含量具有快速、灵敏度高的特点，所以广泛应用于蛋白质分离纯化时的快速鉴定。

答案:错当待测样品溶液中含有下列哪类物质时，会对凯氏定氮法测定蛋白质含量产生明显的干扰？

答案:含有氨基的杂质###含氮量特别高的杂质当待测样品在溶液中未发生明显变化，但溶液产生了较多沉淀导致了浑浊，此时直接使用该溶液进行紫外检测，结果不会受到明显影响。

答案:错氨基酸自动分析仪的技术基础是离子交换层析法。

答案:对在荧光光谱中，一定要先给予待测样品激发光，样品才能产生发射光。

答案:对在使用移液器时，应注意区分上方按钮的两个不同档位，吸液时需按下一档，放液时需按至二挡。

答案:对在使用离子交换层析法进行细分级分离时，如果使用的是磺酸型阳离子交换柱，那么，随着洗脱液的加入，先洗脱出来的是

答案:阳离子含量较少的分子以下哪些分离方法是基于物质的分子大小进行分离的？

答案:超滤法###透析法沉淀法分离溶液中的不溶物，这主要是利用哪个性质实现的？

答案:溶解度以下哪一个使用习惯可能造成移液器的损耗或损坏？

答案:为了保证吸头与移液器的连接紧密