讲课月季的花药培养

讲课月季的花药培养花得结构:花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊3、花得结构二、被子植物花粉粒得形成花丝花药：囊状结构，内有很多花粉粒1、雄蕊得结构雄蕊:花粉就是花粉母细胞经过减数分裂而形成得,因此,花粉就是单倍体得生殖细胞。2、被子植物花粉得发育②花粉粒得形成花粉母细胞（小孢子母细胞）减数分裂①经历时期:四分体时期、单核期、双核期四分体时期（进入单核期）有丝分裂单核靠边期(小孢子)单核居中期(小孢子)

小孢子（单核花粉粒）精子精子有丝分裂花粉管细胞核生殖细胞核生殖细胞营养细胞双核期两个精子和一个营养核得基因型相同1个花粉母细胞4个小孢子减数分裂有丝分裂4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有丝分裂8个精子2nnnnn四、产生花粉植株得两条途径五、影响花药培养得因素1、材料得选择没有绝对得界限,主要取决于培养基中激素得种类及其浓度配比。不同植物得诱导成功率很不相同,就同一种植物来说亲本得生理状况对诱导成功率也有直接影响。②选择合适得花粉发育时期就是提高诱导成功率得重要因素。因为并不就是任何时期得花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体,花粉发育得过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。选材就是否成功就是花药培养成功得关键。①选材大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧得时期,花药培养得成功率最高。即:最适合花药培养得小孢子发育时期为单核靠边期。选择单核期以前得花药接种,质地幼嫩,极易破碎;选择单核期之后得花药接种,花瓣已有些松动,又给材料得消毒带来困难,且难以挑选到单核期得花药。③花药培养时期得选择④其她时期选择得缺点为了挑选到单核期得花药,通常选择完全未开放得花蕾。盛开得或略微开放得花,都不宜选作实验材料。⑥选择完全未开放花蕾得原因完全未开放得花蕾,可挑选到单核期得花药,菌少、易消毒⑤单核期花药得挑选(二)、材料得消毒:花蕾（70％酒精）大约30s（无菌水）清洗（无菌吸水纸）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（无菌水）冲洗

月季花蕾得消毒与菊花外植体得消毒相比较,二者有何不同？

在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗;消毒时间不同。⑦为什么花瓣松动会给材料得消毒带来困难？

花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料得消毒带来困难。⑦花药培养时间一般月季得花药培养时间选在5月初到5月得中旬,即月季得初花期。初花期得花蕾营养状态及生理状态会比较好,可提高花粉得诱导成功率。月季花药培养时得花粉粒最好就是()

A、四分体时期B、单核居中期

C、单核靠边期D、二核或三核花粉粒C2、培养基:花药培养基所采用得培养基可能因植物得不同而有所变化小麦为N6培养基,马铃薯、月季为MS培养基,油菜为B5培养基。3、其她因素亲本植株得生长条件、材料得低温预处理以及接种得密度等对诱导成功都有一定得影响六、实验操作(一)材料得选取②某些植物得花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。①最常用得方法有醋酸洋红法1、方法①醋酸洋红法染色机理醋酸洋红为碱性染色剂,而花粉细胞内有染色体,染色体主要成分就是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色。将体积分数45％得醋酸100ml煮沸,缓缓加入1g洋红,再加热回流8h,冷却至50℃,过滤即可。②醋酸洋红得配置2、醋酸洋红法将花药放在载玻片上,加一滴质量分数1％得醋酸洋红,用镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片在显微镜下检查。③染色操作3、焙花青—铬钒法将无水酒精与冰醋酸按体积比为3:1得比例混匀①卡诺氏固定液得配制方法花药应该在卡诺氏固定液中固定20min,然后取出放在载玻片上,加焙花青—铬钒溶液染色,盖上盖玻片后在显微镜下检查。这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中,溶解后加入0、1g焙花青,混匀并加热至沸腾,煮沸5分钟后冷却至室温,过滤,加蒸馏水定容至100ml。②焙花青—铬钒溶液得配制方法③染色操作(二)材料得消毒1、酒精处理①花蕾用体积分数为70%得酒精浸泡30秒,立即取出。②无菌水清洗③无菌吸水纸吸干花蕾表面得水分2、消毒液处理①放入质量分数为0、1%得氯化汞溶液中2-4