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染色与细菌的形态观察技术目录/Contents1染色的基本程序染色第一节染色与细菌的形态观察技术媒染染色固定干燥涂片脱色复染染色的基本程序01染色的基本程序1.载玻片处理（1）滴上95％酒精2～3滴，用清洁纱布擦拭，然后以钟摆速度通过酒精灯焰3～4次。（2）若上法仍未能除去油渍，可再滴上1～2滴冰醋酸，用纱布擦净，再在酒精灯火焰上轻轻拖过。玻片洁净后，用玻璃铅笔在预涂材料处的背面划一个直径1.5cm的圆圈，用以标记。01染色的基本程序2．涂片方法（1）菌落涂片方法涂片时，左手握菌种管，右手持接种环（又称铂金耳）取1～2环生理盐水，置于载玻片上，然后将接种环在火焰上灭菌，待冷后，从菌种管内钓取少许菌落，置于生理盐水中混匀，涂成直径1.5cm的涂膜，此膜既薄又均匀为好，待干即成。（2）菌液涂片法用灭菌接种环沾取菌液（液体培养物、血清、乳汁、组织渗出液等）1～2接种环，均匀涂抹在载玻片上,使成直径为1.5cm左右圆形或椭圆形涂膜，自然干燥后备用。01染色的基本程序2．涂片方法（3）血液涂片方法先取一张干净无油垢边缘整齐的载玻片，其一端沾取少许血液，以45度角放在另一张干净无油垢的载玻片一端，从这端向另一端推成薄而均匀的血膜，待干后备用。（4）组织涂片方法先用镊子夹持组织局部，然后以灭菌剪刀剪取一小块，夹出后以其新鲜切面在载玻片上压印或涂成一薄层。01染色的基本程序3.干燥涂片最好在室温中自然干燥。必要时，可将标本面向上，在离酒精灯火焰远处烘干，切勿紧靠火焰，以免标本糊焦而不能检查。01染色的基本程序4．固定有两种固定方法：（1）火焰固定将已干燥好的抹片，使涂面向上，以钟摆速度通过酒精灯火焰四次，使固定后的标本触及皮肤时，稍感烧烫为度。放置冷却后，进行染色。（2）化学固定血液、组织脏器等抹片作姬姆萨氏染色或单染色时，不用火焰固定而用甲醇固定，可将已干燥的抹片浸入甲醇中2～3min，取出晾干；或者在抹片上滴加数滴甲醇使其作用2～3min后，自然挥发干燥，抹片作瑞特氏染色时则不必作特别固定，染色液中含有甲醇可以达到固定目的。01染色的基本程序5．染色根据检验目的不同，选择不同的染色方法进行染色。染色时滴加染液，以覆盖标本为度。01染色的基本程序6．媒染凡能增强染料和被染物的亲和力，使染料固定于被染物及能引起细胞膜通透性改变的物质，称媒染剂。常用的有明矾、鞣酸、金属盐和碘等，也有用加热法促进着色。媒染剂可用于初染与复染之间，也可用于固定之后或含于固定液、染色中。01染色的基本程序7．脱色

凡能使已着色的被染物脱去颜色的化学试剂称为脱色剂。常用乙醇、丙酮等作为脱色剂。脱色剂可以查出细菌与染料结合的稳定程度，作为鉴别染色之用。01染色的基本程序8．复染

已脱色处理的细菌或其结构常以复染液作复染以便于观察。复染液

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