色谱鉴别法-气相色谱法P

主讲老师：陈郁生物制药技术专业教学资源库气相色谱鉴别法气相色谱鉴别法PART01残留溶剂的简述

药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用过，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。

研究的目的：控制药物质量，保障病人用药安全。气相色谱法及其应用

根据2020版《中国药典》的解释，气相色谱法系用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱，对样品进行分离测定的色谱方法。气相色谱法简称为GC法，因其具有高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快、样品用量少等特点，而被广泛应用于环境、医药、石油、生物、法医学、食品、化工等行业，是现在分离分析的重要方法。气相色谱法检测残留溶剂的原理

气相色谱法是利用气体作流动相的色层分离分析方法。气化的试样被载气带入色谱柱中，柱中的固定相与试样中的各组份分子作用力不同，各组分的保留时间不同，彼此分离。根据残留溶剂色谱峰的高低和面积大小，可对残留溶剂进行定量分析。一般可以分为直接进样和顶空进样，直接进样用于高沸点的溶剂检测，顶空进样用于低沸点的溶剂检测。气相色谱法检测残留溶剂的原理气相色谱法的基本流程图溶液配制1、样品溶液的制备：顶空进样除另有规定外，精密称取供试品0.1~1g；根据样品的溶解性选择合适的溶剂：通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可采用N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其他适宜溶剂；根据品种中实际所含残留溶剂的限度规定配制供试品溶液，浓度满足系统定量测定的需要。无论是直接进样或顶空进样，都应能使样品完全溶解，使其中的残留溶剂释放，否则可能造成结果与实际情况完全不符，在允许的情况下，可以采用充分研磨或超声的方法辅助溶解。溶液配制2、对照品溶液的制备：根据实验确定的具体检测对象，配制对照品溶液。精密称取各有机溶剂适量，采用与制备供试品溶液相同的方法和溶剂制备对照品溶液。上机检测1.按产品要求编辑序列（检测方法、进样针数、样品位置、样品批号……），将待测溶液放于样品盘中相应位置2.仪器充分平衡后，运行序列。系统稳定性1.系统适用性：进样品溶液前需确定系统适用性符合要求（如对照品溶液峰面积的RSD、系统适用性溶液的理论塔板数、分离度、拖尾因子……）2.进样过程中系统稳定性计算1.残留溶剂测定方式有外标法、内标法、面积归一化法等，需根据具体产品选择合适的方法。检测过程中注意事项

第一点：载气使用时应有足量，并要有盈余，以免载气不足影响检测；并按要求控制好气体的出口压力，保证气体的稳定性；所用载气的纯度需应为99.99%。第二点：应根据供试品中残留溶剂的沸点选择顶空温度。对沸点较高的残留溶剂，通常选择较高的顶空温度。顶空平衡时间一般为30~45分钟，以保证供试品溶液的气-液两相有足够的时间达到平衡。第三点：采用顶空进样时，注意调整压盖钳的压盖深度，确保瓶盖能正确地压紧，但不至于引起金属瓶盖裂缝、严重变形等。检测过程中注意事项

第四点：编辑序列的时候，进样序列中样品位置必须得跟实际位置保持一致。第五点：每次实验完毕后，都必须先降低柱温至室温后，再降低进样口和检测器的温度至80℃以下方可关机，再切断气路和电源。第六点：比较重要的，整个实验过程当中所需要的定量工具