润肺消积胶囊对小鼠肺癌治疗作用的实验分析

润肺消积胶囊对小鼠肺癌治疗作用的实验分析

【摘要】目的：探讨润肺消积胶囊对小鼠肺癌的治疗作用，为中药对肿瘤的治疗作用的进一步研究提供实验依据。方法：本研究将60只小鼠随机分为6组，分别给予不同的处理，运用Lewis肺癌小鼠模型，观察润肺消积胶囊对小鼠体重、肿瘤重量、生长抑制率、生存期的影响。结果：复方润肺消积胶囊治疗小鼠肺癌，能够抑制肿瘤的生长，延长生存时间，改善小鼠生活质量。结论：润肺消积胶囊对小鼠Lewis肺癌具有良好的治疗作用。【关键词】肺癌；润肺消积胶囊；实验研究肺癌是目前死亡率和发病率均最高，对人类生命健康具有最大危害性的恶性肿瘤之一，对西药、化疗、放疗的敏感性均较差，目前尚没有治疗肺癌的特效药物。所以，目前肿瘤治疗工作的重心仍然是寻找和发现对肿瘤治疗效果较好的药物。中药是具有中国特色的治疗疾病的方法。中药尤其是中药复方在中医基础理论的指导下，通过君臣佐使合理配伍，其活性物质群可能作用于各个水平的多环节，多靶点且安全性强，具有较强的优势。本研究以中医辨证论治理论为基础，探讨复方润肺消积胶囊对肺癌的治疗作用，从而为中西医结合治疗肺癌探索新途径并提供理论依据。1资料与方法1.1实验动物选用的C57BL/6N小鼠（6周龄，雄性，体重16-20g）均购自黑龙江中医药大学实验动物中心。Lewis肺癌荷瘤小鼠购自哈尔滨医科大学肿瘤医院（哈尔滨医科大学附属第三医院）实验动物中心。1.2药物与试剂润肺消积胶囊：方药主要组成有太子参、黄芪、牡丹皮、莪术、白花蛇舌草、山慈菇、茯苓、麦冬、天花粉、地骨皮等（中药饮片均购自黑龙江中医药大学附属第一医院中药局），以临床配伍方法，按传统方法粉碎为散剂。具体方法参照《中医科研设计与统计方法》执行。西药1：顺铂注射液；西药2：生理盐水。1.3实验仪器医用超净工作台（SW-GIF，中国苏州净化设备厂）；高速冷冻离心机（R21，日本日立制作所）；二氧化碳培养箱（2300，美国谢尔登公司）；倒置生物显微镜（日本OLYMPU产品）；光学显微镜（中国光学仪器厂）；电热恒温水浴箱（北京医疗设备厂）；y-放射免疫计数器（QC-911，中国科学技术大学中佳公司）；液闪测量仪（BECKMAN公司）。1.4方法及分组①润肺消积胶囊组方研究本方以益气养阴、润肺化痰、散积消徵为组方原则，体现祛邪与扶正相通，功补兼施的治疗原则。药物组成为太子参、黄芪、牡丹皮、莪术、白花蛇舌草、山慈菇、茯苓、麦冬、天花粉、地骨皮等。②润肺消积胶囊高中低剂量的制备高中低剂量的制备分别按成人（60千克体重）临床用药的20、10、5倍，即分别按17.92g/kg、8.96g/kg、4.48g/kg给药。然后将所取中药进行浓缩制成汤剂。③造模方法将lewis肺癌细胞株进行人工培养，制成癌细胞悬液，取小鼠皮下注射癌细胞悬液建立肺癌小鼠移植瘤模型。④实验分组将所制成的移植瘤模型鼠随机分为5组，每组10只，即：模型对照组、高剂量给药组、中剂量给药组、低剂量给药组、西药化疗组；另选未建模10只小鼠作为正常组。⑤润肺消积胶囊治疗肺癌模型小鼠造模后第6天开始给药，模型对照组给予生理盐水，按10ml/kg灌胃；低中高剂量组分别给予0.5ml汤剂，早晚给每天二次；西药组按25mg/kg用生理盐水配成，给予0.2ml，每天一次给5天。疗程均为14d。第15天观察小鼠体重变化，各组分别处死小鼠5只，取出各组处死的荷瘤小鼠瘤体的重量，称重后再计算出各组小鼠的肿瘤生长抑制率。1.5统计学处理计量资料X±SD表示，两样本均数的比较用t检验。用SPSS13.0统计软件，对数据进行统计学处理。2结果2.1润肺消积胶囊对肺癌小鼠体重的影响（见表1）注：*表示与模型对照组比较，P＜0.05；#表示与西药化疗组比较，P＜0.05.由表1可见，中药低剂量给药组、中剂量给药组、高剂量给药组的小鼠体重均大于模型对照组，经统计学检验，低、中、高剂量给药组与模型对照组的差别均有统计学意义（P＜0.05）；西药化疗组小鼠体重低于模型对照组，且两者差别具有统计学意义（P＜0.05）。2.2润肺消积胶囊对小鼠肿瘤重量及生长抑制率的影响（见表2）表2润肺消积胶囊对小鼠肿瘤重量及生长抑制率的影响（χ±s）注：*表示与模型对照组比较，P＜0.05；#表示与西药化疗组比较，P＜0.05。A=对照组瘤重，B=实验组瘤重，每组抑瘤率（%）=（A-B）/A×100%。2.2.1由表2可知，润肺消积胶囊低剂量给药组、中剂量给药组、高剂量给药组、西药化疗组的核瘤小鼠的瘤重均与小于不给与任何治疗措施的模型对照组小鼠的瘤重，且经统计学检验，在a=0.05水平上，差别均有统计学意义（P＜0.05）。2.22低剂量给药组的瘤重低于西药化疗组，且两组差别具有统计学意义（P＜0.05）。2.2.2润肺消积胶囊高剂量给药组小鼠的瘤重低于西药化疗组，且两组瘤重差别具有统计学意义（P＜0.05）。2.2.3低剂量给药组、中剂量给药组、高剂量给药组小鼠的瘤重依次减少，且三者差别有统计学意义（P＜0.05）。2.3润肺消积胶囊对小鼠存活期的影响（见图1）注：图中A1：模型对照组；A2：低剂量给药组；A3：中剂量给药组；A4：高剂量给药组；A5：西药化疗组2.3.1如图1所示，模型对照组核瘤小鼠存活期平均为（26.9±6.1）d，在建立模型后36天，所有对照组小鼠全部死亡；低剂量给药组小鼠存活平均时间为（35.2±4.5）d；中剂量给药组（41.0±5.7）d；高剂量给药组（46.8±4.9）d，其中有3只小鼠的存活时间超过了三个月；西药化疗组小鼠存活平均时间为（39.9±4.7）d。2.3.2低剂量给药组、低剂量给药组、低剂量给药组、西药化疗组核瘤小鼠的存活时间均大于模型对照组小鼠的存活时间，且四组治疗组与模型对照组小鼠的存活时间差别均有统计学意义（P＜0.05）。2.3.3低剂量给药组、中剂量给药组、高剂量给药组小鼠的存活时间依次减少，且三者差别有统计学意义（P＜0.05），说明在剂量允许的范围内，润消积胶囊的给药量与小鼠的存活时间呈正相关。2.3.4高剂量给药组小鼠的存活时间高于西药化疗组，且差别具有统计学意义（P＜0.05）。3讨论目前，Lewis肺癌常作为筛选抗肿瘤药物的动物模型[2]。本实验研究把润肺消积胶囊作为Lewis肺癌小鼠的治疗药物，探讨复方润肺消积胶囊对小鼠肺癌的治疗作用。润肺消积胶囊是一种在临床上取得了较好疗效的药物，具有扶正固本、益气养血的效果，对肿瘤有较好的抑制效果，。其中的人参、黄芪等补气健脾药物可调节肿瘤患者的免疫机能[3]，从而达到抑制肺癌组织增长的效果。本研究的实验结果显示，复方润肺消积胶囊能够有效提升Lewis肺癌小鼠的体重，较传统的西药化疗治疗有了明显的改观，取得了良好的效果。中药润肺消积胶囊能够有效的抑制小鼠肺癌细胞的增长，减轻肿瘤的重量，从而达到良好的治疗肺癌的效果，低剂量给药组、中剂量给药组、高剂量给药组小鼠的瘤重依次减少，说明在剂量允许的范围，高剂量药物的治疗效果比低剂量的治疗效果要好。延长癌症患者的生存时间是临床治疗的一项重要治疗指标。润肺消积胶囊能延长肺癌小鼠的存活时间