色谱应用与化合物提纯

色谱应用与化合物提纯TLC方法建立（Rf要求）

第2页,共33页，2024年2月25日，星期天举例物质中可能含有的杂质1、碳链长短带来的杂质;2、含氟多少带来的杂质3、氧化杂质（反应方程式如下）第3页,共33页，2024年2月25日，星期天第4页,共33页，2024年2月25日，星期天TLC方法建立---

甲氟奎

常见问题解决拖尾问题:由于载体对被分离物质吸附太强所致.解决办法是:对硷性化合物,在展开剂中添加比其极性强的不干扰测定的硷性物.如氨水、三乙胺等，置换解决。对酸性化合物，在展开剂中添加比其极性强的不干扰测定的酸性物.如甲酸、冰乙酸等，置换解决,举例见幻灯片5.边沿效应问题：特别是对铝泊板，可用食指与拇指沿边沿上下抚平整后，先空白爬行一次看是否有边沿效应，无则热风吹干后使用。第5页,共33页，2024年2月25日，星期天TLC方法建立---甲氟奎Syntheticprocess

(1):过渡物(2):产品

第6页,共33页，2024年2月25日，星期天TLC方法建立及其验证第7页,共33页，2024年2月25日，星期天某药物-中间体监控TLC方法建立中间体1检测TLC方法建立分离试验:△Rf=0.10

满足分离要求.检测限试验:中间体1为3.00µg,SM为

2.02µg.加样试验:SM取检测限的2-3倍(最少),中间体1取SM量的50-60倍,然后混合.SM:中间体1=4.69:250第8页,共33页，2024年2月25日，星期天某药物-中间体监控TLC方法建立中间体结构式中间体2中间体3中间体4

极性:中间体4＞3＞2第9页,共33页，2024年2月25日，星期天薄层原位化学反应简介一、创立时间：1953年由Miller及Kirchner提出二、原始发表文章：MillerM.KirchnerJG.Analchem，1953三、定义：根据不同的目的在点样处点加试剂或以其他方式使被测物质在点样原位处进行化学反应，当反应完成后再进行展开，从而测定反应进行情况。四、研究内容：氧化还原、光解、水解、脱水、卤化、酯化、硝化、重氮化等反应以及制备衍生物都可以用此方法进行。第10页,共33页，2024年2月25日，星期天薄层原位化学反应的应用药物稳定性研究化学反应摸索化学鉴别反应第11页,共33页，2024年2月25日，星期天

应用举例

硝苯地平对光稳定性研究

第12页,共33页，2024年2月25日，星期天硝苯地平对光的稳定性第13页,共33页，2024年2月25日，星期天硝苯地平的氧化反应第14页,共33页，2024年2月25日，星期天硝苯地平氧化反应TLC检测第15页,共33页，2024年2月25日，星期天脱水反应举例

尼群地平中间体制备第16页,共33页，2024年2月25日，星期天TLC方法演示第17页,共33页，2024年2月25日，星期天双异丙酚的氧化纯品双异丙酚是无色液体，在TLC板上展开时如不显色则看不出，但在点样原点处将其用氧化剂氧化后生成了玫瑰红色的醌类物质，展开时可见红色斑点在上行。第18页,共33页，2024年2月25日，星期天利用色谱分析图构思分离方法利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系举例说明利用色谱分析图构思分离方法第19页,共33页，2024年2月25日，星期天利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程组分出峰顺序及其依据一、对一般常用的毛细管气相色谱柱和填充柱来说：各被测定组分主要按照由低到高的沸点顺序、由小（大）到大（小）的极性顺序依次出峰。二、a.程序升温情况下，各组分按照由低到高的沸点顺序依次出峰。

b.沸点相近的组分，如使用极性柱分离，则按照由小到大的极性顺序依次出峰；反之相反。应用举例第20页,共33页，2024年2月25日，星期天利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程应用举例(程序升温)1、氟苯、氯苯、溴苯的分离沸点顺序：氟苯＜氯苯＜溴苯GC谱图第21页,共33页，2024年2月25日，星期天利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程2、沸点相近组分的分离a.组分A与B第22页,共33页，2024年2月25日，星期天利用GC谱图研究蒸馏、精馏过程2、沸点相近组分的分离b.组分A与B分离色谱图（A极性大于B）第23页,共33页，2024年2月25日，星期天GC图谱与蒸馏、精馏的关系

未知沸点的液体组分分离（程序升温情况下）当保留时间差（ΔRT）很大时，可直接用蒸馏的方法分离。当保留时间差较小时，只能考虑用精馏的方法分离或分子蒸馏技术。一条经验：当在HP6890型GC上安装30M毛细管柱，且当载气流速为1.6ML/min时，如ΔRT≥1min，则可以用精馏的方法提纯组分，理论塔板数一般小于50；如

ΔRT＜0.5min，则较难用精馏的方法提纯。分子蒸馏：高真空较低温度下，利用液体组分间挥发时具有的分子平均自由程差进行分离的一种技术。第24页,共33页，2024年2月25日，星期天HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系反相色谱与正相色谱概念1、反相色谱：柱子极性小于流动相2、正相色谱：柱子极性大于流动相出峰顺序1、反相色谱：极性大的组分先出峰，小的后出。2、正相色谱：极性小的组分先出峰，大的后出。举例说明1、硝苯地平（Nifedipine）2、某药物第25页,共33页，2024年2月25日，星期天HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系

举例说明1（硝苯地平）反相测定HPLC图显示极性顺序为A＞B＞Nifedipine，杂质A、B为致癌物质，均不得超过0.2%第26页,共33页，2024年2月25日，星期天HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系

举例说明1（硝苯地平）重结晶提纯工艺设计1、原重结晶用溶剂-95%工业乙醇2、根据HPLC图设计现用重结晶用溶剂-80%乙醇+1%HOAc（混合溶剂）3、硝苯地平粗品及其杂质（B）在两种溶剂中的溶解度（60℃下测定）

名称

用量工业乙醇混合溶剂硝苯地平粗品1g5ml7ml

杂质（B）1g6ml2ml第27页,共33页，2024年2月25日，星期天HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系

举例说明1（硝苯地平）

用混合溶剂重结晶后：收率有所提高，HPLC显示几乎全部去掉了杂质A及B第28页,共33页，2024年2月25日，星期天HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系

举例说明2（抗高血压药）反相测定HPLC图显示该产品粗品中主要杂质M-IP极性远小于主物质第29页,共33页，2024年2月25日，星期天该药物与主要杂质结构分析1.药物分子结构中含有磺酰氨基，为强极性基团。2.杂质分子结构中不含有磺酰氨基。3.除去杂质方法：碱溶液处理、过滤、滤液酸处理，过滤、洗涤即可。第30页,共33页，2024年2月25日，星期天HPLC谱图与重结晶、吸附工艺关系

举例说明2（抗高血压药）重结晶：原用变性乙醇重结晶进一步去除杂质，后用正丁醇重结晶去除杂质，效果更好。（因为正丁醇极性小于乙醇）第31页,共33页，2024年2月25日，星期天总结1-相似相溶原理应用！！！在反相HPLC图中：一般先出峰的组分极性较强，可用极性溶剂重结晶将其除去。在反相HPLC图中