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文档简介
ICS07.080
A21
中华人民共和国国家标准
GB/TXXXXX—201X
生物产品降解植物纤维素功效
评价技术规范
Technicalspecificationofevaluationfordegradationofplant
celluloseinbiologicproducts
(征求意见稿)
201X-XX-XX发布201X-XX-XX实施
发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准1化管理委员会
GB/T××××—201×
I
GB/T××××—201×
生物产品降解植物纤维素功效评价技术规范
1范围
本标准规定了生物产品降解植物纤维素效果评价试验原理、仪器设备及器具、试剂与材料、试验步骤、
结果分析。
本标准适用于微生物和酶生物产品降解植物纤维效果评价。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB1886.232食品安全国家标准食品添加剂羧甲基纤维素钠
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
3.1
生物产品biologicalproducts
利用生物技术获得的产品。
3.2
植物纤维素cellulose
由D-葡萄糖以β-1,4糖苷键组成的大分子多糖,不溶于水及一般有机溶剂,是植物细胞壁的主要成分。
4原理
在一定条件下,纤维素底物(羧甲基纤维素钠)能够被微生物或酶制剂降解,底物粘度随之降低,通
过粘度计测得粘度的数值,以粘度的降低换算出纤维素底物降解率。
5仪器与设备
5.1pH计:精度±0.01pH。
5.2恒温水浴锅:温度制范围在30℃~100℃,精度为0.1℃。
5.3电子天平:精度为0.001g和0.01g。
6试剂与材料
本标准使用的试剂均为分析纯,水均为符合GB/T6882中规定的二级水。
1
GB/T××××—201×
6.1羧甲基纤维素钠(CMCNa)溶液
准确称取5g羧甲基纤维素钠,溶解于8090℃的热水中,完全溶解后,冷却至室温定容至100mL。
6.2基础营养基溶液
按照GB/T15818要求进行配制。
7试验步骤
7.1试验设计
不同类型生物产品降解植物纤维素效果试验设计应符合表1要求。
表1生物产品降解植物纤维素效果试验设计
产品种类
项目
微生物产品酶产品
1.供试样品
处理设计2.失活样品
3.空白对照
重复次数不少于3次
反应条件按正交试验结果确定
7.2待测微生物试验实施
7.2.1供试样品处理
固体产品应进行研磨处理,制成粉末状供试样品。
7.2.2失活样品处理
取供试的固体或液体微生物样品进行121ºC,30min杀菌处理。
7.2.3最佳反应体系确定
250ml三角瓶中加入100ml基础营养基溶液,121℃,20min灭菌,冷却。设计正交实验,按照供
试样品的影响因素宜选取反应温度、反应转速、底物浓度、反应时间等,确定最佳反应体系条件。
7.2.4降解处理试验
取250mL三角瓶9个,空白样3个,供试样品瓶3个,失活样品瓶3个。分别向9个瓶中加入100mL基础
营养基溶液,进行灭菌处理后备用。按照最佳反应体系条件进行降解试验。
7.3待测酶试验实施
7.3.1供试样品处理
固体产品应用缓冲溶液溶解。
7.3.2失活样品处理
2
GB/T××××—201×
用缓冲溶液溶解后的固体样品或液体酶样品在100ºC环境下进行15min去酶活处理。
7.3.3最佳反应体系确定
250ml三角瓶中加入100ml缓冲溶液,设计正交实验,影响因素宜选取酶量、底物浓度、pH值、反
应时间等,确定最佳反应体系条件。
7.3.4降解处理试验
取250mL三角瓶9个,空白样品瓶3个,供试样品瓶3个,失活样品瓶3个。分别向9个瓶中加入
100mL缓冲溶液。按照最佳反应体系进行降解试验。
7.4浓度测定
按GB1886.232要求进行。
8结果分析
8.1结果计算
微生物产品降解率按照式(1)计算:
'
'…………..(1)
0−1−0−2−3−3−0−
式中:�=0×100%
D——底物的降解率(%);
0——为反应开始时的起始溶液粘度(mPa·s);
1——为供试样品反应后的溶液粘度(mPa·s);
2——为失活样品反应后的溶液粘度(mPa·s);
3——为微生物样品瓶反应后的溶液粘度(mPa·s);
3′——为微生物样品瓶反应前的溶液粘度(mPa·s);
′——为空白样品反应后的溶液粘度(mPa·s)。
酶产品降解率按照式(2)计算:
'…………..(2)
0−1−0−2−0−
式中:�=0×100%
D——底物的降解率(%);
3
GB/T××××—201×
0——为反应开始时的起始溶液粘度(mPa·s);
1——为供试样品反应后的溶液粘度(mPa·s);
2——为失活样品反应后的溶液粘度(mPa·s);
′——为空白样品反应后的溶液粘度(mPa·s)。
以平行样的平均值为最终的降解率值,计算结果保留到小数点后两位。
8.2结果判定
以降解率的大小评价被测试生物产品的降解功效:降解率大于等于80%,小于100%时,降解效果为
好;降解率大于等于60%,小于80%时,降解效果为良好;降解率大于等于40%,小于60%时,降解效果
为较好;降解率大于等于20%,小于40%时,降解效果为一般;降解率小于20%时,降解
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