DB11／T 987-2013-鲟鱼种质鉴定规范

备案号:38199-2013DB11北京市质量技术监督局发布I 1 1 1 1 2 3 5 7 81鲟鱼种质鉴定规范本标准适用于西伯利亚鲟（Acipenserbaerii）种质的检属鲟形目（Acipenseriformes）,鲟科（Acipenseridae）,鲟属(A4生物学特征4.1外部形态色相似；腹骨板与背骨板间具有许多星状薄骨板或微小颗粒，吻须4根，介于吻突与口裂之间，稍靠近24.2可数性状第一鳃弓（左）外侧鳃耙数：20～49，4.3可量性状比例全长/体长a5.1生长3在人工养殖条件下,不同年龄组的西伯利亚鲟鱼体长和体重年龄a12345雄鱼为5龄以上。繁殖周期：野生状态下为2年以上；采用流式细胞仪测定西伯利亚鲟鱼细胞中DNA含量为N=8.98±0.1西伯利亚鲟肝脏酯酶（EST）同工酶有6条酶带，电RAPD引物（CCGCCCAAAC）PCR扩增的结果4F:TATCCCCTCCACTGGAAATR:GTTAAACATCCCTGCCTTF:CGATTTGATTGGCTCTTGTAR:TGCAAATAAATTGGAGCF:GGCAGGATTACATCTCCTGAR:TTACTAACTGCTAGATAATACCTCTF:ACCCGAGCTGTCACATTACTR:AAAATAACGCGAATTCCF:GCAATTCGTGTTATGTTCATTTR:TGCATTCAGAGAATAACCF:TGCATGACACAGGACTTACCR:TGCCTCTCAATAGCAACAF:ACCCGCAATTATTAGGACR:CAGGACAAACTCAGAF:TCACGCAGTCTCACAAGGR:TTCAATGGCAAACAGF:ACACTATCCCGCCACAATR:CCACTGAAGCCATCAAfu19F:CATCTTAGCCGTCTGTGGTACR:CAGGTCCCTAATACAATAfu22F:TCCACAATCCTGAATAATGACR:GCACCATCTAATACGAAATAfu39F:TTCTGAAGTTCACACATTGR:ATGGAGCATATTGGAAfu54F:CTCTAGTCTTTGTTGATTACAGR:CAAAGGACTTGAAACTAAfu68F:TTATTGCATGGTGTAGCTAAACR:AGCCCAACACAGACAAT57.2.3将处理过的样品用细绢布过滤后，加入适量的同样处理的鸡血红细胞，上流式细胞强度，计算西伯利亚鲟鱼与鸡血细胞（N=2.剪断鱼的尾动脉，放血。随后解剖，迅速摘取肝组织0.5g左右，置于0℃生理盐水中，用生理盐水6保存。或剪取西伯利亚鲟鳍条约0.5g，置于75%酒精利用常规苯酚/氯仿法抽提个体基因组DNA，利用紫外分光光度法确定DNA浓度，将个体基因组DNA微卫星DNA法反应程序为：94℃变性45s、退火45s（各引物退火温度详见表4）、72℃延伸45s，401015175202381861217Afu195Afu22519Afu3914Afu5422Afu68217预电泳之后，在每个加样孔中加入5µL解链后样品，1800V恒压电泳1.水漂洗30s，浸入在显影液中显影至带型清晰，再用蒸馏水漂洗5min。晾干长板后，使用荧光微卫星引物进行PCR扩增时，直接使用基因分析仪使用软件STRUCTURE2.3对基因型数8Acipenseriforms.AULA-VerlagWiesb