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文档简介
试验室检验血常规检验血生化检验尿常规检验粪便检测动物诊疗技术血常规专家讲座第1页血常规检验动物诊疗技术血常规专家讲座第2页血常规检验必要性许多疾病都需要化验血常规来判断疾病程度;预后判断基础之一;兽医师判断疾病和指导动物主人治疗基础工作;使兽医师缩小疾病疑似范围,排出一些疾病;配合其它检验(血液生化检验、尿液检验、B超诊疗、X光片、粪便检验等);动物诊疗技术血常规专家讲座第3页血液常规检验适应症全血计数(CBC)反应了患病犬猫全身健康状态;CBC揭示机体造血系统机能情况;手术前,手术后;各种炎症时,炎症不一样时期;创伤、出血、车祸、摔伤等;贫血;消瘦;脱水时;呕吐、腹泻、体虚弱等。动物诊疗技术血常规专家讲座第4页内容试验目标与要求1血样采取与抗凝2血细胞计数检验3动物诊疗技术血常规专家讲座第5页目标与要求掌握动物血样采取与抗凝方法。掌握血红蛋白测定、红细胞及白细胞计数操作方法与注意事项。动物诊疗技术血常规专家讲座第6页血液血浆水(90%—92%)晶体物质(2%—3%)血浆蛋白(5%—8%)白蛋白球蛋白纤维蛋白原血细胞(45%)红细胞白细胞血小板红细胞比容——压紧血细胞在全血中所占容积百分比(Hematocrit)(Plasma)(55%)血液组成动物诊疗技术血常规专家讲座第7页血液组成血液是由液态血浆和悬浮在血浆中血细胞组成。全血=45%血细胞+55%血浆血细胞:红细胞、白细胞、血小板;血浆:(90-92%)水+(8-10%)溶质动物诊疗技术血常规专家讲座第8页溶质:血浆蛋白(白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原)、无机盐、非蛋白氮、不含氮有机物。血液流出血管后凝固成血块,伴随血块缩紧而析出黄色清亮液体叫血清血清中没有纤维蛋白血清中缺乏血浆中参加凝血反应一些成份。出血时,输血清没用,要输血红蛋白。血清是不含纤维蛋白原血浆。动物诊疗技术血常规专家讲座第9页血液理化特征1.颜色,密度,气味:颜色:红色动脉血:鲜红(血红蛋白)静脉血:暗红动物诊疗技术血常规专家讲座第10页红细胞
红细胞形态和数量:犬和猫红细胞为无核、双凹碟型,圆盘状。这种形态能够使红细胞表面积与体积比值增大;有很强变形性和可塑性,较易经过比其直径还小毛细血管和血窦空隙。不一样动物红细胞数量不一样;同种动物红细胞数量也因年纪、品种、性别、生理状态和生活环境不一样而有
动物诊疗技术血常规专家讲座第11页血细胞比容压紧血细胞在全血中所占容积百分比,成为血细胞比容。因为白细胞血小板在血细胞中所占溶剂约为1%,常被忽略不计;因而,常将血细胞比容成为红细胞比容或者红细胞压积(PCV)。血液比容反应血浆容积、红细胞数量或体积改变。临床上测定红细胞比容有利于诊疗各种疾病,如:脱水、贫血和红细胞增多症。动物诊疗技术血常规专家讲座第12页血液理化特征①血色与血味:②相比密度③黏滞性④血液渗透压⑤血浆酸碱度动物诊疗技术血常规专家讲座第13页血量
血量是血浆和血细胞总和。犬平均血量是体重5%-6%猫平均血量是体重6%-7%机体血量普通比较恒定,不过伴随年纪、性别、体重、营养、妊娠、泌乳、健康情况及环境改变而稍有改变。血量降低:失血是主要原因。失血对机体危害程度,与失血速度和失血量相关;快速失血危害更大。动物诊疗技术血常规专家讲座第14页失血量一次失血不超出血量10%,普通不会影响健康;因为:这种失血缩损失水分和无机盐,在1-2小时内能够从组织液中得到补充;血浆蛋白质能够由肝脏在1-2天加速合成得到恢复;血细胞能够由储存血液释放得到暂时补充,还能够由造血器官生成血细胞来逐步恢复。一次急性失血到达血量20%时,生命活动将受到显著影响。一次失血量超出全身血量30%时,会危及生命!动物诊疗技术血常规专家讲座第15页红细胞生理特征膜通透性:水、尿素、氧、二氧化碳能够自由经过细胞膜;Cl-、HCO3-较易经过细胞膜,但正离子极难经过细胞膜。悬浮稳定性:红细胞第一个小时末下沉距离表示红细胞沉降速度,称为红细胞沉降率,简称血沉。一些疾病时,红细胞能较快地彼此以凹面相贴,形成红细胞叠连而使表面积与容积比值降低,与血浆摩擦力减小,血沉加紧。渗透脆性:在低渗溶液中,水分会深入红细胞内,红细胞膨胀成球形,细胞膜最终破裂并释放出血红蛋白(Hb),这种现象称为溶血。红细胞在低渗溶液中抵抗破裂和溶血特征称为红细胞渗透脆性。动物诊疗技术血常规专家讲座第16页红细胞功效红细胞主要功效是运输氧和二氧化碳、并对酸、碱物质有缓冲作用,这些功效实现主要依赖于红细胞内血红蛋白。血红蛋白与气体运输:每100毫升血液能够携带20毫升氧。动物年纪、性别、营养情况等原因影响血液中血红蛋白含量;红细胞与血红蛋白都降低,或者其中之一显著降低,能够视为贫血。血红蛋白酸碱缓冲功效:还原血红蛋白(HHb)和氧合血红蛋白(HbO2)在pH约7.4环境下,两种形式血红蛋白均为弱酸性物质;他们一部分以酸分子形式存在,一部分与红细胞内钾离子组成血红蛋白钾盐,组成了KHb/Hhb和KHbO2/HHbO2两个缓冲对,共同参加血液酸碱平衡调整作用。动物诊疗技术血常规专家讲座第17页红细胞生成红细胞由红骨髓髓系多功效干细胞分化增殖而成。再生障碍性贫血:一些放射性物质或药品抑制骨髓造血功效,而造成再生障碍性贫血。造血需要:骨髓造血机能+重组造血原料+促进红细胞成熟物质。红细胞生成主要原料:蛋白质,铁。供给或摄取不足,出现营养性贫血。促进红细胞发育和成熟物质:主要是VB12、叶酸和铜离子。缺乏VB12或叶酸能够引发巨幼细胞性贫血;VB12吸收不足就能够引发贫血,如:长久大剂量使用抗生素,长久肠炎等。动物诊疗技术血常规专家讲座第18页红细胞生成调整红细胞自稳态主要受红细胞生成素(EPO)调整,雄激素也起一定作用。促红细胞生成素:主要在肾脏产生(肝脏也有少许合成),正常时在血液中维持一定浓度,使红细胞数量相对稳定。EPO促进骨髓内造血细胞分化、成熟和血红蛋白合成。所以,慢性肾衰竭等肾病时,常因促红细胞生成素不足引发不一样程度贫血。雄激素:雄激素能够直接刺激骨髓造血组织,促使红细胞和血红蛋白生成,也作用于肾脏或肾外组织产生促红细胞生成素,从而间接促使红细胞增生。这可能是雄性动物红细胞和血红蛋白量高于雌性动物原因之一。动物诊疗技术血常规专家讲座第19页红细胞寿命和破坏红细胞存活时间因动物品种不一样而有较大差异;脾脏是破坏红细胞主要场所。动物诊疗技术血常规专家讲座第20页白细胞①白细胞分类:白血病是一类有核血细胞。依据形态、功效和起源,分为粒细胞、单核细胞和淋巴细胞三大类。依据粒细胞胞浆颗粒嗜色性不一样,又分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。②白细胞数量与百分比:白细胞数量伴随动物生理状态而改变,下午高于早晨,幼龄动物高于成年动物,猛烈运动、进食和疼痛时白细胞增多;个体又差异。在正常情况下,白细胞中各种细胞百分比保持相对恒定。动物诊疗技术血常规专家讲座第21页中性粒细胞功效趋化性强。吞噬异物、细菌,吞噬并去除衰老红细胞和抗原-抗体复合物。中性粒细胞内含有大量溶酶体酶,能将吞噬入细胞内细菌和组织碎屑分解,在非特异性免疫系统中有着十分主要作用。动物诊疗技术血常规专家讲座第22页嗜酸性粒细胞功效有吞噬机能,不过没有杀菌能力(细胞内不含溶菌酶)。主要机能嗜缓解过敏反应和限制炎症过程。当机体发生抗原-抗体相互作用而引发过敏反应时,大量嗜酸性粒细胞趋向局部,吞噬抗原-抗体复合物,以减轻对机体危害;所以,在皮肤过敏反应中、在药品过敏等反应中,能够见到其增多。在寄生虫性感染严重时候,血液中嗜酸性粒细胞也增多。动物诊疗技术血常规专家讲座第23页嗜碱性粒细胞功效与组织中肥大细胞有许多相同之处,都含有组胺、肝素和5-羟色胺等生物活性物质,细胞本身不具备吞噬能力。组织胺增加局部炎症区域毛细血管通透性,有利于其它白细胞游走和吞噬活动;肝素对于局部炎症部位有抗凝血作用。动物诊疗技术血常规专家讲座第24页淋巴细胞功效T淋巴细胞:主要参加细胞免疫,与某种特异性抗原物质或细胞相互接触时,发挥免疫功效,以反抗病毒、细菌和癌细胞侵入;另一些T淋巴细胞受到抗原刺激后能合成一些免疫活性物质,如:淋巴因子、干扰素等,参加体液免疫。B淋巴细胞:主要存在于淋巴结、脾脏和肠道淋巴组织中,在抗原刺激下转化为浆细胞。浆细胞产生和分泌各种特异性抗体,释放入血阻止细胞外液中抗原、异物伤害。这种由免疫细胞产生和分泌特异性抗体引发免疫反应,叫做体液免疫。动物诊疗技术血常规专家讲座第25页单核细胞功效单核细胞有变形运动和吞噬能力,能够渗出血管变成巨噬细胞;能与组织中巨噬细胞组成单核-巨噬细胞系统,在体内发挥防御作用。动物诊疗技术血常规专家讲座第26页白细胞生成三种粒细胞:起源于骨髓原始粒细胞;淋巴细胞和单核细胞:主要在脾、淋巴结、胸腺、消化道黏膜淋巴组织中发育成熟。白细胞分化增殖受造血生长因子(HGF)调整。白细胞破坏:白细胞衰老死亡后,大部分被肝、脾巨噬细胞吞噬和分解,小部分经消化道和呼吸道粘膜排出。粒细胞在吞噬细菌后可释放过多溶酶体酶而“自我溶解”,与被破坏细菌和组织碎屑一起形成脓液。动物诊疗技术血常规专家讲座第27页血小板从骨髓成熟巨核细胞胞浆裂解脱落下来活细胞。血小板无核,但胞浆中含有各种与其功效相关活性因子。①血小板生理机能:主要包含:生理性止血、凝血功效、纤维蛋白溶解作用和维持血管壁完整性。血小板生理功效实现,与其含有黏附、聚集、释放、吸收和收缩等生理特征亲密相关。②血小板生成:骨髓造血干细胞分化成巨核系祖细胞,再分化为形态上能够识别巨核细胞,血小板由成熟巨核细胞裂解而成。③血小板破坏:血小板进入血液后,寿命约10天,不过仅在最初2-3天含有正常生理功效。衰老血小板可在脾、肝和肺组织中被吞噬;也会在发挥正常生理功效时被消耗。动物诊疗技术血常规专家讲座第28页血型与输血血型:通常指红细胞上特异性抗原类型。狭义血型定义:以细胞膜抗原结构差异为依据,进行分类血细胞抗原型。广义血型定义:以蛋白质化学结构微小差异即蛋白质多肽性和同功酶为依据分类。输血标准:输血前必须做血型判定。动物诊疗技术血常规专家讲座第29页交叉配血试验:供血者红细胞和受血者血清进行配血试验,叫做交叉配血主侧;受血者红细胞和供血者血清进行配血试验,叫做交叉配血次侧。两个试验均无凝血,则血型相合,能够输血;假如主侧有凝集反应,则配血不和,不能输血;假如主侧不凝集,而次侧出现凝集,只能在紧急情况下输血,但速度要慢,输血量也不能太多;两侧都有凝集出现,绝对不能输血!动物诊疗技术血常规专家讲座第30页怎样解读结果?动物诊疗技术血常规专家讲座第31页一、血样采取与抗凝1、血样采取①采血前准备:采血用应事先消毒灭菌、干燥处理。采血部位应剪毛按常规消毒。②少许用血,普通可在耳尖、冠顶及静脉末梢等处进行采取。③多量用血,大动物可在颈静脉处进行采取;猪可在前腔静脉处采取;禽类在翅内静脉处采取,必要时可进行心脏穿刺采取。小动物普通采专心脏采血。动物诊疗技术血常规专家讲座第32页各种动物采血部位采血部位畜种采血部位畜种颈静脉马、牛、羊耳静脉猪、羊、犬、猫、试验动物前腔静脉猪翼下肱静脉家禽隐静脉犬、猫、羊蹼间静脉鸭、鹅前肢头静脉犬、猫、猪冠或肉髯鸡心脏兔、家禽、豚鼠断尾猪、试验动物动物诊疗技术血常规专家讲座第33页动物诊疗技术血常规专家讲座第34页2、血样抗凝兽医临床惯用抗凝剂、使用方法及用图,见下表。抗凝剂抗凝机制惯用浓度使用方法用途肝素阻止凝血酶元转化为凝血酶而阻止血凝0.5~1%溶液配制后应及时使用,每10ml血液加入0.1~0.2ml。适适用于多数血液试验诊疗检验,不宜用于血涂片检验。柠檬酸钠(枸橼酸钠)与钙离子形成非离子可溶性化合物而阻止血凝3.8%溶液每10ml血液加入1ml。适适用于红细胞沉降率、输血用抗凝,但不宜用于血液生化指标测定。EDTA-Na2螯合血中钙离子而阻止血凝10%溶液每10ml血液加入0.1~0.2ml。适用与普通血液学检验,不宜用于钠、钙测定。草酸盐合剂(草酸铵+草酸钾)与钙离子结合,形成不溶解草酸钙而阻止血凝1~2%草酸盐溶液取此液先作抗凝瓶。1ml此液可抗凝10ml血样(制作抗凝瓶应小于80℃)。有毒不能用于输血抗凝,不宜用于白细胞分类计数与血小板计数。肝素动物诊疗技术血常规专家讲座第35页血液学检验项目与采血后可保留时间检验项目保留时间(h)检验项目保留时间(h)白细胞计数2~3血红蛋白含量48红细胞计数24红细胞压积容量24血小板计数1红细胞沉降速率2~3网织红细胞计数2~3白细胞分类计数1~2动物诊疗技术血常规专家讲座第36页二、红细胞计数(RBC):显微镜计数法1、原理血液经200倍稀释后,充入血细胞计数板,用显微镜观察,计数一定容积内红细胞数并换算成每升血液中红细胞数。
2、器材与试剂改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、0.85%氯化钠稀释液。动物诊疗技术血常规专家讲座第37页3、方法①用5毫升吸管准确吸稀释液2毫升于试管中,用沙利氏吸管吸收血样10微升,用脱脂棉擦去沙利氏吸管外壁多出血液后插入试管底部,轻轻压出血液于稀释液中,再用上清液吸、吹数次,以洗出沙利氏管内黏附血细胞,充分混匀后备用。②将稀释后血样用小玻棒取一滴,置于计数板与盖玻片交界边缘,让其自然浸入,使稀释血样扩散入计数室内,静置2~3分钟,镜检。③计数时用低倍镜,依次计数中央大方格内四角和正中5个中方格,共80个小方格红细胞数。为防止重复和遗漏,计数时应按一定次序进行。注意压在双线上红细胞,恪守“数左不数右,数上不数下”计数法则。动物诊疗技术血常规专家讲座第38页4、计算方法每mm3血液内红细胞总数=5个中方格内红细胞数×5×10×200×106=5个中方格内红细胞数×1010
单位:个/升式中×5—5个中方格换算成1个大方格
×10—1个大方格容积为0.1微升,换算成1.0微升
×200—血液稀释倍数
×106—由微升换算成升注意防凝、防溶、取样正确。动物诊疗技术血常规专家讲座第39页5、正常参考值健康动物除山羊红细胞数较多外,其它动物红细胞数约为6.0×1012~8.0×1012/L。6、临床意义
①相对增多:脱水、急性胃肠炎、肠便秘、渗出性胸膜炎、渗出性腹膜炎、一些传染病;
②绝对增多:红细胞增多症,见于代偿性机能不全心脏病及慢性肺部疾病;
③
降低:各种贫血、出血性、溶血性、骨髓造血功效不全性贫血、营养不良性贫血、继发性贫血。动物诊疗技术血常规专家讲座第40页
(三)红细胞形态检验1、正常红细胞形态
正常红细胞形态呈双凹圆盘形,细胞大小均一,染色为淡粉红色,血红蛋白充盈良好,呈正常色素性。动物诊疗技术血常规专家讲座第41页2、异常红细胞形态(1)小红细胞:出现较多染色过浅、淡染区扩大小红细胞,提醒血红蛋白合成障碍,见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。由长久慢性感染(炎症)继发单纯小细胞性贫血,仅有胞体偏小而无淡染区增大。(2)大红细胞:常见于叶酸及维生素B12缺乏所致巨幼细胞性贫血,表现在幼红细胞内DNA合成不足。当这种幼红细胞脱核之后,形成大成熟红细胞。也可见于溶血性贫血、骨髓增生异常综合症(MDS)等。动物诊疗技术血常规专家讲座第42页(3)红细胞大小不均:是指红细胞之间直径相差一倍以上。贫血常有此现象,巨幼细胞性贫血时尤为显著,与骨髓造血功效减弱相关。可经过红细胞分布宽度(RDW)数值指标反应出来。(4)球形红细胞:直径小,着色深,无中心淡染区。其与正常红细胞差异在于厚度增大。主要见于遗传性球形细胞增多症,血涂片中这类细胞常超出25%。(5)椭圆形红细胞:红细胞呈椭圆形、杆形,两端钝圆,长轴增大,短轴缩短。细胞只有成熟后才会展现椭圆形,且将此种红细胞置于高渗、等渗、低渗溶液或正常血清内,其椭圆形保持不变,而幼红细胞、网织红细胞,均不呈椭圆形。偶见于缺铁性贫血、骨髓纤维化、镰形红细胞性贫血。(6)口形红细胞:红细胞中心苍白区呈扁平状,形似张开嘴巴或鱼口。此种红细胞有膜异常,使Na+透过性增加,细胞膜变硬,因而脆性增加,致使细胞生存时间缩短。可见于消化系统疾患引发贫血、乙醇中毒、一些溶血性贫血及肝病等。
动物诊疗技术血常规专家讲座第43页(7)镰形红细胞:红细胞外形呈镰刀状、线条状,或呈L、S、V形等。在缺氧条件下,可产生大量镰形红细胞。(6)棘形细胞:红细胞表面有针状或指状突起,其间距不等,突起长度和宽度不一,突起尾端略圆。可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾病、尿毒症。(7)皱缩红细胞,也称钝锯齿形红细胞:可因制片不妥、高渗等原因引发,红细胞周围呈钝锯齿形,突起排列均匀、大小一致,外端较尖。(8)泪滴形细胞:成熟红细胞形如泪滴样或梨状。贫血时也可见到。(9)裂片红细胞:为红细胞碎片或不完整红细胞,大小不一,外形不规则,系红细胞经过因阻塞而管腔狭小微血管所致。弥散性血管内凝血(DIC)、微血管病性溶血性贫血时增多。动物诊疗技术血常规专家讲座第44页动物诊疗技术血常规专家讲座第45页动物诊疗技术血常规专家讲座第46页动物诊疗技术血常规专家讲座第47页红细胞形态:动物诊疗技术血常规专家讲座第48页贫血形态学分类MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/l)常见病因正常细胞性贫血82~9527~31320~360急性失血性贫血、急性溶血性贫血、再生障碍性贫血、白血病等大细胞性贫血>95>31320~360缺乏叶酸及维生素B12引发巨幼细胞性贫血、恶性贫血等单纯小细胞性贫血<82<27320~360慢性感染、炎症、尿毒症、恶性肿瘤、风湿性疾病等小细胞低色素性贫血<82<27<320慢性失血性贫血、缺铁性贫血、地中海性贫血、铁粒幼细胞性贫血等动物诊疗技术血常规专家讲座第49页3、红细胞中异常结构(1)何-乔氏小体:红细胞内,紫色。见于严重贫血或脾切除。(2)卡伯环:红细胞内,线圈状或8字形。见于铅中毒或溶血性贫血。(3)海恩兹小体:新鲜血涂片,红细胞内或边缘,一个或多个不等蓝黑色小点,折光性。见于硒缺乏症、牛羊铜中毒、洋葱中毒、甘蓝中毒等。动物诊疗技术血常规专家讲座第50页(六)细胞沉降速度测定
红细胞沉降率是指在室温下观察抗凝血中红细胞在一定时间内在血浆中沉降速率。血沉与红细胞串钱状形成、红细胞数目标多少、血浆蛋白组成以及测定时室温改变、血沉管倾斜程度等原因相关。抗凝血:3.8%枸橼酸钠液动物诊疗技术血常规专家讲座第51页魏氏法魏氏血沉管:长30cm
内径为2.5mm
管壁有200个刻度每个刻度之间距离为1.0mm
附有特制血沉架图7-1魏氏血沉管 动物诊疗技术血常规专家讲座第52页测定方法(1)取3.8%枸橼酸钠液0.4ml置于小试管中。(2)颈静脉采血,沿管壁加入试管,轻轻混合。(3)用血沉管吸收抗凝血至刻度0处,用棉花擦去管外血液,直立于血沉架上。(4)经15、30、45、60min,分别统计红细胞沉降刻度数,用分数形式表示(分母代表时间,分子代表沉降mm数)。①测定血沉时必须用新配制抗凝血;②血液与抗凝剂混合要充分,柱面上不应有气泡,它可使血沉变慢;③用魏氏法测定时,事先应检验血沉架是否好用,以防漏用;④测定时室温以20℃左右为宜,温度过低能够减慢血沉。动物诊疗技术血常规专家讲座第53页临床意义
(1)血沉率加紧:常见于各种贫血性疾病、炎症性疾病及组织损伤或坏死(如结核病、风湿热、全身性感染等)。伴随疾病好转,血沉率逐步变慢并恢复正常。(2)血沉率减慢:常见于机体严重脱水,如胃扩张、肠阻塞、急性胃肠炎、瓣胃阻塞、发烧性疾病、酸中毒等。动物诊疗技术血常规专家讲座第54页血液检验各种动物正常血沉值动物种类15分30分45分60分测定方法马驴黄牛水牛奶牛山羊猪31329.80.33497530.80.785396.7650.752055110.70.891.61.20.630六五型法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法六五型法血沉加紧:见于梨形虫病、结核、鼻疽、猪瘟、化脓性炎症、风湿症等。血沉减慢:见于大出汗、多尿、猛烈腹泻、马流行性脑脊髓炎、破伤风、牛瓣胃阻塞、腹痛症等。动物诊疗技术血常规专家讲座第55页(七)红细胞压积容量测定
红细胞压积又称红细胞比容,是指红细胞在血液中所占容积比值,测定时将抗凝血在一定条件下离心沉淀,即可测得每升血液中血细胞所占容积比值。器材(1)温氏管:管长11cm,内径约2.5mm,管壁有100个刻度。一侧自上而下标有0~10,供测定血沉用,另一侧标有10~0,供测定比容用。(2)水平电动离心机:转速能达4000rpm。
动物诊疗技术血常规专家讲座第56页图7-5温氏管及长针头 动物诊疗技术血常规专家讲座第57页临床意义(1)红细胞压积增高:
1、因为红细胞压积增高数值与脱水程度成正比,所以在临床上可依据这一指标改变而推断机体脱水情况,并计算补液数量及判断补液量实际效果。相对性增多:见于各种原因所引发血液浓缩,使红细胞相对性增多,如急性胃肠炎、肠便秘、肠变位、瓣胃阻塞、渗出性胸膜炎和腹膜炎,以及一些传染病和发烧性疾病。绝对性增多见:于各种原因所致红细胞绝对性增多,如真性红细胞增多症、肺动脉狭窄、高铁血红蛋白血症等。(2)红细胞压积降低:见于各种贫血,但降低程度并不一定与红细胞数一致,因为贫血有小细胞性贫血、大细胞性贫血及正细胞性贫血之分。动物诊疗技术血常规专家讲座第58页(八)血红蛋白测定——沙利氏比色法血红蛋白测定是指测定并计算出每升血液中血红蛋白克数。血红蛋白是红细胞主要内含物,每个正常红细胞内所含血红蛋白约占红细胞重量32%~36%,或红细胞干重96%。1.原理血液与盐酸作用后,释放出血红蛋白,并被酸化后变为褐色盐酸高铁血红蛋白,与标准柱相比,求出每百毫升血液中血红蛋白克数或百分数。
2。器材与试剂
(1)沙利氏血红蛋白计一套。在测定管上有两种刻度,一侧表示血红蛋白在每百毫升血液内克数,另一侧表示百分数。国产血红蛋白计是以每百毫升血液含14.5g血红蛋白做为100%而设制。(2)1%盐酸一小瓶。动物诊疗技术血常规专家讲座第59页方法(1)向沙利氏比色管内加入盐酸5滴。(2)用沙利氏吸血管吸血至20μl刻度处,擦去管外沾附血液。(3)渐渐吹入沙利氏比色管内,不要产生气泡,再重复吸、吹数次,以洗出沙利氏吸血管中血液。轻轻振动比色管,使血液与盐酸充分混合。(4)静置10min,待血液变成褐色后,缓缓滴加蒸馏水,每加1滴,用细玻璃棒搅动一次,直到颜色与标准色柱完全相同为止。液柱凹面所指刻度数,即为每百毫升血液中血红蛋白克数,用g或%表示。图7-4沙利氏血红蛋白计 动物诊疗技术血常规专家讲座第60页临床意义(1)血红蛋白增多:主要是见于脱水,血红蛋白相对增加。也见于真性红细胞增多症,是一个原因不明骨髓增生性疾病,当前认为是多能干细胞受累所致。其特点是红细胞连续性显著增多,全身总血量也增加,见于马、牛、犬和猫。(2)血红蛋白量降低:主要见于各种贫血。动物诊疗技术血常规专家讲座第61页(九)红细胞计数1.原理
血液经稀释后,充入血细胞计数板,用显微镜观察,计数一定容积内红细胞数并换算成每μl内数目。2.器材(1)血细胞计数板:板中间有横沟将其分为三个狭窄平台,两边平台较中间平台高0.1mm。中央平台又有一纵沟相隔,其上各刻有一个计数室。每个计数室划分为9个大方格,每一大方格面积为1.0mm2,深度为0.1mm;四角每一大方格划分为16个中方格。中央一大方格用双线划分为25个中方格,每个中方格又划分为16个小方格,共计400个小方格。(2)显微镜,计数器等。(3)稀释液:0.85%氯化钠溶液。动物诊疗技术血常规专家讲座第62页图7-6血细胞计数板结构 图7-7记数室划格 动物诊疗技术血常规专家讲座第63页方法:采血、稀释、加液图7-9红细胞记数次序 图7-8记数室充液法
数左不数右,数上不数下
动物诊疗技术血常规专家讲座第64页计算X/80×400×200×10=1mm3血液中红细胞个数。X——5个中方格(即80个小方格)内红细胞总数。400——一个大方格,即1mm2面积内共有400个小方格。200——稀释倍数。10——血盖片与计数板实际高度是1/10mm,乘10后则为1.0mm。上式简化后为X×10,000=红细胞数/mm3
动物诊疗技术血常规专家讲座第65页临床意义(1)红细胞增多:相对性增多:这是因为血浆中水分丢失,血液浓缩所致。见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、急性胃肠炎、肠便秘、肠变位、瘤胃积食、瓣胃阻塞、真胃阻塞、渗出性胸膜炎、渗出性腹膜炎、日射病与热射病、大面积烧伤等。绝对性增多:这是因为红细胞增生活跃结果。按发病原因分为原发性和继发性两类:①原发性红细胞增多:原发性红细胞增多又称真性红细胞增多症,是一个原因不明骨髓增生性疾病,当前认为是多能干细胞受累所致。其特点是红细胞连续性显著增多,全身总血量也增加,见于马、牛、犬和猫。②继发性增多:是非造血系统疾病,发病主要步骤是血中红细胞生成素增多。A.红细胞生成素代偿性增加:因血氧饱和度减低,造成组织缺氧,红细胞生成素增加,骨髓制造红细胞机能亢进而引发红细胞增多。红细胞增多程度与缺氧程度成正比。见于高原适应、慢性阻塞性肺病、先天性心脏病(如肺动脉狭窄、动脉导管未闭、法乐氏四联综合症)、血红蛋白病(如高铁血红蛋白症、硫化血红蛋白症)。B.红细胞生成素病理性增加:红细胞生成素增加与肾脏疾病或肿瘤相关,如肾囊肿、肾积水、肾血管缺点、肾癌、肾淋巴肉瘤、小脑血管瘤、子宫肌瘤、肝癌等。动物诊疗技术血常规专家讲座第66页(2)红细胞数降低:见于贫血。每升血液中红细胞数、血红蛋白量及红细胞压积容量低于正常参考值下限时,称为贫血。按病因可将贫血分为4类:
失血性贫血:慢性失血性贫血见于胃溃疡、球虫病、钩虫病、捻转胃虫病、螨病、维生素C和凝血酶原缺乏等疾病。急性失血性贫血见于丙酮苄烃香豆素中毒、草木樨中毒、脾血管肉瘤、犬和猫自体免疫性血小板降低性紫癜、手术和外伤等。溶血性贫血:见于牛巴贝西虫病、牛泰勒虫病、钩端螺旋体病、马传染性贫血;绵羊、猪、犊牛甘蓝中毒和野洋葱中毒;新生骡驹溶血病、犬自体免疫性溶血性贫血等。营养性贫血:见于蛋白质缺乏,铜、铁、钴等微量元素缺乏,维生素B1、B2、B6、B12、叶酸、烟酸缺乏等。再生障碍性贫血:见于辐射病、蕨中毒、马穗状葡萄菌毒病、梨孢镰刀菌毒病、羊毛圆线虫病、犬欧利希文病、猫传染性泛白细胞降低症、慢性粒细胞白血病、淋巴细胞白血病、垂体功效低下,肾上腺功效低下,甲状腺功效低下等。动物诊疗技术血常规专家讲座第67页三、白细胞计数(WBC):显微镜计数法1、原理:用白细胞稀释液破坏红细胞后,混匀充入计数池中,在显微镜下计数一定容积中白细胞数,经换算求得每升血液中白细胞总数。2、试剂与设备:改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、白细胞稀释液(2%冰醋酸溶液或1%盐酸溶液)。动物诊疗技术血常规专家讲座第68页3、方法:用1毫升移液管吸收白细胞稀释液0.4毫升于小试管中,再用沙利氏吸管吸收血样至20微升处,用脱脂棉擦去吸管周围多出血液,然后将吸管插入小试管底部,迟缓放出血液后用上清液重复吹洗数次,以洗净管内所粘附血液,充分混匀振荡,备用。取样与计数方法与红细胞计数方法相同,计数在计数室四角四个大方格内白细胞数。动物诊疗技术血常规专家讲座第69页4、计算方法:每升血液内白细胞总数=
四个大方格白细胞数÷4×10×20×106
单位:个/升5、注意事项:初学者轻易把尘埃异物与白细胞混同,可用高倍镜观察,白细胞有细胞核结构,而尘埃异物形状不规则,无细胞结构。动物诊疗技术血常规专家讲座第70页5、正常参考值(附后表)6、临床意义①增多:细菌性感染、炎症、白血病、恶性肿瘤、中毒性疾病。②降低:病毒性传染病、犬瘟热、猫泛白血病降低症、各种疾病晚期;再生障碍性贫血;药品性降低:磺胺类、氯霉素、青霉素、链霉素、氨基比林、水杨酸钠等;血液原虫病、血液孢子病。动物诊疗技术血常规专家讲座第71页各种健康动物血红蛋白数、红细胞数及白细胞数参考值动物Hb/(g·L-1)RBC/(1012·L-1)WBC/(109·L-1)水牛123.0±16.65.91±0.988.04±0.30黄牛95.5±10.07.24±1.578.43±2.08乳牛83.7±7.05.97±0.869.41±2.13绵羊92.6±5.18.42±1.208.45±1.90山羊118.0±10.315.23±1.0312.47±0.90猪112.3±13.75.51±0.3114.02±0.93犬133.6±13.56.57±0.3410.93±1.29鸡84.9±30.43.04±0.28/资料见:安丽英编著.兽医试验诊疗.中国农业大学出版社.年:25.动物诊疗技术血常规专家讲座第72页动物诊疗技术血常规专家讲座第73页红细胞RBC降低a.幼年犬猫
b.出血或溶血
c.红细胞生成或分化障碍
d.慢性炎症e.恶性肿瘤
f.营养缺乏
g.肝硬化-相对降低升高
相对:a.脱水
b.休克
c.兴奋性脾脏收缩
d.大面积烧伤
绝对:
原发性:a.红细胞增多症
b.慢性肺心病继发性:a.慢性氧不足,心血管问题引发代偿性增多
b.肾肿瘤c.肾囊肿
d.内分泌紊乱动物诊疗技术血常规专家讲座第74页影响原因:a.白细胞显著增多+
b.高脂血症+
c.高胆色素血症,溶血+血红蛋白HGB最能直接反应红细胞运输氧气能力原因动物诊疗技术血常规专家讲座第75页
平均红细胞体积MCV升高a.网织红细胞增多
b.灵缇—生存周期短
c.贵宾犬
d.阿拉斯加犬,迷你雪纳瑞犬
e.红细胞凝集降低a.未成年动物
b.缺铁性贫血
c.门静脉分流
d.亚洲品种犬动物诊疗技术血常规专家讲座第76页平均红细胞血红蛋白量MCH
平均红细胞血红蛋白浓度MCHC升高
---普通无真性升高溶血脂血症猫血中存在大量Heinz小体降低贫血(网织红细胞)*这两个参数不是尤其有用,不过可用来检测仪器动物诊疗技术血常规专家讲座第77页
红细胞分布宽度RDWc细胞大小细胞数量动物诊疗技术血常规专家讲座第78页白细胞分类计数(DC)1、原理:细胞染色反应,决定于细胞化学结构对染色物质亲和力。将血液制成涂片,经染色后镜检,依据显示各种细胞形态和着色特点,测定血液中各种类型白细胞百分数。2、试剂与设备:瑞氏染色液、磷酸盐缓冲液、二甲苯、香柏油、载玻片、染色盆及支架、擦镜纸、吸水纸、白细胞分类计数器、显微镜。
动物诊疗技术血常规专家讲座第79页3、方法①血片制作:左手持载玻片两端,右手持推片,取被检血一滴滴于载片一端,推片一端与血接触呈45°角,并使其血液自由沿推片边缘扩散,待均匀后,以同等速度轻轻向另一端推进,使血均匀地涂抹在载片上。让其自然干燥,待染。注意:载玻片必须无油脂、洁净、干燥。不然会影响血细胞形态。动物诊疗技术血常规专家讲座第80页动物诊疗技术血常规专家讲座第81页②瑞氏染色法:是最惯用染色法之一。将干燥血片,置于染色架上,滴加瑞氏染液于血片上,并计其滴数,直至将血膜浸盖为止。(也可将血液涂片血膜向下,滴加染液时由玻片边缘浸入,以覆盖血膜。此法可防止颗粒状物沉于血膜上,而影响计数)。待染1~2min后,再加等量缓冲液或蒸馏水,并轻轻吹动使其混匀。放置染色5~10min,然后用蒸馏水冲洗,吸干,油镜观察。动物诊疗技术血常规专家讲座第82页合格涂片1、良好血片,血液分布均匀,厚度适当。2、对光观察时呈霓红色,血膜应位于玻片中央。3、两端留有空隙,方便注明畜别,编号及日期。动物诊疗技术血常规专家讲座第83页注意:冲洗时应将蒸馏水直接向血膜上倾倒,使液体自血边缘溢出,沉淀物从液面浮去。切勿先将染液倾去再冲洗,不然沉淀物附着于血膜上不易冲掉。染色良好血片呈樱红色,如呈淡紫色,是染色时间过长,呈红色是染色时间过短。动物诊疗技术血常规专家讲座第84页③白细胞分类计数法:白细胞分类时先用低倍镜观察白细胞分布,然后滴上香柏油,用油镜观察计数。为防止重复计数,可采取四角区法计数(在血片四角各取一点,在此区域内各计数25个,共计100个白细胞。也可用两区、三区法计数等),按各类白细胞所占有百分数,计算其比值。动物诊疗技术血常规专家讲座第85页各种白细胞形态特征(瑞氏染色法)白细胞种类细胞核细胞浆位置形状颜色核染色质细胞核膜多少颜色透明带颗粒嗜中性幼年型偏心性椭圆红紫色细致不清楚中等蓝色或粉红色无红或蓝,细致或粗糙嗜中性杆状核中心或偏心性马蹄或蜡肠性浅紫蓝色细致存在多粉红色无嗜中、嗜酸或嗜碱嗜中性分叶核中心或偏心性3~5叶者居多深紫蓝色粗糙存在多浅粉红色无粉红色或紫红色嗜酸性白细胞中心或偏心性2~3叶者居多较浅紫蓝色粗糙存在多蓝色或粉红色无深红,分布均匀,马最大,其它动物次之嗜碱性白细胞中心性叶状核不太清楚较浅紫蓝色粗糙存在多浅粉红色无蓝黑色,分布不均匀,大多数在细胞边缘淋巴细胞偏心性圆形或微凹入深紫蓝色大块或中等块或致密致密少天蓝深蓝或淡红色胞浆深染时存在无或有少数嗜亚尼林蓝色颗粒大单核细胞中心或偏心性豆性山字形椭圆形淡蓝紫色细致网状边缘不齐存在很多灰蓝或云蓝色无很多,非常细小、淡紫色动物诊疗技术血常规专家讲座第86页嗜碱性白细胞淋巴细胞浆细胞单核细胞动物诊疗技术血常规专家讲座第87页嗜中性中幼细胞嗜中性晚幼细胞嗜中性白细胞嗜酸性白细胞动物诊疗技术血常规专家讲座第88页动物诊疗技术血常规专家讲座第89页临床意义
(1)白细胞增多:见于大多数细菌性传染病和炎性疾病,如炭疽、腺疫、巴氏杆菌病、猪丹毒、纤维素性肺炎、小叶性肺炎、腹膜炎、肾炎、子宫炎、乳房炎、蜂窝织炎等疾病。另外,还见于白血病、恶性肿瘤、尿毒症、酸中毒等。(2)白细胞降低:见于一些病毒性传染病,如猪瘟、马传染性贫血、流行性感冒、鸡新城疫、鸭瘟等;见于各种疾病濒死期和再生障碍性贫血。还见于长久使用一些药品时,如磺胺类药品、青霉素、链霉素、氯霉素、氨基比林、水杨酸钠等。返回动物诊疗技术血常规专家讲座第90页淋巴细胞LYM,LYM%升高a.病毒感染
b.慢性感染
c.淋巴细胞性白血病
d.白血性淋巴肉瘤e.生理性
f.肾上腺功效不足
g.血液寄生虫感染降低
a.应激或使用肾上腺皮质激素
b.放射线
c.感染(病毒,立克次体,弓形虫)
动物诊疗技术血常规专家讲座第91页六、血小板计数(PLT,PT,BPC)PLT来自骨髓巨核细胞系,在血液循环中,血小板不与其它细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持其完整性,它含有黏附、聚集、分泌、促凝血和血块收缩功效。当血管局部受到损伤时,血小板止血兼不机械性堵塞伤口和生物化学黏附,聚集作用。动物诊疗技术血常规专家讲座第92页动物诊疗技术血常规专家讲座第93页⑴血小板增多:①原发性血小板增多症:可发生血栓或血栓性并发症;②骨髓增生性疾病:慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、骨髓纤维化症等;③争性大出血、急性溶血、急性化脓性感染;④脾切除手术后。动物诊疗技术血常规专家讲座第94页⑵血小板降低:①血小板生成障碍:见于骨髓造血功效受损而致造血功效障碍性疾病,如再生障碍性贫血,急性白血病,放射病和放射治疗、化疗后,骨髓纤维化等;②血小板破坏或消耗过多:见于原发性血小板降低性紫癜、脾功效亢进、系统性红斑狼疮(SLE)、弥散性血管内凝血(DIC)、血栓性血小板降低性紫癜、进行体外体循环手术等;③服用一些药品可使血小板降低:如氯霉素、链霉素、青霉素、磺胺类药、阿司匹林、氯丙嗪、抗甲状腺药品等。动物诊疗技术血常规专家讲座第95页[异常结果处理]⒈PLT显著增多,必须警觉发生血栓,应在医师指导下降低血液黏度。⒉PLT显著降低,必须预防出血,应在医师指导下输血或输注血小板,尽可能防止手术治疗。动物诊疗技术血常规专家讲座第96页动物诊疗技术血常规专家讲座第97页全自动血液细胞分析仪检验动物种类多有12种动物检测模式,如狗、猫、马、牛、羊、猴、鼠,并有四种用户自定义模式。适用范围宠物医院动物检疫部门畜牧兽医院动物园科研院校试验中心动物诊疗技术血常规专家讲座第98页操作方便嵌入式标本处理和测量单元全新高精度血液处理技术,抗凝全血9.6μl试剂自动加入,能直接感应试剂余量排堵方便20项检测结果及WBC、RBC、PLT直方图同屏显示9.6μl抗凝血只需按“计数“健即被吸收分析结果可靠界面鼠标操作,参数支持人工调整提供配套动物血检测专用试剂有汇报打印功效动物诊疗技术血常规专家讲座第99页主要技术参数工作原理:电阻抗法,氰化高铁血红蛋白法及无氰化物SFT法检测参数:白细胞三分群,23项参数(含WBC、RBC、PLT彩色直方图)标准用量:9.6μl(全血模式)20μl(预稀释模式)检测速度:≥40样本/小时,可24小时开机有自动休眠及唤醒功效结果存放:主机自动存放1份样本全部参数包含直方图、历史数据管理查询更便捷操作语言:全汉字动物种类:狗、猫、马、牛、羊、
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