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文档简介
关于染色体分带带实验实验目的初步掌握染色体分带(C带)的显带技术第2页,共7页,2024年2月25日,星期天实验原理
用常规的染色体处理方法和染色方法,一般只能显示染色体的外部形态特征,如大小或长短、着丝点或次缢痕的位置以及随体等。但对于核型分析中较准确地识别染色体组的每个成员,以及其结构的变异,则仍有不少困难。通过不同的预处理和染色方法可导致染色体内部结构的分化染色,以获得更多的具鉴别性特征的信息,即染色体的“解剖学”特征。也就是染色体的分带技术。广义而言,凡能显示染色体结构分化的实验技术,均可列为染色体的分带技术。
第3页,共7页,2024年2月25日,星期天常见的带型
G带也叫G显带,这是临床上最常用的显带方法。用蛋白水解酶,尿素待处理中期染色体标本均可显带。G带的特性是显带方法简单恒定,带型稳定,保存时间长。
Q带用喹吖因染料染中期染色体标本可出现一种特征性黄光亮暗带型,一般富含AT-DNA区段表现为亮带,富含GC-DNA区段黄光较暗,常用于人类Y染色体长臂的观察。临床上较少用,不能长久保存。
C带这种方法将结构异染色质和高度重复的DNA区域染色。在人类染色体上这些区域位于着丝粒和Y染色体上。常用于某一科题的研究。
R带与G带相近,常用于染色体末端的研究。
Ag-NOR也称银染色,着色的为与rDNA转录有关的酸性蛋白,即显示的是有转录活性的核仁形成区。用于研究rRNA的初态变化,临床上常用于着丝粒,随体等研究。
第4页,共7页,2024年2月25日,星期天实验用品1.材料小鼠骨髓细胞制片2.药品5%BaOH溶液、2*SCC溶液、0.1mol/L盐酸、5%Giemsa染液3.器具显微镜、水浴锅、染缸第5页,共7页,2024年2月25日,星期天实验步骤1.
0.1mol/L盐酸处理30分钟,蒸馏水洗净2.染色体标本放入新配的5%BaOH染液的染缸中,室温静置15分钟。然后将染缸连同制片放在水龙头下冲洗(逐步置换法)3.
复性制片放入60℃,2*SCC溶液中保温1小时,洗净4.
染色放入5%Giemsa染液的染缸中,染色10-20分钟5.
观察洗净干燥后观察第6页,共7页,2024
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