临床医学检验：流式细胞仪及免疫自动化仪器试题预测

临床医学检验：流式细胞仪及免疫自动化仪器试题预测1、问答题

简述流式细胞免疫分析仪免疫检测的质量控制。正确答案：(1)同型对照：为免疫荧光标记中的阴性对照，选用相同源性的未标记单抗作为同型对照来调整及设置电流电（江南博哥）压，在此基础上进行的样本检测可使荧光标记单抗的信号保持其特异性。(2)全程质控：流式细胞检测中，样品标记、溶血、洗涤、仪器质控和上机检测是流式细胞检测的一个连贯过程，该过程的准确性与标准化操作与否都会对检测结果造成直接影响，因此在临床样本测定的同时，进行全程质控非常必要和重要，所采用的质控物Immuno-TrolCells是全血质控的冻干品，将该质控物复溶后与待测标本一起标记、洗涤和检测，所得结果如达标定靶值，提示本次实验结果可靠。同时可用该质控结果建立质控曲线。2、问答题

试述电化学发光法反应原理及其优点?正确答案：(1)电化学发光法反应原理：反应在电极表面进行，发光底物为基态三联吡啶钌，另一反应物为三丙胺(TPA)，在阳电极表面，以上两种化合物均可失去电子发生氧化反应，TPA被氧化成阳离子自由基，可将一个电子传递给三联吡啶钌使其变成激发态，激发态的三联吡啶钌在衰减时发射一个波长为620nm的光子而又回到基态，周而复始，可在电极周围产生许多光子，使光信号得以增强。(2)电化学发光免疫测定具有以下优点：标记物的再循环利用，使发光时间更长、强度更高、易于测定；敏感度高，可达pg/ml或pmol水平；线性范围宽；反应时间短，20min可完成测定；试剂稳定性好。3、判断题

鲁米诺类与蛋白质结合后使其发光作用增强，可用于化学发光标记免疫测定。()正确答案：错4、单选

峰值脉冲信号是指()A．电压脉冲曲线内外区域的大小B．电压脉冲曲线外区域的大小C．电压脉冲曲线内区域的大小D．电压脉冲的高度E．以上都不是正确答案：D5、名词解释

能量传递复合染料正确答案：主要用化学法将两种不同激发波长的染料结合一起，在488nm波长激发光照射下，通过一个荧光染料被激发后产生的发射波长激发另一荧光染料产生荧光信号，从而检测到该特定荧光信号。6、填空题

荧光信号的放大测定通常使用______________和____________________。免疫测量中最常使用的是______________。正确答案：线性放大器；对数放大器；对数放大器7、问答题

常用的荧光免疫自动化分析有哪些类型，各有何临床应用?正确答案：常用的荧光免疫自动化分析主要是将抗原抗体反应与荧光物质发光分析和计算机技术有机结合的一项自动化免疫分析技术。最常用的有时间分辨荧光免疫测定(TR-FIA)和荧光偏振免疫测定二种类型。TR-FIA应用：①激素：甲状腺激素、甾体类激素的检测；②病毒性肝炎标志物(如抗-HCV)的检测；③肿瘤标志物的检测；④药物及多肽类的检测。荧光偏振免疫测定的应用：主要应用于血清及尿液中小分子药物的测定。8、单选

下列哪种物质产生的荧光为长寿命荧光()A．FITCB．RB200C．血清白蛋白D．镧系金属离子E．胆红素正确答案：D9、名词解释

Rayleigh散射正确答案：悬浮在反应溶液中的分子，无论是固体或胶体粒子都可以是散射中心，当入射光通过时，如果颗粒直径比入射光波长小很多，则散射光的分布比较均匀，称为Rayleigh散射。10、单选

作为化学发光的有机化合物具备的条件，错误的是()A．发光由氧化反应所产生B．光量子产额高C．合适的物理特性D．合适的化学特性E．大分子物质正确答案：E11、单选

对数放大器中输入信号比过去放大10倍，输出信号由()A．1转变为2B．2转变为3C．3转变为4D．1转变为3E．1转变为4正确答案：A12、单选

流式细胞仪中荧光信号是怎样产生的()A．被检细胞上标记的特异性荧光染料受荧光激发后产生B．被检细胞上标记的特异性荧光染料受紫外光激发产生C．被检细胞上标记的特异性荧光染料受红外光激发产生D．被检细胞上标记的特异性荧光染料受发光物质激发产生E．被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发产生正确答案：E13、判断题

流式细胞仪检测的前向散射光用于检测细胞或其他粒子内部结构属性。()正确答案：错14、单选

下列关于散射比浊分析描述，错误的是()A．散射光的强度与复合物的含量成反比B．测定的散射信号值应是在散射信号响应值曲线的上升臂部分C．散射比浊法分析与透射比浊分析的原理完全不同D．一定要保持抗体过量以维持抗原抗体复合物的相对不溶解性E．抗体量恒定时，形成免疫复合物的反应速率与散射信号响应值的上升呈正比正确答案：A15、名词解释

分选得率正确答案：是指从一群体细胞悬液中分辨出目的细胞总量，再经分选后获得目的细胞的实际得率。16、单选

目前与保证分选细胞的纯度最直接相关的是()A．被分选细胞的性质相关B．其他细胞的性质相关C．被分选细胞的数量相关D．其他细胞的数量相关E．分选细胞与其他细胞有无相互重叠的生物学特性正确答案：E17、单选

流式细胞仪的光路与流路校正，选择的质控品是()A．FlowcountB．Immuno-TrolCellsC．Flow-SetFluoropheresD．Flow-checkFluoropheresE．以上均不对正确答案：D18、单选

流式细胞仪检测原理中最重要的一点就是()A．采用荧光检测器检测特定荧光的特定发射波长B．检测激发光的波长C．检测荧光的颜色D．检测前向散射光E．检测侧向散射光正确答案：A19、单选

流式细胞仪进行细胞分选时采用高压静电场，则()A．分选细胞充电，未被分选的其他细胞和空白液滴不充电B．分选细胞不充电，未被分选的其他细胞和空白液滴充电C．分选细胞和空白液滴充电，未被分选的其他细胞不充电D．分选细胞和未被分选的其他细胞充电，空白液滴不充电E．分选细胞、未被分选的其他细胞及空白液滴均充电正确答案：A20、单选

流式细胞仪采用的光源系统是()A．荧光B．激光C．射线D．可见光E．紫外线正确答案：B21、填空题

Rayleigh的设计原理是，散射光的强度与复合物的量成________________，与散射夹角成______________，与波长成________________。正确答案：正比；正比；反比22、单选

下列不适于分析体液中大分子物质的方法是()A．TRFIAB．ELISAC．FPIAD．ECLIAE．荧光酶免疫分析正确答案：C23、单选

对实验分析数据存储、显示与分析的流式细胞仪组成部件是()A．计算机B．光学系统C．光电倍增管D．软件E．数据处理系统正确答案：E24、填空题

FITC是免疫荧光技术中最常用的染料，但其发射荧光的强度受______________影响较大。正确答案：pH25、单选

为保证流式细胞仪检测信号的准确性，消除重叠信号通常采用的方法是()A．荧光补偿校正B．选择最适合的滤光器C．计算时减去干扰信号D．每次只用一种荧光素标记E．计算时增加1000正确答案：A26、判断题

荧光免疫测定不能用于定量分析。()正确答案：错27、问答题

荧光偏振免疫测定的原理及主要用途。正确答案：利用荧光物质在溶液中被单一平面的偏振光照射后，可吸收光能而产生另一单一平面的偏振发射荧光，该荧光强度与荧光标记物质在溶液中旋转的速度与分子大小成反比，主要用于测定小分子药物浓度。28、填空题

流式细胞仪分析的最关键的一步是________________________。正确答案：制备单细胞悬液29、多选

关于自动化仪器的技术指标的描述，下列正确的是()A．使用高特异性高亲合力的抗体B．通常采用磁性微球作为固相载体，增加反应面积C．最常使用生物素-亲和素包被等放大抗原抗体反应的反应信号D．结合计算机软件系统自动处理分析信号及数据转换E．人工智能化的设计，自动检测及校对功能正确答案：D,E30、多选

关于流式细胞仪检测的前向散射光，下列描述正确的是()A．激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号B．用于检测细胞或其他粒子内部结构属性C．又被称为小角散射D．其强弱与细胞的体积大小成正比E．是用于检测细胞或其他粒子物体的表面属性正确答案：A,C,D,E31、单选

在形成的连串均匀液滴中，大量液滴是()A．含有细胞B．含有淋巴细胞C．含被荧光染色的淋巴细胞D．不含细胞的空白液滴E．以上都不是正确答案：D32、单选

流式细胞分析技术中设置的同型对照是()A．免疫荧光标记中的阳性对照B．免疫荧光标记中的阴性对照C．免疫荧光标记中的光校正D．免疫荧光标记中的流路校正E．免疫荧光标记中的绝对计数校正正确答案：B33、名词解释

前向散射光正确答案：激光束照射细胞时，光以相对轴较小的角度(0.5～10°)向前方散射讯号。对同一个细胞群体，FS信号的强弱与细胞的体积大小成正比，因此可以说FS是用于检测细胞或其他粒子物体的表面属性。34、单选

下列关于双参数直方图的描述，错误的是()A．双参数直方图是一种细胞数与双测量参数的图型B．通常采用线性信号C．通常采用设置十字门来区分细胞信号D．纵、横坐标分别代表被测细胞的两个测量参数E．在图示中每一个点代表一个细胞正确答案：B35、判断题

对分选速度的要求应按分选细胞的特性来决定。()正确答案：对36、问答题

常用的自动化免疫比浊分析技术有哪些类型?操作中应注意哪些问题?正确答案：常用的自动化免疫比浊分析技术包括：散射免疫比浊分析、定时散射比浊分析、速率散射比浊分析、免疫透射比浊分析。在操作时，应注意以下几点：(1)校准程序仪器在使用前，均应按各仪器制造厂的标准对光路通道、流路通道、采样针探测界面等进行校准，以保证仪器处于正常的工作状态；(2)定标程序每个检测项目在进行临床标本检测之前，必须通过用校正品的定标测试程序，以保证检测使用的试剂药盒具有可靠性。(3)按照仪器操作规程进行安全操作；(4)注意仪器报警提示，及时解决问题，保证检测的准确性。37、填空题

化学发光免疫分析根据采用的标记物不同可为________________、__________________、____________。正确答案：发光物标记；酶标记；元素标记38、名词解释

Heidelberger曲线正确答案：是指当抗体量恒定时，抗原与抗体结合，形成免疫复合物的反应与散射信号响应值的上升成正比而绘制的曲线。39、判断题

荧光染料浓度较稀时，荧光强度与溶液成反比。()正确答案：错40、单选

FPIA分析中标本抗原浓度越高()A．形成的标记抗原-抗体复合物越少B．形成的标记抗原-抗体复合物越多C．游离的标记抗原越少D．游离的已知抗体越少E．以上均不对正确答案：A41、问答题

试论述应用免疫浊度法检测各项目的测定过程中的注意事项。正确答案：应用免疫浊度法检测各项目的测定过程中应当注意下述几个问题：①伪浊度的影响：伪浊度形成原因复杂，主要是抗血清含有非特异性的交叉反应性抗体成分；增浊剂浓度和反应时间掌握不当；样品本身的浊度处理不当；试剂的污染和变质；器材尤其是比色杯等不够清洁等因素；②非特异性光散射的影响：免疫浊度法常受内源性光散射的干扰，为避免这些非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时需保证样品组分在3%以下，散射比浊法需保证在0.5%以下；③钩状效应的影响：钩状效应存在于各种免疫测定方法中，在免疫浊度测定中也十分明显，现在一些仪器已能检测；④校正与质量控制：应用合适的校正材料制备剂量-反应曲线。剂量-反应曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的选择，也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校正材料的质量有关。对于自动分析仪而言，现多推荐5点或6点定标，然后选择适当的数学方法进行曲线拟合。更换一批试剂时应重新制作剂量-反应曲线。此外，为保证结果准确可靠，制备和选取合适的质控材料，进行室内质控是极为必要的；⑤结果报告与计量问题：目前仍有不少生物物质，尚无国际认可的初级标准，更无统一计量单位，而以任意单位表示。即使已知氨基酸顺序，可以正确计算分子量的物质，对其国际单位(u或U)与纳克(ng)或摩尔(mol)之间的换算仍是个复杂问题，因为生物分子的活性不仅与其量成正比，还可与其结构有密切联系。因此应采用说明书中规定的单位。42、填空题

临床常用的化学发光免疫分析，可分为______________、__________________、____________三型。正确答案：化学发光酶免疫测定；微粒子化学发光免疫测定；电化学发光免疫测定43、多选

对数放大器用于测量什么情况下的信号()A．强度变化范围较大B．光谱信号较复杂C．强度变化范围小且光谱信号复杂D．强度变化范围大且光谱信号简单E．以上都不是正确答案：A,B44、多选

流式细胞仪分析技术涉及了下列哪些技术()A．激光技术B．计算机技术C．显微荧光光度测定技术D．流体喷射技术E．分子生物学技术正确答案：A,B,C,D,E45、单选

关于微粒子化学发光免疫分析的描述，错误的是()A．最常用的是双抗体夹心法B．检测水平可达ng/ml，重复性好C．以顺磁性微珠作为载体包被抗体D．发光底物是AMPPDE．检测水平可达pg/ml，重复性好正确答案：B46、单选

前向散射光是用于检测细胞或其他粒子物体的()A．内部属性B．表面属性C．着染属性D．粒子属性E．分子构型正确答案：B47、名词解释

免疫测定(immunoassay)正确答案：是指利用抗原和抗体特异性结合反应的特点来检测标本中微量物质的方法。48、填空题

根据发光反应中形成激发态分子的能量来源不同，将发光又分为______________、__________________、________________。正确答案：光照发光；生物发光；化学发光49、判断题

将多个双参数直方图叠加可在同一屏幕上观察被检测细胞的特性及在该群细胞中的分布。()正确答案：对50、单选

免疫比浊分析伟大革命的技术是()A．散射免疫比浊分析B．定时散射比浊分析C．速率散射比浊分析D．免疫透射比浊分析E．肉眼比浊分析正确答案：C51、多选

关于速率散射比浊分析的方法学评价，正确的是()A．测定抗原抗体反应第一阶段B．可快速测定C．灵敏度高D．测定速率散射信号E．理论上不受本底散射信号干扰较大正确答案：A,B,C,D,E52、判断题

流式细胞仪的工作原理借鉴了荧光显微镜技术。()正确答案：对53、填空题

流式细胞仪的结构由__________________、________________和__________________组成。正确答案：液流系统；光学系统；数据处理系统54、多选

流式细胞仪的基本组成部分包括()A．液流系统B．光学系统C．信号检测系统D．数据处理系统E．信号转换系统正确答案：A,B,D55、多选

荧光染料在488nm激光下发出荧光颜色有()A．绿色B．橙色C．白色D．橙红色E．红色正确答案：A,B,D,E56、单选

免疫透射比浊分析制备标准曲线时，标准品至少应设()A．2个浓度点B．3个浓度点C．4个浓度点D．5个浓度点E．1个浓度点正确答案：D57、单选

分选速度与细胞悬液中分选细胞的哪项指标有直接关系()A．细胞含量B．细胞性质C．细胞大小D．有否胞膜E．单核或多核正确答案：A58、单选

免疫比浊分析主要用于检测()A．免疫球蛋白、补体等B．肿瘤标志物C．病毒血清标志物D．内分泌激素E．细胞表面标志正确答案：A59、问答题

鞘液的主要作用是什么?正确答案：鞘液的主要作用：鞘液是辅助样本流进行正常检测的基质液，其主要作用是包裹在样本流的周围，使其保持处于喷嘴中心位置以保证检测精确性，同时防止样本流中细胞靠近孔壁而堵塞喷嘴。60、单选

目前临床治疗药物监测最常采用的方法是()A．FPIAB．荧光酶免疫分析C．TRFIAD．ELISAE．免疫比浊分析正确答案：A61、单选

为保证定时散射比浊分析所获取的信号峰值为被检抗原产生，设计时采用()A．抗原过量检测B．抗体过量检测C．平行管检测D．本底的检测E．阈值限定正确答案：A62、填空题

目前荧光免疫自动化分析中最常用的有____________________和____________________二种类型。正确答案：时间分辨荧光免疫测定；荧光偏振免疫测定63、单选

免疫检测自动化的首要目的是()A．提高工作效率和检测的精密度B．减低操作者劳动强度C．减少操作程序D．自动检测及校对E．提高检测的可靠性正确答案：A64、单选

Gate设置是指在某一张选定参数的直方图上根据该图的细胞群分布选定其中想要分析的特定细胞群，并要求该样本所有其他参数组合的直方图只体现()A．该群细胞的分布情况B．RBC的分布情况C．WBC分布情况D．Pt分布情况E．CD4细胞分布情况正确答案：A65、单选

侧向检测器与激光束的方向()A．平行B．在激光前方C．在激光上方D．垂直E．在激光下方正确答案：D66、名词解释

速率散射比浊分析正确答案：是抗原-抗体结合反应的动态测定法，测定的是抗原-抗体反应的第一阶段，对抗原-抗体结合的速率峰值信号进行测定。峰值的高低在抗体过量情况下与抗原的量成正比。67、多选

关于电化学发光免疫分析的评价，正确的是()A．智能化程度高B．敏感度高C．特异性强D．准确性高E．检测试剂稳定正确答案：A,B,C,D,E68、单选

在散射比浊的设计中，多采用的原理是()A．Mile原理B．Rayleigh原理C．Fahey原理D．Mancini原理E．Sternberg原理正确答案：B69、单选

前向散射光是指激光束向前照射细胞时()A．光以0.5～10°的散射信号B．光以20～30°的散射信号C．光以35～60°的散射信号D．光以90°的散射信号E．光以45°的散射信号正确答案：A70、问答题

简述散射比浊法的基本原理。正确答案：散射比浊法是指一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液时遇到抗原抗体复合物粒子，光线被粒子颗粒折射，发生偏转，光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。散射光的强度与复合物的含量成正比，即待测抗原越多，形成的复合物越多，散射光强度越强。散射比浊分析完全不同于透射比浊分析，是免疫比浊分析中最常用的一种方法。71、单选

关于单参数直方图的描述，正确的是()A．能显示两个独立的参数与细胞的关系B．通过十字门进行测定C．只能表明一个参数与细胞数量的关系D．只能用于定性资料的分析E．不是通过线性门进行测量正确答案：C72、单选

速率散射比浊分析的抗原过量检测时，出现第二次速率峰值信号表示()A．被测定抗原量过高，应稀释重测B．被测定抗原量太低，应取上一个稀释浓度C．第一次速率峰值信号是由全部的待测抗原产生D．第一次速率峰值信号是由部分的待测抗原产生E．以上均不对正确答案：C73、单选

假三维等高图中的一维表示()A．细胞B．细胞数C．线性D．对数E．峰值正确答案：B74、单选

双参数直方图包括()A．点图B．点图、二维等高图C．点图、二维等高图、三维等高图D．点图、二维等高图、假三维等高图E．点图、二维、三维和假三维等高图正确答案：D75、单选

双抗体夹心法微粒子化学发光免疫分析中，将抗原-磁珠抗体复合物与非特异性物质快速分离的机制为()A．磁力的作用B．电场力的作用C．PEG的凝聚作用D．洗涤E．超速离心法正确答案：A76、单选

微粒子化学发光免疫分析(MLIA)中，作用于发生底物三氧乙烷的标记物是()A．HRPB．ALPC．PR3D．三联吡啶钌E．AMPPD正确答案：B77、填空题

流式细胞术是对__________________的理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。正确答案：单个细胞78、多选

作为化学发光的有机化合物具备的条件，正确的是()A．发光由氧化反应所产生B．光量子产额高C．合适的物理特性D．合适的化学特性E．大分子物质正确答案：A,B,C,D79、单选

目前流式细胞仪中最常用于单克隆抗体标记的荧光染料是()A．FITC、RB200、TRITCB．FITC、PE、PCC．FITC、RB200、PED．FITC、TRITC、PEE．FITC、PE、ECD或PeCy5正确答案：E80、单选

流式细胞仪的基本结构组成是()A．液流系统B．光学系统C．计算机系统D．液流系统、光学系统和信号处理系统E．液流系统、光学与信号转换测试系统和信号处理及放大的计算机系统正确答案：E81、单选

定时散射比浊分析采用的是()A．免疫扩散反应与散射比浊分析相结合的技术B．免疫吸附反应与散射比浊分析相结合的技术C．免疫沉淀反应与散射比浊分析相结合的技术D．区带免疫分析与散射比浊分析相结合的技术E．对流免疫扩散反应与散射比浊分析相结合的技术正确答案：C82、填空题

生产厂房内应备有急救药箱，存放（）的包扎材料和必需的（）。正确答案：消过毒；药品83、单选

定时散射免疫比浊分析与速率散射免疫比浊分析的最大区别是()A．所检测的蛋白质类型不同B．所选用的检测抗体不同C．光学原理不同D．抗原过量检测的设计不同E．抗体过量的量不同正确答案：D84、问答题

试述化学发光免疫分析的基本原理及其类型，其与荧光的根本区别是什么?正确答案：(1)化学发光免疫分析是以发光物质作为标记物，在反应体系中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能，产生激发态的中间体，该激发态的中间体由最低振动能级回到稳定的基态、各个振动能级时产生辐射，同时产生能量，多余的能量即为发射光子，从而产生发光现象。利用发光信号的测量仪器，分析接收的光量子产额，通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位。(2)化学发光免疫分析的类型：①根据所采用的标记物的不同可分为发光物标记、酶标记、元素标记化学发光免疫分析；②根据所采用的发光反应的体系不同和标记物的不同分为：化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、微粒子化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析。(3)化学发光反应系统中以化学反应为基础，化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发，当这种分子回到基态时释放出光子。化学发光与荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同。荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光，化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光。因此，化学发光反应中反应过程必须产生足够的激发能是产生发光效应的重要条件。85、单选

电化学发光免疫分析中，最常使用的方法是()A．双抗体夹心法B．竞争法C．间接法D．直接法E．补体参与的结合法正确答案：A86、单选

下列哪项不是流式细胞技术的荧光染料的必备的条件()A．有较高的量子产额和消光系数B．对488nm的激发光波长有较强的吸收C．容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性D．发射光波长与激发光波长接近E．发射波长与激发光波长间应有较大的波长差正确答案：D87、单选

电化学发光免疫分析与其他标记发光免疫分析原理的区别在于()A．化学发光反应在电极表面进行B．化学发光反应在容器表面进行C．化学发光反应在磁珠表面进行D．化学发光反应在液相中进行E．由电能导致发光正确答案：A88、单选

流式细胞仪对细胞进行分选的主要目的是()A．对某一特征细胞进行电流分析B．对某一特征细胞进行免疫组化分析C．对某一特征细胞进行计数分析D．对某一特征细胞进行培养、研究分析E．对某一特征细胞进行浓度分析正确答案：D89、单选

下列关于液流系统的鞘液的描述，错误的是()A．鞘液是辅助样本作正常检测的基质液B．鞘