一轮课件：第23讲-从杂交育种到基因工程

第23讲从杂交育种到基因工程考点二基因工程的操作工具及根本步骤网络构建考点一生物变异在育种上的应用考点一生物变异在育种上的应用基因重组杂交简单长基因突变辐射诱变突变率少大量自交选种自交考点一生物变异在育种上的应用种子或幼苗简单较短染色体变异秋水仙素育种年限基因重组定向考点一生物变异在育种上的应用单倍体育种杂交育种诱变育种多倍体育种基因工程考点一生物变异在育种上的应用易错警示操作水平：

水平。原理：

。优点：克服

的障碍，定向改造生物的

考点二基因工程的操作工具及根本步骤基因拼接技术加以修饰改造定向地DNA基因重组考点二基因工程的操作工具及根本步骤2.基因的“针线”——DNA连接酶(1)种类：按来源可分为E·coliDNA连接酶和

。(2)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的

。3.基因的“运输工具”——运载体〔质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等〕①质粒本质：小型环状DNA分子。②质粒作用。a.作为运载工具,将目的基因运送到受体细胞中去。b.在受体细胞内对目的基因进行大量复制。考点二基因工程的操作工具及根本步骤③条件a.能在受体细胞内稳定保存并大量复制。b.有多个限制酶切点,供外源基因插入。c.有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。d.对受体细胞无害考点二基因工程的操作工具及根本步骤考点二基因工程的操作工具及根本步骤一、PCR反响/多聚酶链式反响1.原理：DNA原理和DNA原理,即：解旋降温双链复制的热变性高温考点二基因工程的操作工具及根本步骤2.过程：(1)变性：当温度上升到90℃-95℃时,双链DNA解旋为单链。(2)复性：温度下降到55℃-60℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。变性——复性——延伸考点二基因工程的操作工具及根本步骤(3)延伸：温度上升到70℃-75℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在热稳定DNA聚合酶〔Taq酶〕的作用下,根据碱基互补配对原那么合成新的DNA链。3.特点：______能特异地复制处于_________之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈_____扩增。Taq酶两个引物指数考点二基因工程的操作工具及根本步骤4.细胞内DNA复制与PCR技术的比较：项目DNA复制PCR扩增不同点场所细胞内细胞外能量ATP提供能量不需ATP提供能量酶解旋酶、DNA聚合酶Taq酶/热稳定DNA聚合酶特点边解旋边复制,半保留复制完全解旋考点二基因工程的操作工具及根本步骤项目DNA复制PCR扩增不同点循环次数受生物体自身控制30多次缓冲液不需要需要人为控制设备无PCR扩增仪/严格控制温度变化的温控设备相同点原料四种脱氧核苷酸（PCR用脱氧核苷三磷酸）模板DNA引物都需要与模板相结合的引物考点二基因工程的操作工具及根本步骤考点二基因工程的操作工具及根本步骤最核心、最关键a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给子代b、使目的基因能表达和发挥作用生物种类植物动物微生物受体细胞

体细胞或受精卵受精卵原核细胞目的基因的检测和鉴定〔4〕考点二基因工程的操作工具及根本步骤考点二基因工程的操作工具及根本步骤育种药物提高生长速度改善畜产品的品质乳腺生物反响器：药用蛋白基因+乳腺蛋白基因的启动子等调控组件，导入受精卵，培育出转基因动物，泌乳含有药用蛋白作器官移植的供体考点二基因工程的操作与应用考点二基因工程的操作工具及根本步骤严格控制大范围推广考点二基因工程的操作工具及根本步骤考点二基因工程的操作与应用6.植物基因工程：受体细胞一般是体细胞。原因是植物体细胞具有全能性,导入重组DNA的植物体细胞经过植物组织培养能形成个体。动物基因工程：受体细胞是受精卵。原因是分化的动物体细胞全能性受到限制,动物体细胞经过细胞培养不能形成个体。原核生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。技法提炼与DNA有关的酶的比较考点二基因工程的操作工具及根本步骤考点二基因工程的操作工具及根本步骤AD考点二基因工程的操作工具及根本步骤D考点二基因工程的操作工具及根本步骤

537bp、790bp、661bp

平BamHⅠ

抗生素B

4同种限制酶切割形成的末端相同，局部目的基因D与质粒反向连接考点二基因工程的操作工具及根本步骤考点二基因工程的操作工具及根本步骤限制性核酸内切(或限制)

启动子胰蛋白

RNA

RAS蛋白考点二基因工程的操作工具及根本步骤反转录

限制酶

P