红细胞计数和血红蛋白测定

关于红细胞计数和血红蛋白测定2红细胞检查第2页,共32页，2024年2月25日，星期天3红细胞概述第3页,共32页，2024年2月25日，星期天472小时48小时第4页,共32页，2024年2月25日，星期天血红蛋白(血色素，Hb或HGB)是一种微红色的胶体物质，分子量为64458。是一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34毫升．成人红细胞总量约有600g血红蛋白，可携氧800毫升。血红蛋白概述第5页,共32页，2024年2月25日，星期天61.血红蛋白组成FEPFe++血红素HPHb第6页,共32页，2024年2月25日，星期天72.血红蛋白分子结构及成分组成Hb的多肽链两大类：①α类链：αζ和θ链；②非α链：βδγε链。

α链由141个氨基酸组成，

β链由146

个氨基酸组成。第7页,共32页，2024年2月25日，星期天8每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成，每条珠蛋白肽链含有1个亚铁血红素。第8页,共32页，2024年2月25日，星期天在人体不同生长时期，Hb种类与比例不同：第9页,共32页，2024年2月25日，星期天10

检测方法1.手工显微镜法：2.血液分析仪法：任务一红细胞计数第10页,共32页，2024年2月25日，星期天11手工显微镜法定义：测定每升血液中所含红细胞数目，用？.？X1012/L表示。第11页,共32页，2024年2月25日，星期天12改良牛鲍计数板计数板第12页,共32页，2024年2月25日，星期天13第13页,共32页，2024年2月25日，星期天14第14页,共32页，2024年2月25日，星期天15【操作】1.准备计数板2.加稀释液：2ml3.加血：10μl混匀4.充池5.计数6.计算：红细胞数=N/5*25*10*200*106/L第15页,共32页，2024年2月25日，星期天16

1．手工法误差来源：标本、操作、器材、固有误差

2．仪器法

严格按照操作规程、定期进行室内和室间质控质量控制第16页,共32页，2024年2月25日，星期天171.手工显微镜法①血液分析仪的校正②白细胞减少时的对照核实。③血小板计数受小红细胞干扰时的校正2．血液分析仪法方法精确，且操作简便、快速，已广泛应用。方法学评价第17页,共32页，2024年2月25日，星期天18成年：男性（4～5.5）×1012/L

女性（3.5～5.0）×1012/L新生儿：（6.0～7.0）×1012/L参考值第18页,共32页，2024年2月25日，星期天191．生理性变化(1)年龄与性别的差异(2)精神因素(3)剧烈体力运动和劳动(4)气压降低(5)妊娠中、后期

临床意义第19页,共32页，2024年2月25日，星期天20

2．病理性变化

(2)红细胞增多

1)原发性红细胞增多2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多

(1)红细胞和血红蛋白量减少1）红细胞生成障碍2）造血原料缺乏3）利用障碍红细胞4）破坏过多和失血临床意义第20页,共32页，2024年2月25日，星期天21

医学决定水平①高于6.8×l012/L，应采取相应的治疗措施。②低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限，应继续寻找原因。③低于1.5×l012／L应考虑输血

指该项目结果如高于或低于某一个值时就应该采取一定的措施，为患者处理起提供依据的作用。临床意义第21页,共32页，2024年2月25日，星期天22定义：血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度，用g/l表示任务二血红蛋白测定第22页,共32页，2024年2月25日，星期天231．氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法

2．其他测定法

十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法（CTAB）等检测原理第23页,共32页，2024年2月25日，星期天24HiCN转化液：即文齐氏液540nm处有一吸收波峰，用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。

CN-血红蛋白高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白高铁氰化钾540nm血红蛋白浓度吸光度第24页,共32页，2024年2月25日，星期天25第25页,共32页，2024年2月25日，星期天26血红蛋白浓度计算公式：Hb(g/L)=Aג540HiCN×64458/44000×251=A×367.7第26页,共32页，2024年2月25日，星期天27方法学评价第27页,共32页，2024年2月25日，星期天28

方法

优点

缺点HiCN操作简便、快速(5min)，结果稳定可靠，试剂容易保存，便于质控，为参考方法①KCN有剧毒②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。③HbCO转化慢SDS-Hb不用剧毒试剂、无公害，操作简便，呈色稳定，准确度和精度高①SDS-Hb消光系数未确定②SDS质量差异性大。③SDS溶血活力大，不适于同时进行自动化分析AHD575

同HiCN法，不用剧毒试剂不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准HiN3

准确度和精密度高，试剂毒性低HbCO转化慢CTAB溶血活力强，但不破坏白细胞，适合自动化分析精密度和准确性低第28页,共32页，2024年2月25日，星期天29

质量控制第29页,共32页，2024年2月25日，星期天30①成年：男性：120～160g／L；女性：llO～150g／L。②新生儿：170～200g／L。③老年(70岁以上)：

男性：94～122g／L；女性87～112g／L。

参考值第30页,共32页，2024年2月25日，星期天31①轻度贫血，成年男性Hb＜