酶法破碎大肠埃希菌_第1页
酶法破碎大肠埃希菌_第2页
酶法破碎大肠埃希菌_第3页
酶法破碎大肠埃希菌_第4页
酶法破碎大肠埃希菌_第5页
已阅读5页,还剩1页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

岗位演练酶法破碎大肠埃希菌1任务二人干扰素α2b发酵液处理查阅资料,熟悉大肠埃希菌细胞壁的结构及组成。查阅设计《酶法破碎大肠埃希菌操作记录》,在任务实施过程中同步填写。向大肠埃希菌悬浮液,加酶进行细胞破碎;以革兰结晶紫染色后用血球计数板计数,计算破碎率。设计实操设计(一)任务描述2(二)实训材料1.材料、试剂保藏的大肠埃希菌斜面;溶菌酶;碎冰;胰蛋白陈;酵母提取物;氯化钠;氯化钾;氢氧化钠;磷酸氢二钠;磷酸二氢钾;Tris;浓盐酸:EDTA;TritonnX-100;草酸铵;结晶紫

;95%乙醇;蒸馏水。2.仪器设备酸度计、冷冻离心机、电子天平、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、恒温摇床。3(三)实训操作0504030201配制溶液制备大肠埃希菌料液收集大肠埃希菌酶解大肠埃希菌菌体破碎率检查LB液体培养基PBS缓冲液Tris-HCl缓冲液溶菌酶裂解液革兰结晶紫染液菌种接种于LB液体培养基,以200r/min,37℃过夜培养(或18h)1℃,8000r/min离心10min,取沉淀,用PBS悬浮后,再4℃,反复用PBS洗涤,离心菌体2~3次。每克湿菌体加入10~20mL裂解液,混匀后冰水浴3h。破碎菌体前后分别取样,以革兰结晶紫染色,显微镜观察,计数破碎率。4清场11清场6(四)任务分析与总结1.为什么能够以酶法破碎大肠埃希菌?除了酶法外,还有哪些方法可用于大肠埃希菌,请简述这些方法破碎大肠埃希菌的原理。2.小组讨论:酶法破碎大肠埃希菌的步骤及操作要点,选取代表汇报讨论结果。3.选择题。(1)高压匀浆法不适用于(

)的破碎。A.丝状真菌B.小的革兰阳性菌C.基因工程菌D.革兰阴性菌(2)生产中需配制pH7.0的缓冲溶液,请问可以选择的缓冲对是(

)。A.pKa为4.8的缓冲对B.pKa为5.8的缓冲对C.pKa为6.8的缓冲对D.pKa为9.8的缓冲对5路曼曼其修

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论