尿液检验标准化进展课件

尿液检验标准化、质控进展现状

建议第一章

干化学检测

尿液有形成分

优点：检测化学项目多、速度快；不足：检测特异性不好、检测项目名不副实；质控：1、质控物为化学物质，不是真实形态学成分；

2、干扰因素多，无法预知和排除；许多有形成分不能检测；方法自身不能证实检测的真实性；不符合ISO15189；只能是过筛检测；现状弥补办法必须镜检：1、镜检与化学检验的关系：互补、验证2、镜检干化学不能检测的有形成分；使用特异性检测方法检测化学成分；第二章

尿液有形成分检测标准化

尿液有形成分检验的现状尿液有形成分检测仪器分类单镜头单镜头ECLM

-EuropeanUrinalysisGuidelines（2000）NCCLS-RoutineUrinalysisandCollection,

Transportation,andPreservationofUrine

Specimens;ApprovedGuideline（1995）JCCLS-JCCLSGuidelineGP1-P3（2000）SCCLS

-尿沉渣检查标准化的建议(2002)ISLH-ISLHRecommendedReferenceProcedure

fortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)NCCLS-尿液检验操作指南（第三版）(2009)修改的GP16-A3尿液检验的规范管理标准文件不离心离心方法（CLSI原NCCLS)尿液分析操作指南（第三版）GP16-A3(2009)国际标准（GP16-A32009年）给出的解决对策1、数字图像流式细胞仪、流式细胞仪等标本不论是实验室认为或仪器检测异常时（Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,）必须用人工镜检方法重新检测确认。2、阴性结果可以免除镜检确认。流式图像流式人工镜检国际标准规定国际标准的参考文献64DelangheJ.Newscreeningdiagnostictechniquesinurinalysis.ActaClinBelg.2007;62:155-161.65OttigerC,HuberAR.Quantitativeurineparticleanalysis:integrativeapproachfortheoptimalcombinationofautomationwithUF-100andmicroscopicreviewwithKOVAcellchamber.ClinChem.2003;49:617-623.66DelangheJR,KouriTT,HuberAR,etal.Theroleofautomatedurineparticleflowcytometryinclinicalpractice.ClinChimActa.2000;301:1-18.67RoggemanS,ZamanZ.Safelyreducingmanualurinemicroscopyanalysesbycombiningurineflowcytometerandstripresults.AmJClinPathol.2001;116:872-878.68ShayanfarN,ToblerU,vonEckardsteinA,BestmannL.Automatedurinalysis:firstexperiencesandacomparisonbetweentheIrisiQ200urinemicroscopysystem,theSysmexUF-100flowcytometerandmanualmicroscopicparticlecounting.ClinChemLabMed.2007;45:1251-1256.再次过筛理论依据：

1、干化学也能检测部分有形成分的化学物质；

2、流式仪器也能检测部分有形成分；

3、两者结合检测结果对照可以进一步减少人工镜检数量，减少复检率；干化学指标：红细胞、白细胞、蛋白质、胆红素；方式：排列组合为64种模式；流式+干化学再次过筛减少镜检率的可行性临床实际验证差异太大的原因：两者检测方法均为过筛检测，干扰物均无法排除、证实；两者均为非形态学方法，两者之间无相互验证性；两者方法之间也无检测的互补性；排列组合方式不适合这种检测：案例流式结果RBCWBC

干化学排列组合结果

RBCWBCPr1

234++++++++镜检方法

标准化文件

具体要求国际标准ISLHRecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)ISLH镜检方法核心内容1、不离心尿液直接检测，2、计数池体积6.4ul3、低倍镜

观察计数大型有形成分（上皮细胞、管型）；高倍镜

观察计数小型有形成分（细胞、真菌、结晶等）4、结果以“个/ul”报告。5、统计学精度

低倍：（管型和上皮）至少计数50个

CV<14%；

高倍：（红、白细胞等）至少计数200个，

CV<7%；必须有两个镜头：高倍镜和低倍镜两个镜头观察的内容不同（大小不同）两个镜头观察的范围不同（体积范围不同）两个镜头观察的细节不同（分辨率不同）二、标准镜检参考方法的基本要求：统计学精度低倍：（管型和上皮）至少计数50个CV<14%；高倍：（红、白细胞等）至少计数200个，

CV<7%；这是在有形成分浓度不低时候的理想统计学精度三、标准镜检参考方法的理想精密度

第二节

镜检自动化技术仪器

依据机器视觉方法学：显微镜镜检方法，金标准，方法溯源镜检自动化已经成为发展方向镜检自动化仪器没有改变人工镜检程序：改变的是：操作自动化：仪器预识别和计数有形成分人工审核时作用就是人工镜检符合国际标准：ISLH

RecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)仪器工作流程

完全参照人工镜检标准参考方法进样充池低倍过筛（视野数可设置）低倍定位分类计数（管型、上皮）高倍识别分类计数报告清洗阴性阳性人工审核镜检自动化仪器=人工镜检条件是否符合ISLH（2003年）的国际标准条件；是否是使用的具有高、低倍镜的显微镜;拍摄图像是否是真实显微镜下的实景？图像经过处理否？检测灵敏度能否达到:3-10个细胞/ul;结果有人工审核；审核人员专业知识、经验、能力、责任心；第三章

尿液有形成分检验质控

尿液有形成分检测质控真实成分标准品质控单一真实成分标准品质控标准成分图像质控替代品质控有形成分检测仪器技术不同质控不同流式：质控物为特制颗粒物；机器视觉技术：红细胞没有质控物的仪器现状第一节

流式质控质控依据是血液分析质控物为特制颗粒，不是尿液有形成分，为替代品，与实际检测无系统属性；干扰物影响无法质控和检测；检测错误时检测者无法获悉；分类计数无意义；实际意义：校准仪器计数准确性；检测、质控依据和问题流式特制颗粒质控物，实际检测无系统属性流式检测错误时仪器无法知道流式第二节

镜检仪器质控机器视觉质控：质控物：单一红细胞；其他成分质控品目前无法做到；发展方向：标准图像质控；预识别后人工审核不能少；标准图库建立和指导意义大，需要增加和加强；实际意义：校准仪器计数准确性；分类计数在人工审核后才具有意义；第三节

无质控品仪器

问题无质控品的仪器检测灵敏度不够，不能质控识别能力不好，无法质控检测体积达不到国际标准要求，精确度较差单镜头下小的分辨不清（ISLH要求两个镜头）单镜头的仪器探讨：高、低倍镜下图像比较第四章

如何保证尿液检测标准和正确

如何能是尿液检测标准和正确按国际标准文件

ISLH（2003）和GP16-A3执行，不折扣；尿液检验必须包括：理学、化学和镜检；任何仪器检测结果必须与人工镜检相符合；总原则仪器检测的阳性结果必须镜检复检（GP16-A3规定）；镜检复核时方法应符合ISLH规定自动化仪器灵敏度符合临床决定限要求

3-10个细胞/ul如何能是尿液