实验八-尿生成调节

实验八、尿生成的调节影响尿生成的因素实验目的1.掌握输尿管插管技术，学习尿量的记录和测量方法；2.观察神经体液因素及药物对尿生成的影响，并分析其作用机制。实验原理

尿生成的过程包括：肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌。凡是影响尿生成过程的因素均可引起尿量的改变。尿生成的调节包括肾内自身调节、神经调节、体液调节。本实验分别对实验动物施加不同因素，观察尿量及其成分的变化。尿生成的生理基础肾小管肾小体肾小囊肾小球远端小管近端小管髓袢细段近端小管直段近曲小管髓袢升支细段髓袢降支细段远曲小管

髓袢升支粗段

肾单位原理：

终尿生成＝滤过液（原尿）－重吸收量＋分泌（比较少，可不考虑）有效滤过压＝毛细血管压－胶体渗透压＋囊内压凡能影响上述过程的因素都可影响尿的生成，从而引起尿量的改变有效滤过压＝毛细血管压－胶体渗透压＋囊内压本实验用两道同步记录1道记录血压2道记录尿量实验对象：家兔实验器材和药品器材：BL-420生理机能实验系统、50ml量筒、手术器械一套、兔手术台、输尿管插管、玻璃分针、注射器（1ml、5ml、20ml）、压力换能器、记滴器、纱布。试剂：生理盐水、20﹪的氨基甲酸乙酯、20﹪葡萄糖、垂体后叶素、0.01%肾上腺素。步骤（一）麻醉、固定（25％乌拉坦4ml/kg）（二）颈部手术1．做颈部切口，逐层分离皮肤、皮下组织、肌肉（钝性分离），暴露气管。2．气管插管。3．分离双侧迷走神经，穿线备用。（三）尿液收集方法：1.输尿管插管法

在耻骨联合上缘作4～6cm正中切口（切勿伤及其下方的膀胱），剪口以能将膀胱拉出体外为度（勿因剪口过大暴露其他器官组织）。将膀胱翻至体外（勿使肠断外露，以免血压下降）。膀胱的正常位置是在输尿管腹面，当轻轻拉出并翻转膀胱时，输尿管则位于膀胱的前方。仔细辨认并分离一侧输尿管（莫损伤伴行血管），各穿两条线备用，分别将输尿管近膀胱端结扎，在结扎线的远离膀胱端剪开一个斜口（可先用玻璃分针探一下），把预先充满生理盐水的细塑料管向肾脏方向插入输尿管（1cm左右），用线结扎固定。2.膀胱套管法

腹部剪毛，耻骨联合上方正中剪口3-5cm，沿腹白线剪开腹壁，将膀胱向尾侧移至体外，辨认膀胱和输尿管的解剖部位，用针筒抽取尿液6ml，装入两只试管。然后在膀胱顶部选择血管较少处，作一直径约1.5cm的，在其中央沿纵向剪一小切口，插入膀胱插管（或膀胱漏斗）。把切口周围的缝线拉紧，结扎固定。插管口最好正对输尿管在膀胱的入口处，但不要紧贴膀胱后壁而堵塞输尿管。膀胱插管的另一端则用导管连接至记滴器或刻度试管，记录尿流量。手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。用线结扎膀胱颈部，以阻断同尿道的通路。（四）连接换能器和记滴器输尿管插管或膀胱套管与记滴器相连，使引流出的尿液滴在记滴器的两个电极之间，构成一个完整的电通路，记录通道会记录下来一次尿滴。观察项目

手术和实验装置安装完毕后，记录正常血压和尿量曲线，然后依次进行下列实验，观察血压和尿量的变化。注意：每项实验前都要记录尿量作为对照。记录正常每分钟尿形成的滴数。耳缘静脉注射生理盐水20ml，观察尿量的变化↑耳缘静脉注射1∶10000肾上腺素0.5ml，观察其尿量变化↓。耳缘静脉注射20%葡萄糖液10-15ml，观察尿量变化↑结扎并剪断两侧迷走神经，用连续单刺激其外周端，使血压下降，观察尿量变化↓。耳缘静脉注射抗利尿激素2U（0.2ml），观察尿量变化↓。结果分析1一次快速注射20ml生理盐水，使血容量增加，会引起下列情况：（1）血液被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，肾小球有效滤过率增加，尿量增加。（2）血容量增加，肾小球血浆流量增加，使尿液滤过增多，也促使尿液增加。（3）血容量增加，刺激左心房及胸腔大静脉容量感受器，冲动沿迷走神经上传到下丘脑的视上核和室旁核，使抗利尿激素（ADH）的分泌与释放减少，远曲小管，集合管对水的重吸收减少，尿液增多。结果分析2静注大剂量肾上腺素后，血压上升（使与外周小动脉平滑肌中的α受体相结合，使之收缩）尿量减少机制：肾小球毛细血管血压高低既受全身动脉血压的影响，又受肾小球入球小动脉和出球小动脉的口径比例（也就是血管平滑肌舒缩程度）的影响，而后一种因素比前一种因素更为重要。可使肾小球入球小动脉收缩，，使肾小球毛细血管中血流量降低，滤过率减少，尿量减少。因此在临床上抢救休克病人，使用大剂量的肾上腺素时一定要注意患者尿量的变化。结果分析320%葡萄糖4ml/Kg注入后，可见尿量立即大量增加因为加入后肾中滤过的葡萄糖超过了肾的肾糖阈，经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收，致使小管液中出现较多的葡萄糖，使肾小管液中的渗透压增加，防碍水的重吸收，于是水随葡萄糖一起排出，尿量增加。此称为渗透性利尿。此时尿液作生化实验，可检测出尿糖。结果分析4刺激迷走神经心输出量减少尿量减少迷走兴奋结果分析5抗利尿激素antidiuretichormone，ADH来源：下丘脑视上核和室旁核神经元分泌，神经垂体贮存、释放作用：①提高远曲小管和集合管对水的通透性；②增加髓质组织间液的溶质浓度

机制：ADH→V2→GS→AC→cAMP→PKA→使AQP-2镶嵌在管腔膜上形成水通道，增加水的重吸收思考题：试分析尿生成的主要环节，讨论各因素影响尿生成的机制。一次性口服大量清水和静脉大量生理盐水时，尿量变化有何异同？其作用机制如何？实验前给家兔喂食足量的青菜或水，否则应在手术时给予静脉补液。每一项处理因素前，要求完整对照。等前一项影响因素基本消失、血压和尿量基本恢复后再实施下一步新的项目操作。实验项目顺序可根据实验情况做调整。保护耳缘静脉。静脉注射尽量从耳缘静脉远心端开始，逐步向近心端移行。亦可保留耳缘静脉输液用的头皮针，方便静脉给药。输尿管插管防止出血及插入夹层。输尿管手术的难度较大，应注意防止导管被血凝块堵塞，或被扭曲而阻断尿液的流通。注意事项实验项目预期结果分析尿量电刺激迷走神经外周端↓电刺激使迷走神经末梢释放的Ach使心脏活动减弱,心输出量↓,血压↓,肾血流量↓,肾小球有效率滤过压↓,原尿↓注射大量生理盐水↑血容量↑，血液稀释，血浆胶渗压↓肾小球有效率滤过压↑,原尿↑；同时通过多途径引起ADH分泌↓,使远曲小管和集合管对水的重吸收↓；另外还引起心房释放心房钠素，刺激肾利钠利尿放血↓血容量↓，肾小球有效率滤过压↓,原尿↓；ADH分泌↑，远曲小管和集合管对水的重吸收↑注射大量高渗葡萄糖↑尿糖阳性由于血糖浓度急剧升高，大量葡萄糖滤出，使小管液中的糖超过肾糖阈，大量葡萄糖不能被吸收，而提高了小管液的渗透压，阻碍了肾小管对水的重吸收（渗透性利尿）实验项目预期结果分析尿量注射NE↑（小剂量）小剂量NA使肾出球小动脉收