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2粮油检验储粮真菌标准图谱第3部分:镰刀菌属GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量刀菌等,能产生单端孢霉烯族化合物、玉米赤霉烯酮4检验环境4.1菌落观察室内环境应光线充足、明亮,或在光照亮度为(450±100)lx光源下观察。不应在直射阳光下观3物镜的数值孔径一致或稍大,使整个观察视野明亮适宜。具体操作步骤见附5粮食中常见镰刀菌菌落以及显微形态特征图5.1概述粮食中常见镰刀菌的菌落图和显微形态特征图见图1~图36,显微形态特征图的标尺为10μm。菌落特征描述和显微特征描述见附录B。培养基配方及制备方5.2禾谷镰刀菌(F.graminearu45.3亚洲镰刀菌(F.asiaticum)55.4黄色镰刀菌(F.culmor65.5尖孢镰刀菌(F.oxyspor75.6半裸镰刀菌(F.incarnatu85.7木贼镰刀菌(F.equiset95.8藨草镰刀菌(F.scirpi)5.9三线镰刀菌(F.tricinct5.10苏丹镰刀菌(F.sudanense)5.11藤仓镰刀菌(F.fujikuroi)5.12层出镰刀菌(F.proliferatum)5.13串珠镰刀菌(F.verticilli粮食中镰刀菌属真菌菌落及显微形态特征观察操A.1设备和材料A.1.4生物培养箱。A.1.6生物安全柜。A.1.7放大镜。A.1.8酒精灯。A.1.10解剖针。A.1.12三角瓶。A.1.13载玻片。A.1.14盖玻片。A.1.15培养皿。A.1.17高压蒸汽灭菌器。A.2培养基和试剂A.2.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA成分和制A.2.2麦芽汁琼脂培养基(MEA):成分和制法见附录C.2。A.2.3乳酸-苯酚固定液:成分见附录C.3。A.3操作方法A.3.1菌落特征观察A.3.1.1用种植分离法或稀释分离法把粮食籽粒上的真菌分离并纯化,将纯化后的菌株保存于培养皿于28℃±1℃下培养7d。A.3.1.5肉眼或借助放大镜观察菌落的生长或发育速度、菌落颜色、菌落表面质地、菌落边缘、培养A.3.2显微形态特征观察从培养皿(A.3.1.5)的纯化菌落上挑取少许含有培养物结构于70%的酒精滴中,切忌涂抹,以免破坏水取代乳酸苯酚固定液。如盖玻片和载玻片中间有气泡,可在酒精灯(A.1.8)上微微加热排除气泡。制片操作应在生物安全柜(A.1.6)内完成,避免孢子飞扬污A.3.2.3制备好的玻片置于显微镜(A.1.1)下,观察真菌菌丝、产孢结构、分生孢子等特征。A.4观察结果A.4.1将A.3.1.4的观察现象与第5章的菌落形态标准图对照,确定菌的种类。A.4.2将A.3.2.2的观察现象与第5章的显微形态标准图对照,确定菌的种类。黄褐色;菌落在MEA培养基上直径7.0C.1马铃薯葡萄糖琼脂(potatodextrose土豆葡萄糖20.麦芽汁浸粉30.0

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