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文档简介
名词解释:(每个两分)
1.盐析:盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。如:加浓(NH4)2S04
使蛋白质凝聚的过程;
2.超二级结构:指肽链在二级结构的基础上,局部形成规则的二级结构组合体,叫做超二级结构,在结构
的组织层次上高于二级结构,但没有形成完整的结构域。
3.非竞争性抑制剂:与底物结构不类似,通过与酶活性中心以外的必需基团结合从而抑制酶的活性的抑制
剂。
4.核酶:具有催化功能的RNA分子,可以降解特异的mRNA序列。
5.必需脂肪酸:指机体生命活动必不可少的,但机体又不能自我合成,必须由食物供给的多不饱和脂肪酸,
包括:亚麻酸和亚油酸。
6.Cori循环:可立氏循环,肌肉细胞中葡萄糖经过糖酵解生成乳酸以使NAD+再生,然后肌肉细胞中的乳酸
扩散到血液并随着血液进入肝脏细胞,在肝细胞内通过糖异生途径转变为葡萄糖,葡萄糖又随着血液供
应肌肉和脑对葡萄糖的需要,这个循环过程为Cori循环。
7.酮体:在肝脏中,脂肪酸氧化的中间产物乙酰乙酸、B-羟基丁酸、丙酮统称为酮体。
8.(。-氧化:在肝微粒体中发现的一种脂肪酸氧化途径,该途径通过单加氧酶的催化使中长链和长链脂肪酸
通过末端甲基,即3-C位的氧化,转变为二竣基酸,然后进入8一氧化途径,3-氧化可以加速脂肪酸
的降解速度。
9.魔斑:在氨基酸饥饿时,细菌会产生一个严紧反应,停止许多基因的表达,抑制核糖体RNA、转运RNA和
细菌的生长。引起这一反应的信号是鸟昔四磷酸和鸟甘五磷酸,ppGpp和pppGpp,电泳时呈现这两个核昔
酸的特殊斑点,称为魔斑。
10.滚环复制:一种单向特殊的复制方式。在复制过程中首先形成共价闭环的双链分子,然后其正链由A蛋
白在特定位置切开,游离出一个3'-0H末端,A蛋白连在5;磷酸基末端。随后在DNA聚合酶的催化下,
以环状负链为模板,从正链末端加入脱氧核昔酸,使链不断加长,通过滚动而合成新的正链。合成一圈
后,A蛋白再起将其切开,游离出单位长度的环状单链DNA分子。
11.增色效应:指DNA变性后紫外吸收值增加的现象。
12.限制图谱:同一段DNA用多种限制酶进行切割,从而获得多种限制酶的酶切位点,由此建立的图谱有利
于对DNA结构进行分析。
简答
1.一个酶有催化亚基和调节亚基组成,结合在一起时有活性,分离时失活。试述其生物学意义。
答:该酶为变构酶,酶分子的非催化部位与某些化合物可逆的结合后可以发生构象的改变,进而改变酶的活
性状态。且该调节亚基为正效应物。
变构调节普遍存在于生物界,许多代谢途径的关键酶利用别构调节来控制代谢途径之间的平衡。基因表达无
论是调节蛋白对转录水平的控制,还是转录后的加工,或者是偶联的转录一翻译的控制都直接或间接的与别
构调节有关,因此与重要的生物学意义。
2.脂肪酸氧化的三个步骤及活化载体。
答:
活化载体。。。
3.噂吟霉素和红霉素作用效果不同的原因。
答:自毁容貌症也叫Nesch-Nyhan综合征,是一种与X染色体连锁的遗传代谢病,患者先天性缺乏次黄
喋吟-鸟喋口令磷酸核糖转移酶。是伴性的隐性遗传性状,常见于男性。由于缺少次黄喋吟-鸟喋吟磷酸核
糖转移酶,导致补救途径的障碍,产生过量的尿酸。喋吟核昔酸的从头合成和补救途径之间存在平衡。
5-磷酸核糖胺的合成受到嘤吟核甘酸的抑制;缺少补救途径会引起喋吟核甘酸合成速度的增加。结果大
量积累尿酸并导致肾结石和痛风。该症可通过别喋吟醇对黄喋吟氧化酶的抑制而得到缓解。更严重的后
果是招致自残肢体。缺少补救途径为什么会造成如此的神经疾病症状现在还没有研究清楚。
。因子在核心酶和启动子之间起桥梁作用,说明其原因。
答:Rho因子是一种帮助RNA聚合酶辨认终止点并停止转录的蛋白质因子。在起始过程中,Rho因子起到
关键作用,它能使聚合酶迅速的与DNA的启动子结合,Rho亚基与BETA'亚基结合时,BETA'亚基的构
象有利于核心酶与启动子紧密结合。转录起始后,Rh。亚基释放,离开核心酶,使核心酶的BETA'亚基
的构象发生变化,与DNA模板亲和力下降,在DNA上移动速度加快,使RNA不断加长。
答:硫胺素焦磷酸(TPP)是维生素B1(硫胺素)的辅酶形式,由维生素B1(硫胺素)磷酸化形成。焦
磷酸硫胺素TPP+是涉及糖代谢中段基碳(醛、酮)合成与裂解反应的辅酶,特别是a-酮酸的脱殁基作
用,焦磷酸硫胺素通过N=C活性部位的碳原子与a-碳原子(镖基碳原子)结合而促使陵基裂解释放二氧
化碳.
8.限制酶基因的获得
氨浓度升高导致精氨酸缺乏,阻断了氨转变为尿素的道路。NH4+浓度的升高会加快。。。
当肝功能严重损伤时,尿素合成障碍,血氨浓度升高,即为高氨血症。氨进入脑组织中,与a-酮戊二
酸结合生成谷氨酸,谷氨酸再与氨结合生成谷氨酰胺,因此脑中氨的增加使脑细胞的a-酮戊二酸减少,三
竣酸循环减弱,ATP生成减少,引起大脑功能障碍,严重时可昏迷。
四.论述题
1.(1)丙氨酸在水溶液中是兼性离子的原因。
(2)在等电点时;有多少以不带电荷的中性存在,用方程证明。
(1)根据酸碱质子理论,酸是质子的供体,碱是质子的受体或接纳体。所以,氨基酸可以看成既是酸又
是碱。这样的话,氨基酸在水中会电离,这个反应是个可逆反应,不能完全电离成酸也不能完全更邕成
碱。再考虑到,氨基酸的等电点都在7附近等因素。所以氨基酸的水溶液为兼性离子或偶极离子
2.噂吟碱和芳香族氨基酸侧链降解的异同。
答:首先飘零碱基与芳香族氨基酸的降解第一步都为氨基的消除,其次在反应参与物上,喋吟的底物为
氧气,形成的产物多为过氧化氢,而氨基酸参与的反应物仅仅是一些酮酸作为氨基的载体,而且在氨基
酸的降解中也需要喋口令核昔酸的驱动,这是它们的联系,再最终代谢的产物中氨基酸一般为尿素,氨,
尿酸,对人来说为尿素,这根据物种的不同最终代谢产物不一样,喋吟代谢也是如此,人最终只到达尿
酸就停止了,其他动物可以继续分解代谢到C02NH3等,当然氨基酸的代谢在TCA中也有C02的排出。
对于开环不开环,氨基酸的分解是开环的,喋吟的分解代谢就要看物种
3.胎儿和成人氧饱和曲线已知,回答(1)哪一个对氧的亲和力大(2)解释生理原因(3)BPG对氧亲和力的
影响,二者影响不同的原因。
4.波尔效应pH、C02浓度、BPG、亚基解离的影响
BPG对血红蛋白结合氧的影响:BPG带多个负电荷,能结合在脱氧血红蛋白的中央腔,并降低血红蛋白对氧的
亲和力0
C02与脱氧血红蛋白中未解离的a氨基反应,形成氨基甲酸,参与盐键,稳定脱氧血红蛋白。
高能度的H+促进氧从氧合血红蛋白上解离下来。机理:脱氧血红蛋白某些质子结合位点对质子的亲和性比起
氧合状态时更高,所以可以帮助氧解离。
亚基解离:
4.DNA复制中用放射性H标记核昔酸的原因,优点,方法。。
答:使用放射自显影的技术,选择放射性H3对DNA的脱氧胸背进行标记,然后提取DNA,铺在一张透析膜上,
在暗处用感光乳胶覆盖。在这期间H3衰变释放B粒子,使乳胶曝光生成银粒。优点:银粒黑点的轨迹勾画出
DNA分子的性状,黑点数目代表了H3在DNA分子中的密度,这样就可以观察到DNA染色体复制的全貌。
(1)
5.G彻底降解的底物水平磷酸化,氧化反应
2013
名词解释
1.差向异构体:在立体化学中,含有多个手性碳原子的立体异构体中,只有一个手性碳原子的构型不同,
其余的构型都相同的非对映体叫差向异构体
2.丝氨酸蛋白酶:活性部位含有在催化期间起着亲核体作用的丝氨酸残基的蛋白酶。
3.酶的活性部位:(酶的活性中心?)肽链上的少数氨基酸通过相互靠近和盘曲折叠,形成一个能与底
物结合并催化其形成产物的位于酶蛋白表面的特化的空间区域。
4.双向电泳:是等电聚焦电泳和SDS的组合,即先进行等电聚焦(按照PH分离),然后再进行
SDS(按照分子大小分离),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。
5.糖异生:生物体将多种非糖物质(丙酮酸、乳酸、甘油、生糖氨基酸等)转变为葡萄糖或者糖原的过
程,机体中之后肝和肾能进行糖异生。
6.前手性:如果一个非手性分子含有立体异构的配体或立体异构面,经反应后失去对称性,得到对映异
构体或非对映异构体的手性分子,则这种由非手性转变为手性的特性即为前手性,该分子为前手性分
子,也叫做“潜非对称性”或原手性
7.酮体:在肝脏中,脂肪酸氧化分解的中间产物,乙酰乙酸、B-羟基丁酸、及丙酮,三者统称为酮体。
8.一碳单位:指具有一个碳原子的集团,包括某些氨基酸分解代谢过程中的甲基、亚甲基、甲烯基、甲
焕基、甲酰基等。
9.错配修复:在含有错配碱基的DNA分子中,识别并修复错误的碱基配对的过程。
10.冈崎片段:DNA复制中,后随链由许多断断续续的小片段组成,这些小片段由冈崎发现,所以叫冈崎
片段。
11.氨酰TRNA合成酶:也叫氨酰TRNA连接酶,氨基酸活化酶,是合成氨酰tRNA的酶。20种氨基酸均有
其相应的专一性的氨酰TRNA合成酶,它参与在ATP的存在下使氨基酸活化,并与tRNA的-CCA-OH末
端结合。
二.简答题(每题4分)
1.某种酶纯化后的活力单位比粗提取的活力单位还要高,为什么?
答:可能是因为该酶是一种全酶,由酶蛋白和辅酶组成,辅酶与酶蛋白结合比较松散很容易在纯化的过
程中与酶蛋白分离,从而比粗提取的活力单位高。
2.A蛋白分子量为60KD,用尿素处理后得到30KD的条带,用尿素和疏基乙醇处理后检测到15KD的条带,
分析该蛋白的结构。
答:尿素可以断开蛋白质的氢键,筑基乙醇可以断开二硫键。然后自己随便答。。
答:(胰蛋白酶可以水解R和K竣基端的肽键,竣肽酶A可以切除C端除了K,R,F的氨基酸,竣肽酶B可以
切除C端除了K,R的氨基酸,如果倒数第二位为F,则两种竣肽酶都不能作用。糜蛋白酶可断裂F,W,Y较基
端的肽键。坂口反应:Ro乙醛酸反应:WoPauly反应:H,Y。Millon氏反应:Y。NcBr:M。)所以该六肽的
顺序为-A-V-R-Y-S-R。
4.碑酸能否抑制葡萄糖氧化降解代谢。
答:能。在糖酵解中碎酸盐可以代替磷酸盐,将甘油醛-3-磷酸转换成不稳定的1-碑酸-3-磷酸甘油酸,自动
水解成3-磷酸甘油酸,不释放ATP,解除了甘油醛-3-磷酸氧化和磷酸化的偶联,但糖酵解继续进行。种酸盐
还可以像其他神化合物一样,抑制丙酮酸脱氢酶(与辅基硫辛酰胺结合)阻止丙酮酸变成乙酰辅酶A,同理
也抑制a-酮戊二酸脱氢酶,阻止琥珀酰辅酶A的生成,从而抑制TCA循环。
5.比较丙酮酸脱氢酶系和a-酮戊二酸脱氢酶系反应异同。
答:相同点:(1)两种酶系的每步反应机制一致,都需要TPP、硫辛酰胺、COA、FAD、NAD+、Mg2+6种辅
助因子。
(2)酶催化的产物都是高能硫酯化合物
(3)都受产物的抑制,也同样受高能荷的抑制。
不同点:(1)丙酮酸脱氢酶复合体中的E1受磷酸化和去磷酸化的调节,而酮戊二酸脱氢酶不受磷酸化和去
磷酸化的调节
6.氨基酸降解的主要步骤,利用氨基酸降解产能存在什么问题?
答:氨基酸的降解一般分三步:(1)脱氨(脱氨基),这里脱下来的氨基或转化为氨,或转化为天冬氨酸或
谷氨酸的氨基。(2)氨与天冬氨酸的氮原子相结合,成为尿素并被排放。(3)氨基酸的碳骨架(由于脱氨
基产生的a-酮酸)转化为一般的代谢中间体。
问题:过多的降解氨基酸可以产生过多的氨,在脑部线粒体中a-酮戊二酸与氨合成谷氨酸,消耗大量的a-
酮戊二酸,同时还会消耗大量的丙酮酸来转运氨生成丙酮酸。这就可能导致TCA循环失速和高血氨症。
7.说出下列情况下Tm值曲线的变化(1)降低溶液离子浓度(2)加入少量乙醇
答:(1)溶液离子强度增加,Tm值变大(2)乙醇可以促进核酸变性,Tm值变小
8.大肠杆菌中合成的DNA是一段一段的,但是尿口密咤糖基化酶缺陷的大肠杆菌中只有一半是一段一段的,为
什么?
答案:原因是细胞内有低浓度的dUTP,DNA聚合酣对其分辨率不高,产生的服理院碱基会迅速的被眼毯
院-N■糖昔的切除,接着进行核汗酸切除修复,这是暂时导致在DNA上产生一个断裂.在DNA聚合酣1
和DNAligase完成修复之前分高到的DKA片段是一段一段的.在尿啜碇N-糖基化酣缺陷的大肠杆曲.突变
体中只有约一半的新合成的DNA是一段一段的原因是其缺失这种校正功能。
9.在T7噬菌体的mRNA转录体中,有一段5'-ACGAGGUAA-3'中的G全部突变成A,会有什么后果?
答:G全变为A,则为ACAAAAUAA,这是一段无意义的密码子,没有对应的转录产物。
答:结合蛋白质一级二级三级结构之间的关系,及结构与功能的关系讨论。。。。
四.论述题(每题8分)
1.设计一个实验检测肽链中的二硫键,肽链中有三个Cys。
答:对角线电泳
(1)用胃蛋白酶酶切肽链(2)在酸性PH的条件下进行第一向电泳,酶解产物肽段按照其大小及电荷不同而
分离。(3)将滤纸暴露在过甲酸蒸汽中,使二硫键氧化断裂,并进一步氧化成磺酸基,被氧化的半胱氨酸称
为磺基丙氨酸。(4)将滤纸旋转90度,在与第一向完全相同的条件下进行第二向电泳。无二硫键的肽
链不受酸的作用而在对角线电泳中的迁移率相等,将位于一条对角线上。含有二硫键的肽链由于第二向电泳
时被酸氧化,肽段大小和负电荷发生变化而使迁移率不同,将偏离对角线。肽斑可通过背三酮线则来确定。
2.给出了一个血红蛋白和氧的图像,侧标是英文的。标准情况下图像是第三条,在下列情况下,图像是哪一
条。
左边有两条右边有一条
BPG浓度升高C02浓度升高PH降低四级结构遭到破坏
答:BPG对血红蛋白结合氧的影响:BPG带多个负电荷,能结合在脱氧血红蛋白的中央腔,并降低血红蛋白对
氧的亲和力。
C02与脱氧血红蛋白中未解离的a氨基反应,形成氨基甲酸,参与盐键,稳定脱氧血红蛋白。
高能度的H+促进氧从氧合血红蛋白上解离下来。机理:脱氧血红蛋白某些质子结合位点对质子的亲和性比起
氧合状态时更高,所以可以帮助氧解离。
HbA的题,给了一个材料,
(1)HbA和HbF哪个与氧的亲和力更高
(2)请解释一下为什么胎儿和孕妇有不同的血红蛋白
(3)从BPG的角度解释一下这种情况可能是怎么造成的?
答:(1)HbF与氧结合能力更高
(2)为什么!!!
(3)成年人血红蛋白的四个肽链亚基为2a28,红细胞无氧代谢可产生2,3-BPG,正好可以和两个B之间
的空隙中的氨基酸残基形成一定的化学键,使两个亚基收到约束,构型趋于稳定,降低了血红蛋白对氧的亲
和能力。而胎儿的血红蛋白为2a2丫,与BPG结合能力较弱,所以胎儿的血红蛋白受BPG的影响比较小。
4.噂吟碱基和芳香族氨基酸侧链生物降解的共同点
答:首先飘零碱基与芳香族氨基酸的降解第一步都为氨基的消除,其次在反应参与物上,喋吟的底物为
氧气,形成的产物多为过氧化氢,而氨基酸参与的反应物仅仅是一些酮酸作为氨基的载体,而且在氨基
酸的降解中也需要喋吟核甘酸的驱动,这是它们的联系,再最终代谢的产物中氨基酸一般为尿素,氨,
尿酸,对人来说为尿素,这更具物种的不同最终代谢产物不一样,喋吟代谢也是如此,人最终只到达尿
酸就停止了,其他动物可以继续分解代谢到C02NH3等,当然氨基酸的代谢在TCA中也有C02的排出。
对于开环不开环,氨基酸的分解是开环的,喋吟的分解代谢就要看物种
5.三大类营养物质共同的好氧代谢途径
答:TAC是三大营养物质糖,脂肪,氨基酸有氧分解的最终代谢通路,同时也是这三大营养素相互转变的联系
枢纽。糖类物质可以通过降解进入糖酵解分解为丙酮酸,再变为乙酰辅醒A与草酰乙酸结合成柠檬酸进入
TACo氨基酸分解生成的产物也均是TAC中的中间代谢产物,如a-酮戊二酸,琥珀酰辅酶A,延胡索酸,草
酰乙酸等,氨基酸通过这些中间代谢产物进入TAC,进而被完全氧化。脂肪可以通过降解为琥珀酰辅酶A和
乙酰辅酶A进入TACo
在PCR反应中,DNA的合成需要四种底物,即四种dNTP,DNA的基本结构是核昔酸,所有a为P标记可以保证
放射性的P32在合成DNA时掺入DNA中,这样才能检测到真实的掺入DNA的dNTP的量。
(2)如果加的时候漏加了一种dNTP会有什么后果?
不能合成完整的序列。
(3)如果不是在a位P上标记而是在其它位点上标记,有什么后果?
不能正确的标示探针,使实验准确度降低。
7.能够与tRNA相互作用的组分,写出五种以上。
答:游离氨基酸,mRNA密码子,氨酰碱基核甘酸,rRNA»氨酰tRNA合成酶,核糖体小亚基等
2012
一、名词解释
1.核小体:
2.结构域:多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的部分折叠
区,它是相对独立的紧密球状实体,是球状蛋白质的独立折叠单位。大题可以分为四
类:全a-结构,a,B-结构,全结构,不规则小蛋白结构
3.构象:指一个分子中,不改变共价键结构,仅单键周围的原子旋转所产生的原子
的空间排布。一种构象改变为另一种构象时,不要求共价键的断裂和重新形成。构象
改变不会改变分子的光学活性。
4.严紧反应:严紧反应是指当细菌在缺乏合成蛋白质所必须的氨基酸时,停止合
成核糖体RNA的反应。
5.多核糖体:把细胞放在极其温和的条件下处理,就能得到几个到几十个核糖体
在一条mRNA上结合起来的形态。在进行蛋白质的生物合成时,推测核糖体在mRNA上
的起点可能是有顺序地进行结合,形成多核糖体,并由各核糖体合成的多肽链逐渐延
长。
6.操纵子:是原核生物基因表达和调控的一完整单元,其中包括结构基因、调节
基因、操纵基因(操纵子)、和启动子
三、简答
DNA复制(细胞内复制)转录耕译
DNA复制是指DNAJS梃在细胞分裂DNA分子首先解开礴以DNA的一条铀以mRNA为根标,以tRNA为运载工具.
以前进行的夏制过程,复制的结果是
领念一条双摄变成两条一样的双黄(如果为模板按烫碱基互上朦对原则合成RNA合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过
复制过程正常的话3每条双钻都与
的过程程
原来的双储一样
场所细胞核、线粒体、叶绿体如胞核、线粒体、叶绿体细胞质《核糖体)
原料4种游离脱赛核首酸4种游离核标核甘酸20林浪离氮星豌
模根DNA分子中R涧条偿DNA中的一蝴mANA
性留读韵、ONA聚合策挈DNA连接曲茉流韵、RNA聚合酹等|不要蟠基酰0NA台成场、菱,肽的等
能量ATPATPATP
1、解旋:在解旋酶作用下,利用ATP暮1、解旋:在解旋酹作用下,利用ATP释mRNA从核孔进入细胞质,与核糖体结
放的能量解开双蝇旋;2、在DNA聚合放的能臬解开双蛭京;2、以留开的一条合,从起始密码子(AUG)开蛤翻误。
酶的作用下,按照碱基互?对原则,DNA树为模板,按碱邕互补配对原则,tRNA一端携常氨邕酸进入核赣体,另一
把游离的&袁核甘皎连报到模板便上,游离的核糖核甘也与脱氧核甘南配对,3、造的反密日子与mRNA上的密码子配
并使貌氯核甘酸之间过9酸二图it连核我核营戚间通过h酸二段ft连接成对,两氯基锻翊,成就跳。核概体维埃
接;3、君著梗板糖不If延伸,最终股成RNA(mRNA,tRNA,rRNA)台mRNA移动,每次移动一个密码子,
两个一模一样的DMA分子。至终止密码结束,肽钻肥成
模板复制后,模板馔与锚形成的子错形成双转录后,模板链与车模板梃重铁形成双分儒成核糖核甘酸
去向螺旋结构她铮构
特点1、边第旋边复制;2、半保智复制边解度边转录一条mRNA可与多个核糖体结合翻译成
多条相同的多侬
产物形成两个完整的DNA分子三种单ti“NAW白质(多瓶便)
1.二硫键的作用
答:二硫键是通过两个半胱氨酸疏基的氧化形成的共价键,在稳定某些蛋白质的三维
结构上起着重要的作用。
2.酶在有底物存在时比没有底物存在时更稳定,解释原因
答:酶中存在与底物结合及催化底物进行反应的活性中心,活性中心一般位于结构域
中、亚基之间的裂缝中、或者酶分子表面的凹陷处,当底物与酶分子的活性中心结
合,诱导酶的结构发生改变,活性中心不再暴露,所以更加稳定。
3.氨酰tRNA合成酶至少有几个识别位点
答:两个,既能识别相应的氨基酸,又能识别与此氨基酸想对应的1个或多个tRNA
分子。
四、论述
1.一个学生测定一个蛋白质的一级结构,发现他测定的序列与已知测出的序
列不同,他得出结论该蛋白的一个氨基酸有天冬氨酸突变为精氨酸,如果你
是他的导师,你将怎么评价(后给出各个氨基酸所对应的密码子)
答:我认为他的结论是不合理的。天冬氨酸密码子:GAU,GAC»精氨酸密码子:
CGN.AGA,AGGO密码子具有简并性和变偶性,但是变偶性通常发生在第三位
密码子,而氨基酸的极性通常是由第二位决定。第二位密码子是A或者G,
其氨基酸常常是有极性的亲水的。虽然天冬氨酸和精氨酸都是亲水的,但是
二者的酸碱性相反,性质有较大差异,从而会严重的影响蛋白质的活性,突
变的可能性很小。建议这位同学重复几次测序,得到比较准确的序列再进行
合理的分析。
2.题中给出两个图是不同情况下线粒体的耗氧量和产生的ATP量,让解释(只要
认识寡霉素以及一系列与呼吸作用有关的英文就没有问题了)
3.猪流感病毒HRN1是反转录病毒,试想出实验方案以阻止病毒在细胞内复制而不影
响细胞内DNA正常复制
答:提取该病毒的遗传信息,找出其反转录酶编码的片段,制作其反义RNA,利用基
因干扰的技术抑制正常细胞内病毒产生反转录酶。或者直接利用合适的反转录酶的抑
制剂对反转录酶进行直接的干扰。从而使病毒无法在正常细胞内复制。
4.一个同学想研究NDA复制过程用放射性磷来标记底物,他标记的磷是第三位的
磷,问是否能够达到目的
答:不能,在DNA复制过程中虽然需要四种NTP作为底物,但是实际在掺入DNA链
时,每个NTP都会脱下一个焦磷酸,以NMP的形式进入DNA链,用第三位的磷标记的
NPT来研究DNA复制,放射性磷无法掺入DNA,所以在实验中无法观察。
山东大学2011研究生入学考试
生物化学真题
一•、名词解释
别构酶:酶分子的非催化部位与某些化合物可逆的非共价结合后发生构想的改变,进而改变酶活性状态,称
为酶的别构调节,具有这种调节作用的酶,称为别构酶。413
差向异构酶:差向异构酶,又称表异构酶,变旋酶。一类催化单糖分子(含2个以上不对称碳原子)中某一个
不对称碳原子发生构型变化的酶。例如醛糖-1-差向异构酶催化a-D-葡萄糖与B-D-葡萄糖之间的互变。
丝氨酸蛋白酶:胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶是一类蛋白水解酶,因为这些酶的活性中心的特异
丝氨酸残基起关键性的作用,所以又称为丝氨酸蛋白酶。183,405
反竞争性抑制:可逆的抑制作用的一种,酶只有与底物结合后,才能与抑制剂结合,这种抑制类型称为反竞
争性抑制。369
:合成酶:将伴随腺昔三磷酸(ATP)的分解而催化合成反应的酶称为合成酶
合酶是指催化不与ATP等核甘三磷酸分解相伴的合成反应的酶。
凝胶过滤层析:凝胶过滤,即凝胶过滤层析,也称分子排阻层析或凝胶渗透层析,这是一种根据分子大小
分离蛋白质混合物的最有效方法之一。303
乙醛酸循环:乙醛酸途径也称为乙醛酸循环,名称的来源是因为在这个途径中经过一系列反应最终产生乙醛
酸,这一途径不存在与动物,只存在于植物和微生物中,主要内容实际是通过乙醛酸途径使乙酰-CoA转变为
草酰乙酸从而进入柠檬酸循环。159下
Q循环:是指在线粒体内膜中电子传递链上QH2分别传递一个电子到细胞色素中,即共使2个细胞色素得到
电子,从而被氧化。本质上是双电子携带体的泛醍(CoQ)和单电子携带体(cytb562,cytb566,cl和c)之间完成
的一系列电子转移反应称Q循环。
EMP:EMP途径,又称糖酵解或己糖二磷酸途径,是细胞将葡萄糖转化为国I逾的代谢过程,总反应为:
C6H1206+2NAD++2Pi+2ADP-2cH3coe00H(丙酮酸)+2NADH+2H++2ATP+2H20。EMP途径是指在无氧条件下,葡
萄糖被分解成丙酮酸,同时释放出少量ATP的过程。大致可分为两个阶段。第一阶段只是生成两分子的F
要中间代谢产物:3-磷酸-甘油醛。第二阶段发生氧化还原反应,释放能量合成ATP,同时形成两分子的丙酮
酸。
3氧化:3氧化(3-oxidation)脂肪酸的3-碳原子先被氧化成皴基,再进一步氧化成3-皴基,形成a、
3-二竣脂肪酸,以后可以在两端进行a-氧化而分解。
半不连续复制:半不连续复制是指DNA复制时,前导链上DNA的合成是连续的,后随链上是不连续的,故称
为半不连续复制。
冈崎片段:冈崎片段,相对比较短的DNA链(大约1000核甘酸残基),是在DNA的滞后链的不连续合成期
间生成的片段,这是ReijiOkazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核甘酸前体观察到的。
阻遏蛋白:阻遏蛋白(repressorprotein)是基于某种调节基因所制成的一种控制蛋白质,在原核生物中
具有抑制特定基因(群)产生特征蛋白质的作用。由于它能识别特定的操纵基因(即操纵子是阻遏蛋白的结
合位点),当操纵序列结合阻遏蛋白时会阻碍RNA聚合酶与启动序列的结合,或使RNA聚合酶不能沿DNA向
前移动,阻遏转录,介导负性调节,因而可抑制与这个操纵基因相联系的基因群,也就是操纵子的mRNA合成。
562下
外显子:真核生物的基因通常都是断裂基因,保留在成熟RNA中的序列称为外显子。507下
中心法则:它指出遗传信息不能由蛋白质转移到蛋白质或核酸之中。内容:①从DNA流向DNA(DNA自我复
制);②从DNA流向RNA,进而流向蛋白质(转录和翻译);③从RNA流向RNA(RNA自我复制);④从RNA流
向DNA(逆转录)注:其中前两条是中心法则的主要体现,后两条是中心法则的完善和补充.471
判断
1.透明质酸
2.糖甘的结构组成
3.胶原蛋白的结构
4.血红蛋白的协同效应
5.蛋白质的Mr与消光系数的关系
30不记得了
二、简答
1.羊毛由热水洗缩水,丝绸不缩水的原因
2.a螺旋参数计算
二级结构,肽链主链绕假想的中心轴盘绕成螺旋状,一般都是右手螺旋结构,螺旋是靠链内氢键维持的。每
个氨基酸残基(第n个)的谈基与多肽链C端方向的第4个残基(第4+n个)的酰胺氮形成氢键。)
3.HMP的意义
答:(HexoseMonophophatePathway)戊糖磷酸途径,意义:HMP是糖代谢的第二条重要途径,它是葡
萄糖分解的另外一种机制,这种途径在细胞溶胶内进行,广泛存在于动植物细胞内。
(1)HMP途径是细胞产生还原力(NADPH)的主要途径
(2)HMP途径是细胞内不同结构糖分子的重要来源,并为各种单糖的相互转变提供条件
4.内含子有无功能,其意义是什么
答:内含子在转录后加工过程中被删除,并不表现出明显的作用。但是内含子删除之后有一个选择性拼
接的过程,其意义为它是基因表达调节的一个重要环节,并还能成为产生新的基因和新的蛋白质的基础。这
是一种十分有效的进化方式,当突变产生新的拼接点时,旧的拼接点仍然存在,如果新的拼接产物无用,那
新拼接点就会被逐渐淘汰,如果新拼接产物有用,则通过选择保留。
5.葡萄糖生成的条件
答:
6.别喋吟醇治疗痛风的原理
答:别喋吟醇的结构与次黄喋吟相似,对黄喋吟氧化酶有很强的抑制作用。痛风是由于尿酸在体内过量
积累而引起的。别喋吟醇可被黄喋吟氧化酶氧化成别黄喋吟,与酶活性中心的Mo牢固结合,成为酶的
灭活物,属于一种自杀作用物。所以经别喋吟醇治疗的患者排泄黄喋吟和次黄喋吟来代替尿酸,从而达
到治疗痛风的效果。
7.氨基酸脱氨基的几种方式
(1)氧化脱氨作用:体内氨基酸代谢脱氨的主要方式,可通过氨基酸氧化酶或转氨酶与谷氨酸脱氢酶
的联合脱氨作用完成。产物是与氨基酸相应的a酮酸。
(2)非氧化脱氨作用:极少数的氨基酸,如丝氨酸及组氨酸的脱氨基是非氧化的
(3)联合脱氨作用:次黄喋吟核甘酸与天冬氨酸作用形成中间产物腺甘酸代琥珀酸
(adenylsuccinate),后者在裂合酶的作用下,分裂成腺喋吟核甘酸和延胡索酸,腺嗯吟核甘
酸(腺昔酸)水解后即产生游离氨和次黄喋吟核甘酸。
8.TCA调节酶
答:(1)柠檬酸合酶:限速酶,受到ATP,NADH,琥珀酰-C0A抑制,受乙酰辅酶A、草酰乙酸激活
(2)异柠檬酸脱氢酶:受NADH,ATP抑制,受ADP激活,当ADP少时,该酶失活
(3)a-酮戊二酸脱氢酶:受NADH和琥珀酰COA抑制
9.丙酮酸脱氢酶复合体如何起作用
答:丙酮酸脱氢复合酶系是由三部分组成:E1丙酮酸脱氢酶组分(辅基TPP),E2二氢硫辛酰转乙酰基
酶(辅基硫辛酰胺),E3二氢硫辛酸(酰胺)脱氢酶(辅基FAD)。首先在E1的作用下丙酮酸发生脱
皴反应,把乙酰基转移到E2上,E1恢复原样,可以继续接受丙酮酸。然后E2催化将乙酰基转移到
COA-SH分子上,形成乙酰辅酶A,E2由氧化型变为还原型。还原型E2在E3的催化下,二硫键发生交换,
E2被氧化,E3变为还原型,还原型E3二硫键的再氧化由该酶结合的辅基FAD接受-SH上的氢原子,形
成FADH2,接着又将氢原子转移给NAD+,于是恢复为氧化型,E3变为氧化型。该酶系又可继续起作用。
10.脂肪酸氧化和载体
答:P氧化:(1)肪酸的活化一一脂酰辅酶A的生成:在液泡中脂酰辅酶A合酶(存在于内质网及线
粒体外膜上)的作用下,由ATP提供能量,在COASH存在条件下,可将脂肪酸活化生成脂酰辅酶A
(2)脂酰辅酶A进入线粒体:在液泡中生成的脂酰辅酶A借助线粒体膜外侧的肉碱脂酰转移酶1和内侧
的肉碱脂酰转移酶2的作用,由肉碱将脂酰辅酶A携带至线粒体内。此步骤为脂肪酸B氧化的限速步骤,肉
碱脂酰转移酶1是B氧化的限速酶。
(3)B氧化的反应过程:B氧化在脂酰辅酶A的B碳原子上进行,它包括脱氢,加水,再脱氢和硫解4
步反应,使脂酰辅酶A生成1分子乙酰辅酶A和1分子比原来少了2个碳原子的脂酰辅酶A,后者可继续进
行B氧化反应,可将偶数碳脂酰辅酶A分解成乙酰辅酶A,FADII,和NADH+H。奇数碳最后得到丙酰辅酶A或进
入糖异生,或转化为乙酰辅酶A。
a氧化和w氧化:a氧化(不需活化,直接氧化游离脂肪酸),每次氧化从脂肪酸竣基端失去一个C原
子,a氧化对于降解支链脂肪酸、奇数碳脂肪酸和过分长链脂肪酸有重要意义。
W氧化(w端的甲基羟基化,氧化成醛,再氧化成酸):动物体内12c以下的脂肪酸可通过w氧化途径,
产生二竣酸。在脂肪烧的生物降解中有种农药作用。泄漏的石油可被细菌w氧化,把燃转变为脂肪酸,然后
经B氧化降解。
载体:
n.细胞内核酸的类型、结构、功能
(1)DNA,结构:螺轴,表面有大小沟。
功能:其基本功能是作为生物遗传信息复制的魔斑和基因转录的魔斑,是生命遗传繁殖的物质基
础和个体生命活动的基础。
(2)RNA,结构:一级结构一般以单链存在,在局部可形成双螺旋结构,成茎环样或发夹结构。在
RNA中还有一些稀有碱基。RNA主要包括:mRNA:真核为单顺反子,5端帽子,3端PolyA尾巴,
原核为多顺反子,由先导区、插入序列、翻译区和末端序列组成,没有5端帽子和3端polyAo
tRNA:通常由73~93个核甘酸构成,含有较多的稀有碱基,3末端皆为•••CpCpA-OH,用来接
受活化的氨基酸,5末端大多为pG・••或pC・••。三叶草型,“三环,一柄”,二氢尿喘
咤环,反密码子环,T$C环,氨基酸臂。三级结构为倒L型,反密码子环和氨基酸臂分别位于L
的两端。Rrna
功能:RNA主要在遗传信息的传递,蛋白质的形成起作用,偶尔也作为生物体的遗传物质。
12.DNA复制方向、原料、引物作用、类型
复制方向:新生链都是由5'到3'方向。原料:四种脱氧核甘酸。引物作用:多种复制因子蛋白质在单链
DNA结合蛋白的作用下组合成引发前体,引发前体进一步与引物酶结合成引发体,引发体可以在DNA单链上
移动,识别复制起始位点,合成RNA引物。类型:D环复制,多复制叉复制,滚环复制,0型复制,直线双
向复制。
13.DNA双螺旋的依据,为什么适合做遗传物质
(1)DNA双螺旋保证了遗传信息的稳定,如果一条链发生突变,可以按照另一条链为模板进行修复,
并且携带遗传信息的碱基在双螺旋的内部堆积,比较稳定。
(2)DNA比RNA更稳定。从结构来看由于脱氧核糖2号碳上没有游离的羟基,不会像RNA一样在碱性
条件下不稳定发生断链反应。
(3)DNA的碱基ATGC相比RNA的AUGC有更好的特异性,因为U和C结构类似,易发生C到U的突变,
故用T代替,不易发生突变。
(4)DNA分子量大,适合储存遗传信息。
(5)相对稳定性,能自我复制,能控制蛋白质合成,能产生可遗传变异
(前三点都是说明DNA的相对稳定性。。。)
三、论述与计算
1.经典填表
2.组至白与DNA结合紧密的原因,蛋白质的四级结构
组蛋白是真核生物染色体的基本结构蛋白,是一类小分子碱性蛋白质,有五种类型:Hl、H2A、H2B、H3、
H4,它们富含带正电荷的碱性氨基酸,能够同DNA中带负电荷的磷酸基团相互作用。
四级结构:亚基与亚基之间的相互作用为四级结构。
3.EMP的1\3\10步反应的共性,氧化反应?
答:(1)葡萄糖+ATP己糖激酶_6-磷酸葡萄糖+ADP(3)6-磷酸果糖_磷酸果糖激酶1,6-二磷酸果
糖
(10)烯醇式磷酸丙酮酸+ADP.丙酮酸激酶_丙酮酸+ATP
影响EMP途径的调控位点
有三个,均为单向反应点:
1:己糖激酶调控位点,激活剂:ATP,抑制剂:G-6-P和ADP。
2:磷酸果糖激酶(限速酶)调控位点,激活剂:ADP,AMP,F-1,6-P,抑制剂:ATP,柠檬酸,NADH,
3:丙酮酸激酶调控位点,激活剂:F-1.6-P,Alu,抑制剂:ATP。
此三个位点在糖异生时被绕过。
4.等电点的计算题
5.噂吟降解与芳香族氨基酸降解的共性
6.PCR实验的原理,各物质的作用,有无引物的区别,退火温度高或低的后果(PCR综述)
PCR即聚合酶链式反应,是体外进行核酸扩增的一种技术。PCR是以待扩增的DNA分子为模板,以一对分
别与模板5'-端和3'-端互补的寡核甘酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模
板链延伸直至完成新的DNA合成,达到使目的DNA片段扩增的效果。
在核酸的体外扩增时,只有引物存在时DNA才能复制扩增。退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素。
引物与模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度。引物长度越短,引物中G+C的含
量越低,所需的退火温度越低。虽然降低退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,
导致非特异性扩增上升。相反,提高退火温度虽然可以提高反应的特异性,但会引起扩增效率下降,甚至无
扩增产物出现。引物的退火温度可以通过Tm=4(G+C)+2(A+T)公式组略估算,一般在算出的Tm值上减去5摄
氏度极为较合适反应设计退火温度。
7.用3H标记DNA以显示其合成过程,变化。32P标记会怎样?
山东大学2010研究生入学考试
生物化学真题
一、名词解释
前手性:如果一个非手性分子含有立体异位的配体(原子或基团)或立体异位面,经反应(如取代)后失去
对称性,得到对映异构体或非对映异构体的手性分子,则这种能由非手性转变为手性的特性即为前手性,该
分子为前手性分子。
逆转录酶:反转录酶(Reversetranscripatase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核昔酸合成互补DNA
(cDNA)的酶
克立氏循环在激烈运动时,,糖醛解的速度超过通过呼吸链再形成NAD+的速度,这时肌肉中酵解形成的国酮
酸由乳酸脱氢酶转变为乳酸,使NAD+再生,使酵解过程继续进行,肌肉中的乳酸扩散到血液并随着血液进入
肝脏细胞,在肝细胞内通过葡萄糖异生途径转变为葡萄糖,又回到血液随血液供应肌肉和脑对葡萄糖的需要。
这个循环过程称为可立氏循环。158下
乙醛酸循环:乙醛酸循,在异柠檬酸裂解酶的催化下,异柠檬酸被直接分解为乙醛酸,乙醛酸又在乙酰辅
酶A参与下,由苹果酸合成酶催化生成苹果酸,苹果酸再氧化脱氢生成草酰乙酸的过程。
糖异生:糖异生(英语:Gluconeogenesis)指的是非碳水化合物(乳酸、丙酮酸、甘油、生糖氨基酸等)
转变为葡萄糖或糖原的过程。糖异生保证了机体的血糖水平处于正常水平。糖异生的主要器官是肝。肾在正
常情况下糖异生能力只有肝的十分之一,但长期饥饿时肾糖异生能力可大为增强。
酶的活性部位:酶分子中氨基酸残基的侧链有不同的化学组成。其中一些与酶的活性密切相关的化学基团称
作酶的必需基团,酶分子中直接与底物结合,并和酶催化作用直接有关的区域叫酶的活性中心(active
center)或活性部位
切除修复:在一系列酶的作用下,将DNA分子中受损伤部分切除掉,并以完整的那一条链为模板,合成出
切去的部分,然后使DNA恢复正常结构的过程。429下
魔斑:PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为
魔斑。567下
二、简答
1.羊毛用热水洗收缩和丝绸热水洗不收缩的原因
2.ATP高能磷酸键的结构基础
ATP的两个高能磷酸键为酸肝键,其共振稳定性小于第一个磷酯键,再加上相邻磷酸基团之间相邻的负
电荷相互排斥,促使ATP的磷酸基团易于水解,而且ATP水解的产物都是共振化合物,具有最低能量的
构想形式,使得ATP水解可以释放出大量的自由能。总体来说或有两方面原因:一是导致反应物不稳定
的因素,二是导致产物稳定的因素。具体来说,主要决定于分子内的静电斥力和形成产物的共振稳定化
作用。
3.Hb突变后的影响
答:血红蛋白的突变是由基因突变引起的,是血红蛋白进化的基础。突变中有一些是无害的,叫中性突
变,可能具有今天尚未被认识的优点,有朝一日将在群体中占优势。还有一些突变是有害的,将产生遗传病。
Hb有害的突变分为两类:(1)血红蛋白病:a或B链发生变化,如镰刀状细胞贫血病(2)地中海贫血:由
于缺少a或B链,如a-和地中海贫血病
(1)镰刀型细胞贫血病是由于Hb分子B链中第6位氨基酸残基Glu变为Vai,变为HbS,使红细
胞多呈镰刀状或新月状,HbS易聚集成纤维状沉淀(谷氨酸的极性带负点基团变为缴氨酸的非
极性基团,根据疏水作用聚集)。(在体外用氟酸钾处理镰刀状贫血病的红细胞,可以防止
它在去氧状态下形成镰刀状。)(还有其他类型的血红蛋白病:a,突变发生在血红蛋白分子
表面,造成血红蛋白溶解度下降。b,突变发生在血红素基附近,影响血红素与氧结合或影响
亚基与血红素结合。C,突变发生在特异部位,造成空间位阻,影响正确的三级结构,从而影
响四级结构。D,突变发生在亚基界面上,司机结构中亚基的相互作用是血红蛋白氧合的别构
调节所必需的,降低对氧的亲和力。)
(2)地中海贫血由于a,缺失一个或多个编码血红蛋白链的基因;b,所有基因存在,但一个或多
个基因发生无义突变,结果产生缩短了的蛋白链或发生移码突变,导致链的氨基酸序列不正
常;c,所有基因存在,但突变发生在编码区之外,导致转录被阻断或前体RNA的不正确加工;
这些原因导致a和。链的缺失或功能错误。分为a-和B-地中海贫血病,都具有严重的症状,
一般导致胎儿死亡或未到成熟就夭折。
4.Hb分开后不具协同性的原因
答:Hb的a链和0链在三维结构上与Mb相似,功能也相似。但Hb是一个四聚体,结构比Mb复杂的多,
所以Hb具有两种主要构象态:T态(紧张态)和R态(松弛态)。氧对R态的亲和力明显高于T态,并
且氧的结合更稳定了R态,缺氧时T态更加稳定。氧与一个T态的Hb结合将引发构象变为R态,更有
利于氧的结合。故具有别构效应,属于正协同性同促效应。而分开后的Hb不存在这两种不同的构象态,
所以不具有协同性。
5.磷脂合成后的共性
答:磷脂包括:甘油磷脂(磷脂酰胆碱(卵磷脂)、磷脂酰乙醇胺(脑磷脂)、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、二
磷脂酰甘油(心磷酯)及磷脂酰肌醇等),鞘磷脂(含有鞘氨醇的磷脂)。
共性:
(磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇的合成全部反生在内质网的细胞溶胶面和高尔基
体膜上,与之不同,磷脂酰甘油和二磷脂酰甘油的合成则大部分发生在线粒体)
6.生物大分子代谢的三个阶段
答:1)由养物的大分子分解为较小的分子,例如蛋白质被降解为氨基酸,多糖被降解为单糖,脂肪被
降解为甘油和脂肪酸等,无ATP的产生。2)由各种小分子进一步转化为少数几种共同物质。例如转变
为乙酰辅酶A,只有少量ATP形成。3)由柠檬酸循环和氧化磷酸化两个共同代谢途径彻底氧化,产生大
量的ATPo
7.GTP\ATP\UTP参与生物合成概述
答:GTP,ATP,UTP,CTP为核酸的基本组成成分,都可以为生物体提供能量,其中ATP主要提供能量,
其余三个较少见。
UTP参与半孚蹒的代谢,与半孚塌结合再经过异构化形成UDP葡萄糖。在乳盘的合成代谢中,半乳糖-1-磷酸可
与UTP形成UDP-半乳糖,进而与葡萄糖连接为乳糖。在糖睨的合成代谢中,UTP与葡萄糖-1-磷酸形成UDP-葡
萄糖,后者在糖原合酶的作用下延伸糖原。
ATP主要在生物合成中提供能量,推动反应进行。
GTP是三嗜酸循环中琥珀酸辅酶A转变为琥珀酸过程中的能量载体,它可以和ATP相互转换。
CTP可参与甘油磷脂(glycerophospholipids)的合成,或是蛋白质的糖基化(glycosylation)»
8.考查逆转录酶
逆转录酶:依赖RNA的DNA聚合酶,能催化以单链RNA为模板合成双链DNA的反应。具有三种酶活性:1)
RNA指导DNA合成反应;2)RNA的水解反应;3)DNA指导的DNA聚合反应。
逆转录合成的方向:5'端至3'端进行。
9.计算Keq
10.分子生物学的中心法则
内容:①从DNA流向DNA(DNA自我复制);②从DNA流向RNA,进而流向蛋白质(转录和翻译);③从
RNA流向RNA(RNA自我复制);④从RNA流向DNA(逆转录)注:其中前两条是中心法则的主要体现,后两
条是中心法则的完善和
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