第6章　临床输血程序课件

第六章临床输血程序2学习目标：1.掌握血液入库、核对、贮存、交叉配血等检查原理、方法及质量控制。2.熟悉血液发放、领取、输注的基本原则。3.了解紧急、大量、特殊输血的审批。3是指无偿献血的血液从血站发出到输入患者体内的整个过程，涉及临床医生、护士和输血科工作人员。流程包括部分1、输血申请流程。2、病人血样采集与送检流程。3、输血传染病标志物检测流程。4、输血相容性检测技术流程。5、血液制品提取与发放流程。6、血液制品输注过程流程。7、输血不良反应与相关性疾病处理流程。45第一节血液预订、核对与贮存科学、合理、及时的预订血液是医疗机构血液库存量的重要保证。合理的血液库存既能保证临床有充足的血液使用，又能最大限度控制血液的过期报废。6一、血液的预订（一）血液预订的内容和注意事项1.血液预订内容：输血科向血站发出供血申请，制订合理的库存量，保证库存血量在周转库存范围内。血液储备比例为A、B、O型各30%，AB型为10%。72.血液预订注意事项（1）医疗机构只能向当地卫生行政部门指定的血站预订血液。（2）保存期在一周内的按周转血液库存量储备，保存期在两周内，按安全血液库存量储备。（3）血库制订应急库存警戒线3.血液预订的方式：电话、传真或网络。8（二）血液预订的管理1.用血计划：是指根据血液库存量和临床用血需求量，医疗机构制订的用血量计划，包括年度用血计划、月用血计划和日用血计划。2.应急血液库存量：是指输血科各类型的血液库存量，只能提供医疗机构向血站发出抢救用血申请至血站送血到达医院之前的最低贮存量。不少于1天常规医疗用血量。93.安全血液库存量：是能保证医疗机构急诊和手术用血的库存量，一般为1-3天常规医疗用血量。4.周转库存量：是在血液供应充沛的前提下，能够提供临床需求的所有血液的库存量。一般为3-7天常规医疗用血量。（二）血液预订的管理105.择期用血量评估：是根据手术备血量、治疗用血量和血液贮存时间等因素进行测算，确定由血站调配的血液数量，平衡医院血液库存的评估方式。6.血液库存预警：为提高血液应急保障能力，保证正常的医疗秩序和医院安全，医疗机构根据血站的预警级别及库存血量，及时向临床用血科室发出预警。（二）血液预订的管理11二、血液入库、核对和贮存（一）血液核对和贮存医疗机构输血科按规定贮存一定量的血液，做好出入库的统计。（二）血液核对与贮存的管理1.血液入库核对：尽快入库核对内容：运输条件、物理外观、血袋封闭及包装是否合格、标签是否标准齐全。2.血液的贮存：红细胞、血浆、冷沉淀、血小板等。3.血液出库：先进先出4.血液的运输：冷链5.贮备设备管理：血库专用设备6.血液资料管理：保存至少10年。12临床输血技术规范第五章血液入库、核对、贮存

第十九条

全血、血液成分入库前要认真核对验收。核对验收内容包括：运输条件、物理外观、血袋封闭及包装是否合格，标签填写是否清楚齐全（供血机构名称及其许可证号、供血者姓名或条型码编号和血型、血液品种、容量、采血日期、血液成分的制备日期及时间，有效期及时间、血袋编号/条形码，储存条件）等。

第二十条

输血科（血库）要认真做好血液出入库、核对、领发的登记，有关资料需保存十年。

第二十一条

按A、B、O、AB

血型将全血、血液成分分别贮存于血库专用冰箱不同层内或不同专用冰箱内，并有明显的标识。13临床输血技术规范

第二十二条

保存温度和保存期如下：品种

保存温度

保存期1.浓缩红细胞（CRC）

4±2℃

ACD：21天

CPD：28天

CPDA：35天2.少白细胞红细胞（LPRC）

4±2℃

与受血者ABO血型相同3.红细胞悬液（CRCs

）

4±2℃

（同CRC）4.洗涤红细胞（WRC）

4±2℃

24小时内输注5.冰冻红细胞（FTRC）

4±2℃

解冻后24小时内输注6.手工分离浓缩血小板（PC-1）

22±2℃

24小时（普通袋）或（轻振荡）5天（专用袋制备）7.机器单采浓缩血小板（PC-2）

（同PC-1）

（同PC—1）14临床输血技术规范8.机器单采浓缩白细胞悬液（GRANs）

22±2℃

24小时内输注9.新鲜液体血浆（FLP）

4±2℃

24小时内输注10.新鲜冰冻血浆（FFP）

-20℃以下

一年11.普通冰冻血浆（FP）

-20℃以下

四年12.冷沉淀（Cryo）

-20℃以下

一年13.全血

4±2℃

（同CRC）14.其他制剂按相应规定执行当贮血冰箱的温度自动控制记录和报警装置发出报警信号时，要立即检查原因，及时解决并记录。1516第二节输血前评估、告知与输血申请一、输血前评估必须有明确的输血指征。评估的原则：在替代方法不能治疗或缓解患者病情，不输血可能危及患者生命或影响预后，然后决定异体输血或自体输血，选择适当的血液成分和输血量。17二、输血前告知（一）输血治疗同意书签署a、经治医师应向病人或其直系亲属说明输注同种异体血的不良反应和经血液传播相关性疾病的可能性，征得病人或其直系亲属的同意，并在《临床输血治疗同意书》上全名签字。b、病人《临床输血治疗同意书》入病历保存。1819二、输血前患者告知2.特殊情况处理无直系亲属与相关人员签字的无自主意识患者的紧急输血，应报医院职能部门或主管领导同意、备案，并记入病历保存。3.遵循知情权应原则：输血自愿20三、输血申请1.输血申请单填写：包括患者一般资料及输血史、妊娠史、实验室检查结果等。2.申请输血医师权限：中级医师申请3.开具经血传染病检测化验单：患者必须检测经血传染病标志物，若急诊则留取标本。输血申请单2122中级以上医师<800ml上级医师800ml~1600ml科主任≥1600ml

申请量

申请权

审核签发权医务科科主任三级用血申请管理2324第三节患者标本的采集、运送和接收一、标本的采集：EDTA真空抗凝管，至少2ml1.确定病人输血后，医护人员持《临床输血申请单》在病床旁核对病人有关信息后，采集血样。双人完成。2、采集病人血样后，采血医护人员必须在《临床输血申请单》上全名签字。3、必须是输血前3天内采集的。

病人血样采集与送检流程在采集血样时必须避免下列情况：1.防止血样溶血，溶血的血样不能使用，必须重新采集血样；2.如病人正在输液，不允许从输液管中抽取血样；3.如病人已用肝素治疗，采出的血样不凝集，可向血样中加入适量的鱼精蛋白对抗；4.如病人需应用右旋醣酐或/和白蛋白或/和脂肪乳剂等药物治疗时，应在输注药物前采集血样备用。2526二、标本的运送由医护人员或经培训专门人员将病人血样与《临床输血申请单》送交输血科（血库）。双方逐项核对。三、标本的接收和处理

供、受者血样于2～6℃保存7天以上，以便追查不良反应（受血者和供体血的标本必须密封或盖紧）。2728第四节输血前实验室检查技术一、患者输血相关传染病病原学标志物检测（一）检测意义传染病感染的辅助诊断、区分责任、减少医疗纠纷的发生、提醒医务人员有针对性地加强自我防护、防止或减少职业感染。（二）检测方法学要求：ELISA、核酸检测29二、输血相容性检测技术目的：使输入的供血者红细胞成分在受血者体内不被破坏，输入的血浆成分不破坏受血者的红细胞，达到供血者和受血者血液相容。内容：1.供血者和受血者ABO血型和Rh血型鉴定2.不规则抗体筛查3.交叉配血试验。二、输血相容性检测技术输注全血、红细胞，浓缩白细胞、手工血小板，应交叉配血机采血小板、血浆、冷沉淀应ABO同型输注（一）ABO血型和RhD血型鉴定3031

（二）交叉配血试验主侧配血试验：采用受血者血清（或血浆）与供血者红细胞进行的相容性试验次侧配血试验：采用供血者血清（或血浆）与受血者红细胞进行的相容性试验最大限度地减少抗体的漏检，防止溶血性输血反应的发生。方法：1.盐水介质交叉配血法2.微柱凝胶介质抗人球蛋白法

3.低离子凝聚胺介质法

1.盐水介质交叉配血法生理盐水做介质，最经典，只能检测IgM类完全抗体。标本：受血者EDTA抗凝静脉血器材：血型血清学专用离心机试剂：生理盐水32操作：1.制备标本：（1）分离血浆（2）洗涤红细胞（3）制备5%红细胞悬液2.标记：主、次侧3.加样4.混匀，离心5.先肉眼观察，再低倍镜观察33（6）任何一侧凝集（或溶血）或两侧均凝集为配血不合，应查明原因。主侧管和次侧管无凝集或溶血表示配血相合。34结果判断：（1）阴性结果：红细胞呈混悬状态（2）阳性结果：凝集或溶血（3）溶血：意义同凝集。引起溶血的抗体有抗A、抗B、抗AB、抗I、抗i等。35质量控制：（1）血标本要求来自3天以内，未经污染或稀释（2）主侧不相合的主要原因：1）ABO定型不正确或血型不配合2）患者血清中存在同种抗体3）患者血清中存在自身抗体4）供者红细胞被抗体致敏5）受者血清存在异常成分，红细胞假凝集或假阳性6）试验系统被污染36质量控制：（3）次侧不相合的主要原因：1）供者血清中存在相应抗体2）供受者血型不相合3）患者红细胞被抗体致敏（4）冷凝集素影响37

2.抗人球蛋白检测卡—交叉配血试验操作步骤：1）将准备好的检测卡做好标记；

2）将供血者1%红细胞悬液与受血者血清各50µl先后加入主侧管中；

受血者1血清50µl受血者2血清50µl受血者3血清50µl供血者1红细胞50µl供血者2红细胞50µl供血者3红细胞50µl3）将受血者1%红细胞悬液与供血者血清各50µl先后加入次侧管中；4）37℃孵育15分钟；供血者1血清50µl供血者2血清50µl供血者3血清50µl受血者1红细胞50µl受血者2红细胞50µl受血者3红细胞50µl395）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；6）肉眼观察结果。结果：1、3不配合；2配合4041微柱凝胶介质抗人球蛋白法质量控制：1.实验前以1000r/min离心1min，避免胶质不均匀或气泡等。2.本法可一次性检出IgM和IgG型抗体，不需要再做盐水介质法。3.不能使用溶血、细菌污染和脂血标本。3.低离子聚凝胺介质法

聚凝胺实验技术是一种快速、简便检测红细胞不完全抗体的方法，可用来检测IgG抗体，但IgG抗体的抗-K抗体除外。聚凝胺试剂盒42低离子介质（LowIonicMedium，LIM）降低溶液的离子强度，减少RBC周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与RBC相应抗原结合聚凝胺（Polybrene）

带正电荷的高价阳离子多聚物，中和RBC表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集RBC重悬液中和聚凝胺，非特异性聚集会因电荷而分散，由抗体介导的特异性凝集则不会分散原理43实验原理44聚凝胺介质交叉配血试验流程LIM混匀聚凝胺室温

0.6ml室温1min2滴15s

3000rpm弃上清液观察RBC是否离心15s管底留2滴液体聚集形成凝块

（无凝块，重做）重悬液混合观察2滴结果45阴性：凝块在1分钟内分散，供、受者血液配合阳性：出现不同强度的凝块，供、受者血液不配合实验结果必须在1分钟内判读结果判读46聚凝胺介质法

患者献血者主侧次侧

室温放置1分钟主次侧均加聚凝胺、低离子溶液Polybrene上海市血液中心血47聚凝胺介质法离心聚凝胺引起红细胞非特异性凝集重悬液上海市血液中心血主次侧均加重悬液看结果阳性阴性48质量控制1.1分钟内观察结果。2.可以用EDTA抗凝标本，不能使用含枸橼酸钠和肝素的抗凝剂。3.冷凝集素会影响结果判断，可置37℃水浴中观察。4.血液透析患者主侧不出现非特异性凝集，多加几滴聚凝胺试剂。4950方法学评价盐水介质法：简便、快速，不能查出IgG抗体微柱凝胶抗人球蛋白法：不适用于急诊标本，易出现假阳性低离子凝聚胺介质法：容易漏检低效价抗体，做交叉配血试验阳性需用抗人球蛋白法确认。5152（三）不规则抗体筛查概念：不规则抗体是指血清中抗A、抗B以外的其他血型抗体，也称意外抗体。通常可能由妊娠、输血或注射药物引起。

不规则抗体可引起急性、迟发性输血反应。筛查的目的：检测受检血清中是否存在不规则抗体方法：盐水介质法经典抗人球蛋白试验微柱凝胶抗人球蛋白法53《临床输血技术规范》

明确规定部分病人应做“抗体筛选”检测，第四章第17条：“凡遇以下情况必须按《全国临床检验操作规程》有关规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不合的；2、对有输血史、妊娠史或短期内需接受多次输血者。54编号Rh-hrKiddMNSDuffyDiegoKellLewisPDCEceJkaJkbMNSsFyaFybDiaKkLeaLebP1Ⅰ＋＋－－＋－＋＋＋－＋＋－－－＋＋＋－Ⅱ＋＋＋＋＋－＋＋＋－＋＋－＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋－＋＋＋＋＋－－＋＋＋－－＋－＋－筛查细胞通常是以2-3个单人份的O型红细胞组成一套筛选细胞试剂，包括以下常见的抗原：D,C,E,c,e,M,N,S,s,P,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb（三）不规则抗体筛查55抗体筛选技术要求尽可能多的检测出有临床意义的抗体。尽可能少的检测出无临床意义的抗体。尽可能快的完成抗体检测56盐水介质中的红细胞膜上的抗原与相应抗体结合，交叉联结形成肉眼可见的凝集块。盐水介质法实验步骤

取4支小试管，按表标记及加入相应试剂。1#2#3#自身受检者血清2滴2滴2滴2滴筛选用红细胞悬液1#1滴筛选用红细胞悬液2#1滴筛选用红细胞悬液3#1滴受检者5%红细胞悬液1滴混匀后3400rpm离心15秒，立即观察结果同前5758

1.经典抗人球蛋白试验1.患者血清与筛查红细胞混匀2.1000g离心15秒，观察有无凝集和溶血，记录结果。（阳性提示可能有自身抗体存在）3.阴性者置37℃水浴孵育30～60分钟，4.1000g离心15秒，观察有无凝集和溶血，记录结果。59抗人球蛋白试验5.生理盐水洗涤红细胞，加抗人球蛋白试剂，1000g离心15秒，观察有无凝集和溶血，记录结果。6.若为弱凝集，则取1滴置显微镜下观察。60质量控制612.微柱凝胶抗人球蛋白法原理：将不规则抗体筛查红细胞和被检血清分别加入微柱凝胶卡中。结果判断：

无凝集或溶血，表明未检出IgG意外抗体任一管有凝集或溶血，表明受检者血清含有IgG意外抗体。至少用3套试剂，反应格局见表6-2

微柱凝胶抗人球蛋白法操作步骤：1）将准备好的检测卡做好标记；

2）将1%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ筛检红细胞各50µl分别加入对应的微管中;

50µl50µl50µlⅠⅡⅢ50µl50µl50µlⅠⅡⅢ1%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ筛检红细胞3）将待检者血清各50µl分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ微管中；4）37℃孵育15分钟；5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；6）肉眼观察结果。待检者1血清50µl50µl50µl待检者2血清50µl50µl50µl根据所提供的筛检红细胞或谱红细胞的反应格局来判定结果：待检者1血清中可能含有抗-E待检者2血清中可能含有抗-c编号Rh-hrKiddMNSDuffyDiegoKellLewisPDCEceJkaJkbMNSsFyaFybDiaKkLeaLebP1Ⅰ＋＋－－＋－＋＋＋－＋＋－－－＋＋＋－Ⅱ＋＋＋＋＋－＋＋＋－＋＋－＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋－＋＋＋＋＋－－＋＋＋－－