T-CVMA 130-2023 猪瘟病毒间接磁微粒CLIA 抗体检测方法

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11.220学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载CCS

41 T/CVMA

130—2023

Indirect

magnetic

particle

based

chemiluminescence

immunoassay

fordetecting

antibodies

against

classical

中国兽医协会 发

布学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载T/CVMA

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《标准化工作导则

部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由中国兽医协会提出并归口。赵洪进。学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载T/CVMA

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本文件规定了猪瘟病毒间接磁微粒

抗体检测方法的试剂、仪器设备、耗材、操作步骤、结果

6682

541

5.1

25

5.2

5.3

5.4

5.5

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1302023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载5.6

、工作校准品

、工作校准品

、工作校

12.5

50

200

800

3200

5.7

和产品校准品

50

800

5.8

20

140

260

5.9

；最小称量：100

1.5

——反应杯；——试剂船。

本方法使用磁微粒化学发光免疫分析法，采用间接法进行检测。首先将猪瘟病毒蛋白作为抗原发光底物，读取发光值，通过检测猪瘟病毒蛋白抗体工作校准品建立校准曲线，将待测样本代入校

8.1

样品采集按照

541进行。无菌注射器静脉采血，不少于

，用自然析出法分离血清后，置于无菌血清管中，按照

样品处理的生物安全措施、实验室

生物安全通用要求处理样本，若

8.2

8.18000

1.5

300

检；若样品中存在沉淀或絮状物等杂质，应离心去除杂质，轻微操作，避免出现泡沫。8.3

25

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1302023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载8.4

8.5

9.1

将猪瘟病毒抗体工作校准品～工作校准品放入样本架，按照9.4进行检测，按9.59.2

28

9.3

a)

b) 24

9.4

取待检样本于

1.5

10

10μL

55μL37

10

清洗：使用磁铁吸附磁微粒30s，使其聚集于管壁，弃去上清液。加入悬浮磁微30

37

10

e)

检测：加入化学发光底物100μL于清洗后的反应杯中，混匀30

悬浮磁微粒，37

反应分钟，

9.5

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1302023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载检测完成后，以工作校准品抗体含量（

12.5

50

200

800

3200

）为横坐标、相应检测发光值为纵坐标拟合四参数为标准曲线，四参数公式为高于0.99毒抗体含量。10

10.1

20

140

260

10.2

95

95

1.15

8.00

0.50

1.98

225.00

-20

1.15

8.00

0.20

0.50

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A.1

将表中的试剂依次加入烧杯中，加灭菌蒸馏水至600

，溶解，定容至1000

，置于

表A.1 A.2表A.1 将表600

1000

表A.2

A.3表A.2

按表600

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B.1

500

21

14

3000

10

0.22

proclin300

0.05

B.2

校准品稀释液梯度稀释所制备的高免血清，按照

的猪瘟抗体间接检测方法检测，计算检测结果，定义检测的阳性最大稀释滴度的样本抗体含量为100

，若此份血清为稀释，则50

12.5

50

200

800

1600

分别为工作校准品准品

36个月内有效。学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载T/CVMA

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C.1

50

800

毒抗体产品校准品和产品校准品–20

36个月内有效。C.2

6.25

200

病毒抗体质控品和质控品，用猪瘟病毒抗体管式化学发光免疫分析检测方法检测次，计算平均值，。质控品–20

36个月内有效。2523969.55

3546596.17

1245251.68

2989450.90

637722.68

1942262.46

121241.23

278123.34

10564.17

34009.54

925.25

104