2024年遗传学研究成果汇报

试验一植物细胞有丝分裂的制片与观测摘要：本试验选用大蒜作为试验材料，通过对大蒜根尖的培养获得生长旺盛的植物分生组织，然后对根尖细胞进行前处理、固定、解离、染色、压片来观测细胞有丝分裂的全过程。throughcultivatingtherootsofalliumsativum.thenwediofthemitosis.keywords:mitosisinterphaseprophasemetaphaseanaphas有丝分裂是植物体细胞进行的一种重要分裂方式。有丝分裂的目的是增长细胞的数量而使植物有机体不停生长。在有丝分裂过程中，细胞核内的物质能精确的进行复制，然后有规律的均匀分派到两个子细胞中去。植物有丝分裂重要在根尖、节间、茎的生长点、芽及其他分生组织里进行。将生长旺盛的植物分生组织经取材，固定、解离、染色、压片，可以观测到细胞有大蒜(alliumsativum2n=16),carnoy固定液(由95%的乙醇和冰乙酸以3:1的比例配置),1mo1/1的hc1,石炭酸品红，水浴锅，显微镜，剪刀，矿泉水瓶，蒸馏水1.生根、取材与固定采用水培法于暗处使大蒜生根，每天换水两次。4天后，根长至2.0cm左右。上午10:00用剪刀将根尖剪下，并直接放入固定液中固定，以保持细胞真实的生活状态，防止操作过程中对细胞生活状态的破坏。本次试验固定期间为14h。本次试验采用了酸解法使细胞散开。将1mo1/1的hc1放入60℃的恒温水浴锅中，将固定好的根尖放入.解离4min。用清水冲洗解离后的材料5次，洗去表面的hc1,并引起后低3.染色、压片与镜检、拍照截取根尖上分生组织1/3左右于载玻片上，用镊子将分生组织碾碎；滴上石炭酸品红染通过上述试验措施获得了一系列分裂的照片，如图i-1所示。从这一系列图片我们可以间期(interphase):图i-1(a)所示，有丝分裂间期染色体以染色质形式染色质缠绕成丝状的无规线团。讨论1、大蒜根尖的固定期间在上午9:00-11:00和下午15:00-17:00为最佳。posedthecellsinofthemeiosis.keywords:meiosisleptonemazygonemapachynemadipl减数分裂是生物在形成配子时的一种特殊的分裂方式，是在性母细胞中进行的。减数分裂产生的每个子细胞染色体数目减少二分之一。并且第一次分裂前期尤其长，其变化尤其复杂，包括同源染色体配对、互换与分离等。玉米雄花(zeamays2n=20),carncy固定液(由958的乙醇和冰乙酸以3:1的比例配置),铁矾，苏木精，恒温箱，冰乙酸，酒精灯，显微镜1、取材与固定(指导老师完毕)采集处在减数分裂时期的玉米雄花，采集时间为上午8:30—10:30和下午2:00-4:00。采集的雄花直接放入新配制的carnoy固定液中固定一周(中间换固定液两次)。减数分裂是同步分裂，由于每朵小花中的所有花药都处在同一时期，因此剥离的量要充足，在不伤害花药的前提下，使用镊子与解剖针玻璃花药并放入4%硫酸高铁铵(铁矾)水溶液中进行媒染，时间为4-24h。媒染后，彻底水洗除净花药表面的铁离子。之后放入0.5%的苏木精中染4—24h。在25°℃愠箱中进行。染完后再次彻底水洗。除去表面染料。取一枚花药于载玻片上，滴上一滴45%冰乙酸，并在酒精灯上加热5秒钟。材料加热之通过上述试验措施得到如下图i-2:1、在花药剥离时要注意将颖片剥离洁净，使用的镊子和解剖针不可伤害花药，否则花粉母细胞会从伤口处外流，影响试验效果2、在挑选花粉粒的时候，应挑选粒大且饱满的，粒小而瘪的花粉往往发育不良。3、媒染时间不合适过长或过短，染色过深或过浅都会影响最终的试验成果。4、压片时用拇指从上往下垂直用力且要防止载玻片与盖玻片之间的滑动，否则会使细5、观测时先用低倍镜找到分裂相的位置，再换高倍镜观测特性便可作为此时期的分裂相。试验三植物细胞多倍体诱导的制片与观测摘要：本试验选用大蒜作为试验材料，通过在培养液中施加秋水仙素的胞从而对其进行多倍体诱导，然后对根尖细胞进行固定、解离、染色、压片来观测细胞染色体disposedthepolyploidcells多倍体是指细胞核内具有两个以上染色体组，它的产生出了自然发生外还可人工诱导。诱导多倍体的措施有多种，本试验采用秋水仙素诱导。它重要作用于细胞分裂过程中纺锤体的形成，使细胞分裂后期染色体不能分向两极而被阻截在中期，通过间期染色体复制，使染色体数大蒜(alliumsativum2n=16),carnoy固定液(由95%的乙醇和冰乙酸以3:1的比例配置，秋水仙素，1mol/1的hc1,石炭酸品红，水浴锅，显微镜，剪刀，矿泉采用水培法培养大蒜，直至根长约2.0cm。向培养液中加入浓度为0.18的秋水仙素，培养36～48h。待根尖膨大时可取材固定。2、固定、解离(同有丝分裂过程)取根尖分生组织一部分放在一洁净的载片上，先用解剖针把材料碾碎并铺展开，然后滴上一滴石炭酸品红染色5min,盖上盖片，进行压片。图i-3大蒜的染色体图(白点示着丝点)图(a):2n=16,是未加倍的大蒜细胞中的染图(b):4n=32,是经秋水仙素加倍后的大蒜细胞染色体。1、染色体加倍的倍数多少与秋水仙素作用的时间有关。若让染色体数目加倍，秋水仙素处理的时间应不不大于等于细胞的一种分裂周期。假如浸泡的时间不不大于细胞周期的二倍，则会出现八倍体。若感爱好，可合适延长处2、不应当观测到32条染色体就认定此细胞为四倍体，由于染色体为2n细胞的分裂后期染色体数也为32条，此时的染色体不含姐妹染色单体。而染色体为4n的细胞中期，具有32对姐妹染色单体。3、若大蒜根尖细胞被加倍，其尖端部膨大，是认定细胞加倍的理由之一。4、大蒜根尖的固定期间在上午9:00-11:00和下午15:00-17:00为最佳。由5、解离的时间要合适，大概4min,由于解离时间的长短与试验成果的好坏有非常直接的影响，时间过长，则不仅破坏分生组织之间的果胶与纤维素等物质，也使分生组织与伸长区6、在切取根尖时大概切从根尖开始算往上1.5mm左右，若切得太短，则只会看到成熟的根冠细胞，在视野中看不到分裂期细胞；若切得太长，则会看到有诸多伸长区的成熟细胞，从7、染色时间不合适过长或过短，染色过深或过浅都会影响最终的试验成果。8、压片时用拇指从上往下垂直用力且要防止载玻片与盖玻片之间的滑动，否则会使细胞试验一果蝇唾腺染色体的观测摘要：果蝇(drosophilamelanogaster)是研究遗传学的经典材料，它的染色体数目是2n=8,易于观测，尤其是果蝇三龄幼虫阶段的唾腺染色体，其唾腺染色体巨大，又称巨染色体。本试验通过对果蝇唾腺染色体进行处理和观测来探求染色体的构造。关键词：果蝇唾腺染色体ofstudyinggenetics.asweallknow,drosophilachromosome.inthisexperimentthroughtkeywords:drosophilamelane果蝇三龄幼虫阶段的唾腺染色体处在体细胞同源染色体的配对状态，多次复制而不分开，因而形成比一般体细胞根染色体长100-200倍的不螺旋的巨大染色质，又称为多线染色体，此外上面还常能看到带纹。本试验即观测唾腺染色体的特性。1、三龄幼虫的培养试验前将果蝇放入新培养基培养，23℃-25℃十天左右。把载玻片置于双筒镜下。载玻片上滴加生理盐水一滴，取三龄幼虫放在其中，操作者两手各握一枚解剖针，左手解剖针压住幼虫后端1/3处，固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫头在载玻片上除去幼虫其他组织部分，还要把唾腺周围的白色脂肪剥离洁净，再把唾腺移到洁净的、预先准备的滴有1mol/lhcl的载玻片上，解离2-3分钟。蒸馏水洗涤3—4次。石炭酸品红染色5分后盖上盖玻片，压片，吸去多出染液。先于低倍镜下观测，寻找细胞，再于高倍镜下观测染色体形态特点。唾液腺染色体约5条长臂，点状染色体附着在染色中心附近，很难看到。在染色体臂上有深浅不一、宽窄不同样、通过上述试验措施获得了图ii1。2、在解剖时，头部解剖针的位置大概在果蝇的眼睛处，后端部解剖针的位置为果蝇身体的1/3处。在拉伸果蝇的时候力度要合适，肠管、神经管等所有戳断从而影响视线。试验二果蝇的三点测交试验abstract:drosophilamelanogasterisaclassicmaterialohasa2nnumberOf8,whichmeanswecouldeasytoobsit,furthermore,italsohasnumerousofgenemutans.finally,itsbiocycleisveryshort,thereforeitweperformedthethree-pointmappingin两个基因在同一条染色体上呈链锁状态时基因间常常发生互换，互换之可作为两基因间的距离。三个基因在一条染色体上时，通过三点测交可确定三个基因在染色体上的位置次序和基因间的相对距离。试验用品黑腹果蝇(drosophilamelanogaster),野生型形状为红眼(+)、长翅(+)、直刚毛(+);三隐性突变型为白眼(w)、短翅(m)、卷刚毛(sn)。恒温箱，培养瓶，显微镜，乙醚1、试验果蝇的培养(指导老师完毕)分别培养两种果蝇，7—8天后，出现幼虫，去亲本。特性雄蝇雌蝇个体小大性状选择红眼、长翅、直刚毛白眼、短翅、卷刚毛(一定要为处女蝇)把挑选的雌雄果蝇分别放入同培养瓶内进行杂交，每瓶3-5对。培养瓶放入25℃温箱果蝇杂交7-8天后，见到f1幼虫和蛹出现，清除亲本。从f1中选出3～5对果蝇放入同培养瓶内进行杂交，培养瓶放入25温箱培养7~8f2代的果蝇有性别影响，没有性状上的影响，因此代的表型有8种，其中6种是重组合，2毛且雄蝇所有是白眼、短翅、卷刚毛，试验可继续进行。假如不是预期成果，试验不能盲目往3、在开始挑选亲本时，乙醚的量要合适，防止因剂量过大导致亲本死亡。判断果蝇与试验一小鼠骨髓细胞染色体的制片与观测学的经典试验材料。本试验采用小鼠骨髓细胞作为试验材料，因其进行离心、低渗、固定、滴片、染色来观测其染色体的形态构造。learninggenetics.inthisexperimenmarrow-cellasthematerial.wegota生理盐水：8.5gnacl,溶解在1000ml蒸馏水中，浓度是0.858低渗溶液：5.59gkc1,用1000ml蒸馏水溶解，浓度是0075%按每克体重约5μg的剂量，在处死小白鼠前2h经腹腔注射秋水仙素。秋水仙素的作用是破坏细胞分裂中纺锤体的形成，积累细胞中期分裂相。3、解剖小鼠颈椎脱臼法处死小白鼠，(用手捏住小白鼠头的后部，并用力下压；另一手抓住鼠尾，用力剔净其上的肌肉。搜集骨髓细胞用2%柠檬酸钠溶液洗净股骨和胫骨，剪去关节头，暴露骨髓腔。将吸有适量2%柠檬酸钠溶液的注射器的针头从股骨和胫骨的一端插入骨髓腔中，用28柠檬酸钠溶液将骨髓吹洗入离心管中，反复冲洗至骨髓腔呈白色为止。离心管配平后，1000r/min离心10min,弃去上清液。向细胞沉淀中加入5ml低渗液轻轻敲打离心管底部，使其充足接触，并在37℃k浴中低渗低渗处理后，1000r/min离心10min,弃去上清液，沿管壁加固定液，立即将细胞团吹散打匀，静置15min,然后离心。反复一次。视离心管底细胞多少再加入甲醇-冰醋酸(1:1)固定液2-3滴，吹打成悬液。将载玻片在洁净冰水中预冷，取出后平放在桌面。用吸管吸取2滴细胞悬液，从载玻片上方合适高度处滴到载玻片1/3和2/3处，并立即对载玻片上的细胞悬液吹气，将细胞悬液吹载玻片充足干燥后，平放，用新鲜配制的1:10的giemsa磷酸缓冲液覆盖载玻片，染色10min,流水缓缓冲去多出染液，再用吸水纸吸干多出水分，晾干后即可镜检。根据上述试验措施，得到了图ii+1,从图中可以清晰地看到小鼠的染色体数为2n=40,且1、在取骨髓细胞时，应将胫骨两端切掉，使之相通。在用生理盐水冲洗时应从上往下冲，2、在滴片的时候为了让细胞破裂、分散得更好，滴管与载片之间应保持至少1m的距离，让细胞摔破。因本人在滴片的时侯距离不够长，从而导致细预期的成果。(上图摘自同组同学孙海汐的图片)4、染色时间大概为15min左右，染色过深或过浅都会影响最终的试验成果。试验二人染色体的制片与观测期，再用秋水仙素处理便可得到大量中期分裂相的细胞。本试验采用人外周血作为试验材料，通过对其进行离心、培养、秋水仙素处理、低渗处理、预固定、二次固定、滴片、giemsa染色处理来观测其染色体的形态构造。keywords:bloodcellchromosome1)固定液，显微镜试验措施1、无菌处理(指导老师完毕)2、培养基配制(指导老师完毕)取m1994ml,小牛血清1ml,青霉素、链霉素0.04ml,肝素3-4滴，pha无菌条件下静脉取血0.2—0.3ml放入培养液中。细胞在37°温箱中培养72h,期间常常摇动培养瓶。培养68h左右，加入秋水仙素溶液，以获得较多的中期相，摇匀后，继续培养44h,可进行培养物倒入离心管中，1000r/转离心8分钟去掉上清液，沉淀物为红细胞和白细胞，然后加入少许预热37°的0.075mkc1,小心用吸管吹气混匀后，放入37亘温箱中低渗20分钟左右，低渗的作用在于使红细胞破碎，白细胞膨胀破裂，最终导致染色体分散。加入1ml新配制的甲醇-冰醋酸(3:1)固定液，均匀后立即以1000r/转离心7分钟，用吸管吸去所有上清液，轻弹离心管底部，使沉淀成糊状。加入5ml固定液，用吹管吹打均匀，固定15分钟，以1000r/转离心7分钟，去掉上清玻片洗净后放于冰箱中冰冻，滴片时用吹管吹取细胞悬浮液，滴于载片上，滴片高度应少高些，每张片滴1-3滴，滴后用嘴吹，有助于细胞分散，滴片后斜放，在空气中干燥取1-2张片，用giemsa染液和磷酸缓冲溶液配成1:10的工作液，滴于载片上染色1通过上述试验措施，得到图ii+2。从图中可以清晰地看到人的染色体数为2n=46。1、在滴片的时候为了让细胞破裂、分散得更好，滴管与载片之间应保持至少1m的距离，让细胞摔破。本次试验吸取上次试验的教训，因此获得了较为成功的制片。3、染色时间大概为15min左右，染色过深或过浅都会影响最终的试验成果。4、在取血时，手一定要轻，防止红血细胞混到血清中。试验三人染色体的分带染色法摘要：染色体分带技术是鉴定单个染色体和染色体组的一种手段，它运染色体产生明显的染色的暗和染色的命带相间的带型形成了鲜明的染色体个体性，本试验因用identifyeachcanmaketheofdifferent人染色体通过胰蛋白酶处理后，染色体上的蛋白质被酶水解只留下裸露的dna,在吉姆萨染液的过程中，不同样的碱基在吉姆萨中着色深浅不同样，因此会看到颜色深浅不一的带纹。试验用品吉姆萨染液pbs胰将上次试验制得的人染色体的片子取出在室温下将玻片标本浸入胰蛋白酶工作液中处理25秒左右。再在pbs中漂洗30秒。在giemsa染液中染7分钟左右。玻片标本在细流自来水下冲洗直至水流不再有颜色为止，在冲洗成果通过上述试验措施，得到图iif3。从图中可以清晰地看到人的染色体数为2n=46,明显的带纹.1、玻片标本在胰蛋白酶溶液处理前须在37°箱内处理4天左右，才可以得到满意的2、用胰蛋白酶处理染色体的时间要恰当，方可使染色体外表面的蛋白质水解。3、染色时间不要太长，以防因时间过长而导致染色体没有明显分带，所有染色体染色过试验四dna的粗提取摘要：鸡血红细胞与人的红细胞不同样，存在细胞核，当中含丰富的有dna,并且鸡血细胞极易吸水胀破。本试验以鸡血为试验材料，运用dna在不同样浓度的nac1下溶解度不同样的措施来粗提取dna。linchickhasnucleus,wherethere鸡血红细胞与人的红细胞不同样，存在细胞核，当中含丰富的有dna,并且鸡血细胞极易吸水胀破。首先破坏细胞膜，然后通过高速离心，由于dna的分子量较大，因此会下沉，这样反复多次可得到较粗的dna。而后运用dna在不同样浓度的nacl下溶解度不同样的措施来粗提取dna。10%柠檬酸钠、2mol/lnacl、二苯胺、0乙醇、纱布、蒸馏水、玻璃棒、鸡血、烧杯杀活鸡取鸡血，同步放入抗凝剂柠檬酸钠溶液。详细制备措施如下：取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液100ml,置于500m1烧杯中，注入新鲜的鸡血(约180ml),同步用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充将血液倒入离心管内进行离心，用1000r/min离心5min,使血细胞沉淀于离心管鸡血细胞中的dna与核蛋白结合，位于鸡血细胞的细胞核中，正常状况下是不会释放出来的。为了使dna从细胞核中释放出来，需要向鸡血细胞液中加入蒸馏水细胞膜和核膜胀破。用玻璃棒搅拌可以加速细胞的破裂。注意应沿一种方向迅速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎dna。一般5-10ml的鸡血细胞液加入20ml蒸馏水搅拌5min。释放出来的大量dna和rna往往与蛋白质结合在一起，用单层纱布进行过滤，除去某4、溶解细胞核内的dna在浓度较高的nac1溶液中核蛋白轻易解聚，游离出的dna溶解在溶液中。在溶液中加入40-60ml体积浓度为2mol/l的nacl溶液，搅拌1min。将溶液中的dna与其他杂质分离，加蒸馏水减少nacl溶液浓度，使dna析出。缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿一种方向不停地均匀搅拌，以利于dna分子的附着和缠绕。使nac1溶液的终浓度为0.1-0.2mol/1。加水过程分多次进行，当总加水量为80ml左右将dna黏稠物再溶解，继续用2mol/1的nacl溶液20ml溶解dna黏稠物，仍旧沿一种方向不停搅拌，使dna充足溶解，以免损失。用2层纱布进行过滤，滤去杂质，搜集具有dna的滤液。向滤液中贴壁缓慢加入等倍体积的冰乙醇，并用玻璃棒朝一种方向缓慢、均匀地搅拌，溶液中会出现dna丝状物，卷起。用0.02mol/1的nacl溶液1ml溶解丝状物，同步将对照组(只含二苯胺试剂)与试验组水浴加热进行显色反应。1、在取鸡血的时侯，同步用玻璃棒进行搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充足混合试验五血影的制备摘要：鸡血红细胞与人的红细胞不同样，存在细胞核.本试验以活鸡血为原料通过多次的离鸡血细胞的细胞膜具有选择透过性，较大的物质一般状况下不会从细胞膜透出。若采用5p7.6溶液作用于细胞，便可以变化细胞膜的通透性，使其通透性增大，从而可以通过高速离108柠檬酸钠，pbs,5p7.6溶液取10m1血液加入2倍体积的pbs,装入离心管进行1000r/min,时间为5分钟的离沉淀中加入20倍体积的5p7.6溶液，混合均匀后在常温中静置25min取10ml装入离心管进行15000r/min,时间为20分钟的离心。试验成果通过上述试验措施，得到了图iii41、在取鸡血的时候，同步用玻璃棒进行搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充足混合，以免血3、在取细胞膜的时候，要取最上表层，不要获得过多。防止细胞内容物影响试验成摘要：粗糙链孢霉(nerosporacrassa)属真菌类，是进行四分子遗传学分析的好材料。本专题选用粗糙链孢霉赖氨酸缺陷型和野生型为试验材料，对杂交所得后裔的体现型进行观测分析，进而理解次序排列的四分体的遗传学分析措施。粗糙链孢霉(nerosporacrassa)的菌丝体是单倍体，每一菌丝细胞中具有几十个细胞核。粗糙链孢霉的菌株有两种不同样的接合型，它们受一对等位基因控制。不同样接合型菌株的细胞接合产生有性孢子，这过程称为有性生殖。通过对粗糙链孢霉的赖氨酸缺陷型和野生型杂交所得后裔的体现型的分析，理解次序排列的四分体的遗传学分析措施，进行有关基因粗糙链孢霉(nerosporacras