细胞培养操作步骤及注意事项_第1页
细胞培养操作步骤及注意事项_第2页
细胞培养操作步骤及注意事项_第3页
细胞培养操作步骤及注意事项_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

细胞培养操作步骤及注意事项细胞培养操作步骤1.准备培养基和培养器具：选择适合细胞生长的培养基，如DMEM（Dulbecco'sModifiedEagleMedium），RPMI1640（RoswellParkMemorialInstitute1640）等。准备培养器具，如细胞培养瓶、组织培养皿、离心管等。2.培养器具的消毒：将培养器具放入70%的乙醇或漂白水中浸泡约15-30分钟，然后用无菌PBS（磷酸盐缓冲液）清洗3次。将培养器具在100摄氏度的烘箱中高温烘干或使用紫外线灯照射15-30分钟。3.细胞传代：将细胞从旧的培养瓶中移至新的培养瓶中，以防止细胞过度增殖和细胞衰老。首先将培养瓶中的培养基抽吸掉，然后用PBS洗涤细胞2次，最后加入适量的胰酶消化细胞，使其与培养基充分接触，放置一段时间，观察细胞的离培情况，离心沉积细胞，弃去上清液，加入新的培养基。4.细胞培养条件控制：维持培养环境的适宜条件，包括温度、湿度、CO2浓度和培养基的pH值等。通常细胞在37摄氏度、5%的CO2和95%湿度下生长。定期检查培养器的培养基水平，保持培养基的适当量。5.细胞观察和记录：使用显微镜观察细胞的形态和数量，记录细胞培养的过程和实验结果。注意控制细胞的密度，防止过度密集或过度稀疏。6.细胞分化和实验处理：根据需要，可以进行细胞的分化处理或实验处理，如加入药物、生化试剂等。在处理时要注意药物的浓度、处理时间和处理温度等。7.细胞冻存：当需要长期保留细胞时，可以进行细胞冻存。将细胞与冻存液混合，分装入冻存管中，置于液氮中冻存，以备将来使用。细胞培养注意事项-细胞培养实验应在无菌条件下进行，避免污染。-培养器具应事先消毒处理，防止细菌、真菌和病毒的污染。-培养基的配制要准确无误，严格按照操作手册或厂家提供的方法进行。-培养过程中要保持培养器的密闭性，以确保适宜的气体交换和温度控制。-细胞传代和处理时要注意操作的轻柔，避免对细胞造成伤害。-细胞培养瓶的频繁开启会导致细菌污染，应尽量减少开启次数。-细胞的培养时间不宜过长，一般应在10~20个传代内完成实验。-细胞的培养密度要适中，过度密集会导致细胞失去生长活力，过度稀疏会影响细胞生长和实验结果。-细胞冻存需要使用专门的冻存液，并按照规定的方法和比例进行。细胞培养是生物学研究中的常用技术手段，掌握正确的操作步骤和注意事项，

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 合同范本

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论