海南省农业科学院 国家级猪种质资源与模型保存与繁育基地 环评报告

建设项目环境影响报告表（污染影响类）项目名称：国家级猪种质资源与模型保存与繁育基地项目 建设单位（盖章）：海南省农业科学院中华人民共和国生态环境部制 YK03-10-08-02地块（具体地址）四十五、研究和试验发展-98.专业案）部门（选填）琼发改审批〔2022〕239号无1.三亚总体规划（空间类2015-2030年三亚市人民政府，2017）；3.《三亚崖州湾科技城控制性详细规划》（1.与《三亚市总体规划（空间类2015-2030）》块，根据《三亚市总体规划（空间类2015-2030）》，项目所在地块用2.与《三亚崖州湾科技城总体规划（2018-2035）》符合性3.与《三亚崖州湾科技城控制性详细规划》相符性根据《三亚市崖州湾科技城控制性详细规划》（三府函[2019]488），本项目实验挥发性有机废气经通风橱或洁净车间排入二级活性炭发电机组燃油废气通过烟道引至楼顶经40m高P3排放；停车场废气无器具二次清洗废水及纯水制备排浓水经自建一体化污水处理设施进行鼓励类-三十一、科技服务业-10、国家级工程（技术）研究中心、国家序号生态环境保护规划要求本项目符合情况1强化国土空间规划和用途管制。落实生态保护红线、基本农田、城镇开发等空间管控边界，减少人类活动对自然空间的占用，守住自然生态安全边界。立足资源环境承载能力，切实发挥“三线一单”在环评审批、规划及政策制定、产业准入、园区管理、执法监管等方面的作用，系统支撑国土空间规划、资源开发、产业布局和结构调整、城镇建设和重大项目选址等方面的作用。加强国土空间保护与开发，强化底线约束，逐步建立差异化自然生态空间管控措施，保持自然生态空间生态系统总体稳定。本项目未处于三亚市生态保护红线核心保护区和一般控制区内，本项目的建设不会对生态红线保护区域造成影响。符合2强化区域产业布局和准入要求。充分发挥“三线一单”成果在支撑产业准入负面清单编制及落地实施等方面的作用。“三线一单”确定的环境管控单元及生态环境准入清单是区域内调整产业结构、规划产业发展、推进城镇化、强化执法监管的重要依据，相关政策、规划、方案需说明与“三线一单”的符合性，在地方立法、政策制定、规划编制、执法监管中不得变通突破、降低标准。本项目建设符合产业规划及三亚崖州湾科技城总体线一单”生态环境分区管符合将“三线一单”提出的产业发展要求作为产业准入清单制定的基础，将具体管控单元的空间布局约束、污染物排放管控、环境风险防控、资源利用效率等方面的生态环境管控要求，作为推动产业准入负面清单在具体区域、园区和单元落地的支撑和细化。3深入推进重点行业VOCs治理。严格限制新、改、扩建生产和使用高挥发性有机物（VOCs）原辅材料的项目。推进汽修、印刷、干洗等VOCs重点行业源头减排综合治理，实施原辅材料和产品源头替代工程，开展“一行一策”工作。定期对涉VOCs企业的原料替代、无组织监管、污染治理设施等开展系统摸查和评估。推动车船维修、干洗、汽修等行业集中喷涂工程中心等VOCs集中高效处理设施建设。推进加油站三次油气回收建设。建立VOCs污染源监测体系，针对加油站、储油库、喷涂、包装印刷等区域，组织激光雷达观测，在重点防控时段对重要的人为VOCs排放源开展走航监测。本项目为科研实验项目，研发过程使用少量有机试剂，产生的实验挥发性有机废气经通风橱或万向集气罩收集，通过二级活性炭吸附装置处理后经楼顶1根40m高排气筒达标排放，对周边大气环境影响较小。符合根据《海南省生态环境准入清单（2021年版）》、《三亚市“三线3.1生态保护红线根据海南省国土空间基础信息平台查询，本项目不涉及2021年海3.2环境质量底线表2项目与“三线一单”生态准入清单相符性分析表（节选）生态环境管控要求本项目符合情况控单元根据现状环境质量是否达标、区域经济社会发展趋势与需求、可能面临的环境压力等因素，重点推进产业布局优化、转型升级，不断提高资源利用效率，加强污染物排放控制和环境风险管控，解决突出生态环境问题。项目现状各环境质量因子能够达标，项目产生废气污染物均能达标排放；废水经自建污水处理站处理达标后排入市政污水管符合崖州区加强山体及森林生态系统保护和修复，促进水源涵养功能提升。强化近岸海域水产养殖及港口船舶污染治理，加强风险防控。保护岸线资源，控制开发强本项目以种质资源保护利用为产业基础，以生物科研为产业核心，重点考虑生命科学方向的科研和产业发展，本项目与崖州湾符合度，提高岸线利用效率。加强农业面源和城镇面源污染控制，推进城镇内河（湖）整治，提升城乡生活污水处理能力和标准，促进环境质量持续改善。以崖州湾科技城发展为契机，推进产业绿色化、高端化转型和布局优化。科技城发展相符。4.与生物安全相关规范的符合性分析分级等级指标本项目第一类病原微生物是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。本项目微生物实验室涉及第四类病原微生物第二类病原微生物是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类病原微生物是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。根据《生物安全实验室建筑技术规范》（GB-50346-2011）有关规分级生物危害程度操作对象本项目一级低群体危害对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致病因子本项目微生物实验为一级生二级中等个体危害，有限群体对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动物和环境危害不会造成严重危害、有效的预防和治疗措施物安全实验室三级低群体危害对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人传染上严重的甚至是致命疾病，或对动植物和环境聚有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施高群体危害对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，未知的、危险的致病因子，没有预防治疗措施），表s本项目与生物安全相关规范符合性（摘录）标准指标要求本项目拟按要求建设《病原微生物实验室生物安全管理条例》（2018年修订版）技术指标第二章病原微生物的分类和管理第九条采集病原微生物样本应当具备下列条件具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水平相适应的设本项目设置GMP车间及生物安全柜，涉及微生物实验在生物安全柜内进行。具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人本项目实验室人员均掌握相关专业知识和操作技能保藏机构应当制定严格的安全保管制度，作好病原微生物菌（毒）种和样本进出和储存的记录，建立档案制度，并指定专人负责。本项目建立档案制度，由专作好病原微生物菌（毒）种和样本进出和储存的记录。第三章实验室的设立与管理第十九条新建、改建、扩建三级、四级实验室或者生产、进口移动式三级、四级实验室应当遵守下列规定：符合国家生物安全实验室体系规划并依法履行有关审批手续；依法履行有关审批手续符合国家生物安全实验室建筑技术规范；本项目实验室建设根据《实验动物设施建筑技术规范》《《实验动物环境设施》（GB验室生物安全通用要求》（GB19489-2008）等标准进行建设依照《中华人民共和国环境影响评价法》的规定进行环境影响评价并经环境保护主管部门审查批准；依照《中华人民共和国环境影响评价法》的规定进行环境影响评价并经环境保护主管部门审查批准生物安全防护级别与其拟从事的实验活动相适应。本项目微生物实验室为一级生物安全实验室符合项目建设要求第二十七条已经建成并通过实验室国家认可的三级、四级实验室应当向所在地的县级人民政府环境保护主管部门备案。环境保护主管部门依照法律、行政法规的规定对实验室排放的废水、废气和其他废物处置情况进行监督检查。本项目建成后向所在地的县级人民政府环境保护主管部第三十九条三级、四级实验室应当在明显位置标示国务院卫生主管部门和兽医主管部门规定的生物危险标识和生物安全实验室级别标志。本项目建设完成后在实验室明显位置标示国务院卫生主管部门和兽医主管部门规定的生物危险标识和生物安全实验室级别标志《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346-建筑、装修和结构要求生物安全实验室的技术指标三级、四级生物安全实验室应实施一级屏障和二级屏障。本项目实验开展均在相应独立的实验室内进行，微生物实验在生物安全柜生物安全实验室的位置要求平面位置：可共用建筑物，实验室有可控制进出的门；选址和建筑间距：无要求按规范设置。进入实验区域需经过准备室，进入P1实验室还需经过一道缓冲室生物安全实验室应在人口处设置更衣室或更衣柜。四级生物安全实验室防护区应包括主实验室、缓冲间、外防护服更换间等，辅助工作区应包括监控室、清洁衣物更换间等；设有生命支持系统四级生物安全实验室的防护区应包括主实验室、化学淋浴间、外防护服更换间等，化学淋浴间可兼作缓冲本项目微生物实验室设有主实验室、缓冲间及更衣室四级生物安全实验室的室内净高不宜低于2.6m，四级生物安全实验室设备层净高不宜低于2.2m本项目涉及微生物实验室净高大于2.6m，净高大于2.2m四级生物安全实验室的防护区应设置安全本项目各出入口均通道和紧急出口，并有明显的标志。设置安全通道和紧急出口，并有明显的标志。四级生物安全实验室防护区的围护结构宜远离建筑外墙，主实验室宜设置在防护区的中部。四级生物安全实验室建筑外墙不宜作为主实验室的围护结构。本项目微生物实验室主实验室宜设置在防护区的中部四级生物安全实验室相邻区域和相邻房间之间应根据需要设置传递窗，传递窗两门应互锁，并应设有消毒灭菌装置，其结构承压力及严密性应符合所在区域的要求；当传递不能灭活的样本出防护区时，应采用具有熏蒸消毒功能的传递窗或药液传递箱。本项目微生物实验室相邻区域和相邻房间之间设置传递窗，传递窗两门应互锁，并设有消毒灭菌装置，其结构承压力及严密性符合所在区域的要求；当传递不能灭活的样本出防护区时，采用具有熏蒸消毒功能的传递窗或药液传递箱。四级生物安全实验室防护区内的顶棚上不得设置检修口。本项目生物安全实验室防护区内的顶棚上不设置检修四级生物安全实验室的主体结构宜采用混凝土结构或砌体结构体系。本项目生物安全实验室的主体结构采用混凝土结构或砌体结构体系。空调、通风和净化送风系统气净化系统至少应设置粗、中、高三级空气过滤本项目气净化系统设置低、中、高三级空气过滤排风系统排风必须与送风连锁，排风先于送风开启，后于送风关闭。排风与送风连锁，排风先于送风开主实验室必须设室内排风口，不得只利用生物安全柜或其他负压隔离装置作为房间排风出本项目微生物主实验室设室内排风四级生物安全实验室防护区的排风必须经过高效过滤器过滤后排放。本项目微生物废气经生物安全柜过滤后排放，生物安全柜设置高效过滤器四级生物安全实验室排风高效过滤器宜设置在室内排风口处或紧邻排风口处。四级生物安全实验室防护区除在室内本项目微生物实验室排风高效过滤器设置在室内排风口处，排风口处设第一道高效过滤器—10—排风口处设第一道高效过滤器外，还应在其后串联第二道高效过滤器。防护区高效过滤器的位置与排风口结构应易于对过滤器进行安全更换和检漏。外，并在其后串联第二道高效过滤器。防护区高效过滤器的位置与排风口结构易于对过滤器进行安全更换和检漏。气流组织四级生物安全实验室各区之间的气流方向应保证由辅助工作区流向防护区，辅助工作区与室外之间宜设一间正压缓冲室。本项目实验室之间的气流方向保证由辅助工作区流向防护区，辅助工作区与室外之间设一间正压缓冲室。四级生物安全实验室内各种设备的位置应有利于气流由被污染风险低的空间向被污染风险高的空间流动，最大限度减少室内回流与涡流本项目实验室内各种设备的位置设置许有利于气流由被污染风险低的空间向被污染风险高的空间流动，最大限度减少室内回流与涡流生物安全实验室气流组织宜采用上送下排方式，送风口和排风口布置应有利于室内可能被污染空气的排出。生物安全实验室气流组织采用上送下排方式，送风口和排风口布置应有利于室内可能被污染空气的排出。在生物安全柜操作面或其他有气溶胶产生地点的上方附近不应设送风本项目生物安全柜操作面上方附近不设送风口。高效过滤器排风口应设在室内被污染风险最高的区域，不应有障碍。高效过滤器排风口设在室内被污染风险最高的区域，无应障碍气流组织上送下排时，高效过滤器排风口下边沿离地面不宜低于0.lm，且不宜高于0.15m；上边沿高度不宜超过地面之上0.6m。排风口排风速度不宜大于lm/s。本项目高效过滤器排风口设计下边沿离地面不低于0.lm，且不高于不超过地面之上0.6m。排风口排风速度不大于lm/s。《病源微生物实验室生四级实验室应为实验室仪器设备的安装、清洁和维护、安全运行提供足够的空间。本项目为实验室仪器设备的安装、清洁和维护、安全运行提供足够的空—11—物安全通用准则》（WS233-20要求实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设备和物品。本项目实验室有足够的空间和台柜等摆放实验室设备和物品。在实验室的工作区外应当有存放外衣和私人物品的设施，应将个人服装与实验室工作服分开放置。本项目实验室外设有更衣室，将个人服装与实验室工作服分开放置。进食、饮水和休息的场所应设在实验室的工作区外。本项目规定进食、饮水和休息的场所在实验室的工作区实验室墙壁、顶板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得在实验室内铺设地毯。本项目实验室墙壁、顶板和地板光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面实验室台（桌）柜和座椅等应稳固和坚固，边角应圆滑。实验台面应防水，并能耐受中等程度的热、有机溶剂、酸碱、消毒剂及其他化学剂。本项目实验室台（桌）柜和座椅等稳固和坚固，边角圆滑。实验台面应防水，并能耐受中等程度的热、有机溶剂、酸碱、消毒剂及其他化学剂。应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并应不妨碍逃生和急救。台（桌）柜和设备之间应有足够的间距，以便于清洁。本项目实验室设备、台柜、物品等根据工作性质和流程合理摆放，避免相互干扰、交叉污染，并不妨碍逃生和急救。台（桌）柜和设备之间有足够的间距，以便于清洁。实验室应设洗手池，水龙头开关宜为非手动式，宜设置在靠近出口处。本项目实验室设洗手池，水龙头开关为非手动式，设置在靠近出口处。实验室的门应有可视窗并可锁闭，并达到适当的防火等级，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。本项目实验室的门有可视窗并可锁闭，并达能够到适当的防火等级，门锁及门的开启方向不妨碍室内人员逃实验室可以利用自然通风，开启窗户应安装本项目自然通风的—12—防蚊虫的纱窗。如果采用机械通风，应避免气流流向导致的污染和避免污染气流在实验室之间或与其他区域之间串通而造成交叉污染。实验室可开启窗户安装防蚊虫的纱窗。机械通风的实验室，能够避免气流流向导致的污染和避免污染气流在实验室之间或与其他区域之间串通而造成交叉污染。应保证实验室内有足够的照明，避免不必要的反光和闪光。本项目实验室内有足够的照明，能够避免不必要的反光和闪光。实验室涉及刺激性或腐蚀性物质的操作，应在30m内设洗眼装置，风险较大时应设紧急喷淋装置。本项目在涉及刺激性或腐蚀性物质的操作的30m内设洗眼装置，风险较大时应设紧急喷淋装置。若涉及使用有毒、刺激性、挥发性物质，应配备适当的排风柜（罩）。本项目实验室设有通风柜应设应急照明装置，同时考虑合适的安装位置，以保证人员安全离开实验室。本项目设应急照明装置，同时考虑合适的安装位置，以保证人员安全离开实验室。应满足实验室所需用水。本项目设计应满足实验室所需用水。给水管道应设置倒流防止器或其他有效的防止回流污染的装置；给排水系统应不渗漏，下水应有防回流设计。本项目给水管道设置倒流防止器；给排水系统不渗漏，下水有防回流设计。应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。本项目配备适用的应急器材，包括消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。必要时，可配备适当的消毒、灭菌设备。本项目配备适当的消毒、灭菌设备。大气[2021]65号）的要求，企业加强挥过二级活性炭吸附装置处理后通过楼顶40m高排气筒P1排放。综上分前挥发性有机物治理突出问题的通知》（环大握党中央提出的要“加快形成以国内大循环为主体、国内国际双循环相互促进的新发展格局”的重大战略方向。大力推进科技创新是支撑环新发展格局的大势所趋，且坚持依靠科技创新，持续提升自主创新能力是在新一轮全球竞争中占据先机的基础。有效落实省委主要领导对开发五指山猪作为模式动物的相关指示要求，实现猪种质精确育种、模型研发等模型保存与繁育基地项目，项目建设内容包括猪精准育种与模型研发中心和猪种质资源与模型保存与繁育基地两个部分。猪精准育种与模型研发中心建设用地选址于海南三亚市崖州湾科技城内，猪种质资源与模型保存与本次评价范围为猪精准育种与模型研发中心部分（以下简称“本项约24571m2。地上建筑为猪精准育种与模型研发中心一栋，地面7层，总面积为5821m2，作为人防地库、停车及设备用房。建设周期24个月。研发中心下设大数据平台、精准育种平台、生物医药猪研究平台、生物材料名称数量单位总用地面积12803m2总建筑面积24571m2其中计容建筑面积18750m2其中猪种质创新中心大楼18350m2其他400m2不计容建筑面积5821m2地上总建筑面积18750m2地下建筑面积5821m2容积率%绿化率40%机动车停车数个非机动车停车数个表7猪精准育种与模型研发中心布序号楼层功能房间名称面积（㎡）1样本库区耗材库、试剂库、洗消间、冰箱库、液氮库、样本处理室、数据处理室3100设备机房纯水机房、变配电间、消防控制室、网络机房、柴油发电机房、公共仪器平台展厅等展示厅、大堂、贵宾接待室、值班室、洁物暂存、卫生间、危废暂存间2二层大数据平台括服务机房、存储机房、测试机房、备办公室2850会议区会议室、设备机房、卫生间3三层人才培训基地男更、女更、残体暂存、行政办公室、多媒体教学、研讨室、卫生间等22004四层、五层生物医药猪研究平台数据处理室、研讨室、机房、卫生间53005六层精准育种平台数据处理室、研讨室、机房、卫生间26507七层生物材料产品开发平台GMP、CAR-T6地下一层排风机房、液氮机房、消防水泵间、消防水池、生活水泵房、空调水房、地下车库5821合计24571序号楼层平台名称功能定位备注1二层大数据平台大数据平台构建用于数据采集、数据处理、数据存储及数据仓库的建设不设实验室2三层人才培训基地人才培训基地包含学生临床前动物实验、医师临床前培训、医疗器械评价等主要进行动物临床手术展示3五层生物医药猪研究平台生物医药猪研究平台工作内容包括遗传资源生理生化指标分析、DNA样本遗传多样性特征评价，重大功能基因发掘，重大功能基因评价、基因编辑的功能效应评价，不涉及转基因培育及检测等内容涉及生物实验室级别为一级生物安全实验室4六层精准育种平台猪精准育种平台下设7个实验研究区，采用猪精准制备系统主要针对宝贵的猪遗传种质资源开展精液、胚胎、细胞系、肠道微生物及其代谢物与次生代谢物冷冻保存，以多组学（表不涉及微生物实验—16—为基础开展猪大数据研究，遗传解析猪的复杂性状，为猪精准育种和医学转化技术创新提供重要支持，为国家生猪种业提供技术支撑，加快推进我国生物医药发展进程5七层生物材料产品开发平台生物材料产品开发平台主要为建设小型猪的人类疾病动物模型研发平台，创制人类重大疾病的动物模型，以小型猪为模式动物研发新型生物材料及药物评价模型。生物材料产品开发平台实验包括DNA提取细胞培养实验及CAR-T实验。DNA提取实验、细胞培养实验、培养细胞冻存及复苏在GMP车间内进行，CAR-T实验在CAR-T试验区内进行涉及生物实验室级别为一级生物安全实验室项目主要内容备注主体工程科研试验楼猪精准育种与模型研发中心用地面积约12803m2，总建筑面积约24571m2。地面7层，地下建筑1层。研发中心下设大数据平台、精准育种平台、生物医药猪研究平台、生物材料产品开发平台、才培训基地五大平台。新建公用工程供水新鲜水：源引自园区市政供水管网；纯水：实验过程所需纯水由纯水机制备。新建排水本项目采用雨污分流，雨水排入市政雨水管网。蒸汽灭菌废水、实验器具二次清洗废水、纯水制备排浓水排入自建一体化污水处理设施进行处理后与经化粪池处理后排入市政管网，最终排入崖城水质净化厂进行处理。新建供电由市政电网提供。新建供热制冷办公区及实验室夏季制冷冬季供暖采用中央空调。新建环保工程废气治理工程本项目生物医药猪研究平台、精准育种平台实验产生挥发性有机废气经各实验室中设置的通风橱排入二级活性炭吸附装置处理后处理后经楼顶1根40m高排气筒P1排放；生物材料产品开发平台中的DNA提取实验、细胞培养实验、培养细胞冻存及复苏实验在GMP车间内进行，产生挥发性有机废气全部排入二级活性炭吸附装置处理后处理后经楼顶1根40m高排气筒P1排放；生物医药猪研究平台中的慢病毒的包装和浓缩实验及CAR-T实验工艺涉及的微生物废气经生物安全柜过滤后经楼顶1根40m高排气筒P2排放；柴油发电机组燃油废气通过烟道引至楼顶经40m高P3排放；停车场废气无组织排放。新建废水治理工程蒸汽灭菌废水、实验器具二次清洗废水、纯水制备排浓水排入自建一体化污水处理设施进行处理后与经化粪池处理后排入市政管网，最终排入崖城水质净化厂进行处理。新建噪声治理工程本项目选用低噪设备，合理布局，设置减振基础等。新建固废治本项目实验废液、实验沾染废物、废培养基、废活性炭等集中新建—17—理工程收集后交由有资质单位处理；废包装材料、废离子交换树脂集中收集后，由厂家回收；生活垃圾定期由环卫部门处理。等多种类型保存形式相互配套。保存方式以超低温冻保存为主。同时开展术过程展示，不涉及活体实验，实验猪由繁育基地提供，临床手术展示前本项目实验所需样品大部分来自于生物谷内猪种质资源与模型保存与序号服务范围实验项目实验能力1精准育种平台-猪遗传种质资源冷冻保存精液10000剂/年胚胎5000枚/年细胞系5000支/年肠道微生物10000份/年代谢物与次生代谢物10000管/年DNA5000管/年2生物医药猪研究平台基因打靶细胞筛选与鉴定慢病毒的包装和浓缩分离猪神经干细胞及冻存3生物材料产品开发平台DNA提取实验50次/年细胞培养实验50次/年培养细胞冻存及复苏50次/年CAR-T药物实验50次/年4人才培训基地动物临床手术过程展示50床/年序号名称数量（台/套）大数据中心1高效计算节点602大内存计算节点6人才培训基地4国产模拟训练器85专业内镜集成系统86多媒体设备3生物医药猪研究平台784℃冰箱309-25-40℃低温冷柜30荧光定量PCR仪2冷冻台式离心机6小型台式离心机冷冻研磨仪2金属浴5梯度PCR仪6全自动核酸提取仪1全自动凝胶成像仪2化学发光成像系统2核酸蛋白测定仪220移液器50021生物安全柜322通风橱523步入式通风柜224超净工作台325恒温摇床526制冰机427全自动移液工作站128高压灭菌锅629超声波破碎机130恒温培养箱531高温干燥箱332超速离心机233高速离心机234流式细胞分选仪135流式细胞分析仪136超分辨共聚焦显微镜137数字PCR仪138多功能微孔板检测仪139电动显微操作仪440全自动荧光体视显微镜241体视显微镜2042细胞融合仪243超低温冰箱44液氮罐45培养箱2546离心机47细胞电转仪248全自动细胞计数器3—19—49安全柜50倒置荧光显微镜8精准育种平台51生物安全柜652CO2细胞培养箱653CO2细胞培养箱（低氧）354时差培养箱155高通量细胞成像微孔板检测仪156低速细胞离心机657常温离心机58掌上离心机459小型冷冻离心机560大容量台式高速冷冻离心机361移液枪3062电动多道移液器363移液管电动移液器864细胞计数仪265细胞核转染系统166倒置荧光显微镜267全自动倒置荧光显微镜268恒温水浴锅569超分辨率激光共聚焦显微镜170双光子共聚焦显微镜171组织透明化-聚合系统172组织透明化-组织清除系统173激光片层扫描系统174全光谱流式细胞仪175流式细胞仪分析分选系统176显微操作系统（液压）277显微操作系统（电动）278体视显微镜2079细胞融合仪2电融合仪1高效基因转染系统1便携式恒温培养箱3金属加热板6正倒置一体电动化智能显微成像系统1自动移液工作站1染色体核型分析系统1超低温冰箱3-80℃实验室冰箱2自动注射仪290压电破膜仪1程控水平拉制仪1超微量灌注系统1点针细胞电穿孔仪1超速离心机2高速冷冻离心机2高通量微滴芯片式数字PCR仪1高通量生物样品珠式研磨仪1生物污染快速处理仪1大通量核酸提取仪1超声波细胞破碎仪1超纯水系统1涡旋振荡器3超净工作台3pH计2加热磁力搅拌器2超微量分光光度计1制冷加热型金属浴3恒温水浴锅3生物安全柜5组织破碎仪1184L液氮罐520L液氮罐24℃冷藏箱5上冷藏下冷冻双温箱5低温冰箱8微生物培养箱5灭菌锅1超声清洗机1烘箱2压力蒸汽灭菌器1干热灭菌器1液氮干式运输罐1液氮转移罐1全功能微孔板检测仪1蛋白垂直转印系统1快速蛋白半干转印系统1干式转印系统1全自动印迹系统1四色荧光化学发光凝胶成像系统1荧光定量PCR仪2梯度PCR仪1多头梯度PCR仪2核酸蛋白定量仪1核酸预制凝胶电泳2台式全温振荡培养箱1卧式全温振荡培养箱1—21—三层组合式全温振荡培养箱1拉针仪1程序拉针仪1锻针仪1磨针仪1渗透压仪1分析天平2全自动冻精细管灌装封口一体机1冻精生产程序冷冻仪1液氮熏蒸冻精细管托架217℃数控恒温猪精液保存箱1CASA精子分析系统1生物材料产品研发平台柱体1及填料1-粗纯化1柱体2及填料2-粗纯化1柱体3及填料3-精纯化1高效液相2-3台2体视镜4倒置显微镜4超低温冰箱pH计1CO2培养箱电穿孔系统1生物安全柜2电转移仪1定制恒温热台超净工作台20基因扩增仪（PCR仪）4细胞培养便携式电动移液装置电子分析天平1电子天平1制冰机1台式离心机2低温冷冻台式离心机1蛋白电泳仪2超纯水仪1液氮罐5二氧化碳与氮气送气系统4海尔医用冷藏箱5多功能变温摇床1水平恒温摇床1恒温水浴锅4公共设备活性炭吸附装置（180000m3/h）1一体化污水处理设备1制氮机（30L/h）1序号材料名称形态包装规格用途年使用量存储位置最大存储量1乙二醇液体500ml/瓶防冻剂试剂库2瓶2二甲基亚砜液体5ml/瓶防冻剂、有机溶剂3无水乙醇液体500ml/瓶分子提纯30瓶4丙二醇液体500g/瓶防冻剂2瓶5链霉蛋白酶裂开蛋白质的肽键4瓶6矿物油液体包埋胚胎培养物50瓶7透明质酸水透析明质酸8肝素液体2ml/瓶抗凝剂9谷氨酰胺5g/瓶催化酰基转移反应的转移酶2瓶链霉素100g/瓶防止细菌污染酚红25g/瓶用于染色青霉素100g/瓶防止细菌污染葡萄糖500g/瓶提供能量FBS液体100ml/瓶胚胎体外培养2瓶TCM199（1×)组织培养基稀释液液体500ml/瓶配置细胞培养液20瓶BSA牛血清250g/瓶肽酶2瓶NaH2PO4磷酸二氢钾液体250g/瓶品质改良级、缓蚀剂氯化钾500g/瓶平衡调节电解质EGF表皮生长因子2.5mg/瓶硌氨酸磷酸化结合位点20EAA（50×)氨基酸补剂100ml/瓶气相色谱固定液60瓶2瓶21NaHCO3500g/瓶自配培养基调节PH22FSH促卵泡生长激素5mg/瓶促进卵泡成熟2瓶2瓶23IGF胰岛素生长因子5mg/瓶促进胚胎生长2瓶24LH促黄体生长因子5mg/瓶促进卵泡成熟2瓶25生理盐水500g/瓶生理盐水600瓶25瓶26丙酮酸钠溶液液体100ml/瓶细胞培养添加25瓶2瓶27NaCl500g/瓶配置生理盐水28丙酮酸钠5g/瓶测定乳酸脱氢酶的底物29TCM199（1×)组织培养基稀释液液体500ml/瓶配置细胞培养液30BSA牛血清250g/瓶肽酶20瓶31NaH2PO4磷酸二氢钾液体250g/瓶品质改良级、缓蚀剂30包200瓶32氯化钾500g/瓶平衡调节电解质30包33EGF表皮生长因子2.5mg/瓶硌氨酸磷酸化结合位点34EAA（50×)氨基酸补剂100ml/瓶气相色谱固定液2盒35NaHCO3500g/瓶制备钩端螺旋体培养基36FSH促卵泡生长激素5mg/瓶促进卵泡成熟2瓶37IGF胰岛素生长因子5mg/瓶促进胚胎生长2瓶38LH促黄体生长因子5mg/瓶促进卵泡成熟2瓶39NaCl500g/瓶配置生理盐水2瓶40丙酮酸钠5g/瓶测定乳酸脱氢酶的底物2瓶41HEPPS生物缓蚀剂500g/瓶检测蛋白20瓶42乳酸钠25g/瓶防冻剂50瓶4375%酒精液体500ml/瓶用于消毒5000瓶20瓶44FastqPCRMIX液体10ml/包用于荧光定量PCR30包2瓶45TaqMix液体10ml/包用于染色30包46GelRed荧光核酸凝胶染色试剂液体2ml/瓶47GelExtractionkit凝胶提取试剂盒液体50次/盒分离DNA2盒48小粒质DNA提取试剂盒液体50次/盒提取DNA800盒49琼脂糖500mg/瓶配琼脂糖凝胶电泳50核酸提取试剂盒液体提取DNA等51cDNA合成的反应液液体50次/盒合成cDNA52Medium199液体500ml/瓶配置细胞培养液50瓶20瓶53培养基500g/瓶用于培养细胞400瓶54LB琼脂RNA提取试剂盒500g/瓶用于培养细胞2袋/a55PBS液体500ml/瓶用于细胞培养2000瓶2瓶56DMEM液体500ml(瓶）用于细胞培养1000瓶2瓶57DMEMKnockout液体500ml(瓶）用于细胞培养200瓶58临床级无动物源基础培养基液体500ml(瓶）用于干细胞培养50瓶59NEAA（细胞培养添加物）液体100ml(瓶）用于细胞培养20瓶60L-谷氨酰胺液体100ml(瓶)用于细胞培养612-甲氧基雌二醇液体100ml(瓶)用于细胞培养62Gibco青链霉素双抗液体100ml(瓶)用于细胞培养63细胞培养用血清液体500ml(瓶）用于细胞培养250瓶64异氟烷液体100ml/瓶用于动物呼吸麻醉300瓶0.05%Trypsin-EDTA（1X）胰酶液体100ml/瓶用于细胞培养50瓶Trypsin-EDTA(0.25%)液体100ml/瓶用于细胞培养20瓶强力霉素粉末20mg/瓶用于细胞筛选20瓶限制性核酸EcoRⅠ粉末10MG/瓶载体构建50瓶乙二胺四乙酸四钠粉末250g/瓶用于精液冷冻2瓶碳酸氢钠粉末500g/瓶用于精液冷冻2瓶二水柠檬酸钠粉末500g/瓶用于精液冷冻2瓶氯化钾粉末1000g/瓶用于精液冷冻73柠檬酸粉末250g/瓶用于精液冷冻4瓶74三羟甲基氨基甲烷粉末500g/瓶用于精液冷冻2瓶75海藻糖粉末500g/瓶用于精液冷冻2瓶76丙三醇液体500ml/瓶用于精液冷冻5瓶77精液液体瓶装用于实验10000剂冷库78胚胎瓶装用于实验5000枚50枚79细胞系液体瓶装用于实验5000支50支肠道微生物液体瓶装用于实验10000份代谢物与次生代谢物液体瓶装用于实验10000管DNA液体瓶装用于实验5000管50管实验猪//用于实验30头不储存/二氧化氯消毒粉粉末25kg/袋废水处理污水处理站活性炭25kg/袋废气处理0.2t不储存/柴油液态200kg/桶提供实验室动力0.38t/a柴油发电机房序号名称主要理化性质1乙二醇空气=1）：未确定；熔点(ºC）：-13；5.沸点(ºC,常压）：196-198;沸点(ºC,8mmHg86-87；闪点(ºC110；爆炸下限（%,V/V3.2；爆炸上限（%,V/V）：15.3；自燃点(ºC）：412.8；毒性：大鼠、豚鼠经口LD50分别为8.54g/kg、6.61g/kg，小鼠经口LD5013.79mL/kg。人体LD约1.4mL/kg或100mL。2二甲基亚砜性状：无色黏稠透明油状液体或结晶体。具弱碱性，几乎无臭，稍带苦味。；密度（g/mL,20/4℃)：1.1；相对蒸汽密度（g/mL,空气=12.7；熔点(ºC）：18.45；沸点(ºC,常压）：189；闪点(ºC,开口）：28.5；属微毒类，大鼠经口LD50为18g/kg。但对人体皮肤有渗透性，对眼有刺激作用。3无水乙醇无色澄清液体。有灼烧味。易流动。极易从空气中吸收水分，能与水和氯仿、乙醚等多种有机溶剂以任意比例互溶。能与水形成共沸混合物(含水4.43%)，共沸点78.15℃。相对密度(d204)0.789。熔点-114.1℃。沸点78.5℃。4丙二醇性状：无色黏稠稳定的吸水性液体，几乎无味无臭，易燃，低毒；沸点(ºC,101.3kPa）：187.3；熔点(ºC,流动点）：-60；相对密度（g/mL,20/20ºC1.0381；相对密度（20℃,4℃)：1.0362；闪点(ºC,闭口）：98.9；闪点(ºC,开口）：107；燃点(ºC）：421.1；临界温度 (ºC）：351；临界压力（MPa）：5.9；爆炸下限（%,V/V）：2.6；爆炸上限（%,V/V12.5；毒性分级：低毒；急性毒性口服-大鼠LD50:20000毫克/公斤;口服-小鼠LC50:32000毫克/公斤。5NaHCO3俗称“小苏打”、“苏打粉”、“重曹”，白色细小晶体，在水中的溶解度小于碳酸钠。是一种工业用化学品，可能存在毒性。固体50℃以上开始逐渐分解生成碳酸钠、二氧化碳和水，440℃时完全分解。碳酸氢钠是强碱与弱酸中和后生成的酸式盐，溶于水时呈现弱碱性。6磷酸二氢钾色至白色结晶或结晶性粉末，无臭。相对密度2.338。易溶于水，不溶于乙醇。水溶液呈酸性。7氯化钾性状：无色晶体，属立方晶系。密度（g/mL,25/4℃)：1.988;熔点(ºC790;沸点(ºC,常压）：1500;折射率：1.334;闪点(ºC）：1500;溶解性：8乙二胺四乙酸四钠密度6.9g/cm3；沸点：614.2ºCat760mmHg；熔点：>300°C(lit.)；分子量：380.170；闪点：325.2ºC9三羟甲基氨基甲烷性状：白色结晶或粉末；密度（g/mL,25/4℃)：0.865；熔点(ºC171-172℃;沸点(ºC,常压）：136-140℃/1.3kPa；闪点(ºC）：29。丙三醇无色无臭的黏稠状液体，有甜味；沸点(ºC,101.3kPa）：290，182（2666pa熔点(ºC,流动点20；密度：1.3±0.1g/cm3；闪点(ºC,闭口）：177；燃点(ºC）：523(Pt上)；溶解性：能吸收硫化氢、氢氰酸、二氧化硫。能与水、乙醇相混溶，1份该品能溶于11份乙酸乙酯、约500份乙醚，不溶于苯、二硫化碳、三氯甲烷、四氯化碳、石油醚、氯仿、油类。易被脱水，失水生成双甘油和聚甘油等。氧化生成甘油醛和甘油酸等。在0℃下凝固，形成有闪光的斜方结晶。在温度150℃左右时，会发生聚合。与无水醋酸酐、高锰酸钾、强酸、腐蚀剂、脂肪胺、异氰酸酯类、氧化剂不能配伍；LD50：12600mg/kg(大鼠经口)。二氧化氯性状：黄绿色或黄红色气味。有类似氯气和硝酸的特殊刺激臭味。液体为红褐色，固体为橙红色；气体密度：3.09g/L；熔点(ºC）：-59；沸点(ºC,常压）：11；溶解性：易溶于水，溶于碱溶液、硫酸。口服-大鼠LD50:292毫克/公斤;吸入-大鼠LDL0:500PPM/15分,对呼吸器官黏膜和眼有刺激作用。序号名称单位年用量1一次性橡胶手套箱2PE手套箱203一次性塑料滴管箱5045ml一次性注射器箱2052.5ml一次性注射器箱20—27—610mL一次性注射器箱50720mL一次性注射器箱30860mL一次性注射器箱209胶头滴管个1ml移液枪枪头箱300200ul移液枪枪头箱200100ul移液枪枪头箱20010ul移液枪枪头箱2001ul移液枪枪头箱20010ml移液管箱605ml移液管箱6010ml离心管箱5ml离心管箱302.5ml离心管箱30201.5ml离心管箱30211L蓝盖瓶个22500ml蓝盖瓶个232L三角瓶个50241L三角瓶个25500ml三角瓶个26250ml三角瓶个27一次性摇菌管（10ml）箱5028烧杯个50291L量筒个302L量筒个31500ml量筒个32称量纸包5033玻璃棒根34药匙根35包36冻存盒个20037八连管箱2038酒精灯个39箱40自锁式扎带箱141一次性培养皿（90mm）箱5042锡箔纸盒2543洗瓶个6044托盘个204510cm镊子个4612.5cm镊子个4720cm镊子个4810cm手术剪刀把4918cm手术剪刀把50手术刀把51剪耳钳把452搅拌子个53高压灭菌袋包5054盒355保鲜膜箱256研钵个65770uM细胞筛网箱55840uM细胞筛网箱559试管刷个5060广口瓶个61离心管架个62试管架个506396孔细胞培养板箱6448孔细胞培养板箱6524孔细胞培养板箱6612孔细胞培养板箱676孔细胞培养板箱6875T细胞培养瓶箱506925T细胞培养瓶箱7075T细胞培养瓶箱7175T细胞培养瓶箱720.45μm过滤器箱5073PCR管箱50740.22μm过滤器箱50752ml细胞冻存管箱50765ml细胞冻存管箱7750ml无菌管箱507815ml无菌管箱790.5ml冻精细管箱30拇指管箱20无菌纱布袋箱序号名称单位年用量备注1m3/a12226外购2m3/a2304外购3电kWh/a187.245万外购块全部二级以上用电负荷。另设一座150kw柴氧层维也纳公约》、《关于消耗臭氧层物质的蒙特利尔议定书》的规定。得到目前世界绝大多数国家的认可并推荐的主流低温环保制冷剂，广泛用排风由屋顶排至室外，从而实现高空排放（有要求的房间经过净化和过滤），和全直流空调机组，空调箱内设置初、中效及亚高效三级空气过滤器、表次/h和4次/h换气次数计算，送风气流从感染性废弃生物材料、废弃生物材料实验耗材（如玻璃、手套、利器对于微生物实验室具有传染性的器皿及少量具备传染性的污水，必须本项目东侧3号路有一根DN400的市政给水管；南侧6号路有一根项目东侧3号路有一根DN1000的市政雨水管，南侧6号路有一根本项目研究人员人数为300人，根据三亚市统计局发布的《三亚市第七次全国人口普查公报》（2021年5月20人），三亚市全市总人口（常），本项目实验用水主要是蒸汽灭菌用水、器具一次清洗用水、器具二次根据建设单位提供资料，蒸汽灭菌用水为纯水，1台高压蒸汽灭菌锅）；根据建设单位提供资料，器具清洗用水为纯水，分为两次，一次清洗综上，本项目实验用纯水总计为0.68m3/d（136m³/a）。本项目实验用纯化水制备。纯水机制水效率为60%，排浓水率为40%。制备纯水用自来本项目绿化面积约为5121.46m2，绿化用水使用中水，用水量按（2304m3/a）。综上，本项目自来水总用水量为61.13m3/d（12226m3/a）；中水用水本项目蒸汽灭菌废水、实验器具二次清洗废水、纯水制备排浓水排入自建一体化污水处理设施进行处理后与经化粪池处理后排入市政管网，最终排入崖城水质净化厂进行处理。实验器具一次清洗废水随其产生的危险），）；器具二次清洗用水为纯水，用水量为0.06m³/d（12m³/a），排放量为综上，本项目废水排放量为48.56m³/序号用水环节用水量(m3/d)损耗量(m3/d)排水量(m3/d)排水去向新鲜水纯水1实验用水蒸汽灭菌用水00.070.020.05崖城水质净化厂2一次器具清洗用水0.8300.50.5*（危险废物，不外排）03二次器具清洗用水0.100.0600.064试剂配制用水0.0800.05物，不外排）05纯水机排浓水00000.456生活用水6000487绿化用水000合计61.130.6822.2648.56*为危险废物，不计入消耗量。新鲜水中水0.070.050.06二次器具清洗用水0.680.5一次器具清洗用水试剂配制用水0.45交有资质单位处理0.050.060.550.070.050.06二次器具清洗用水0.680.5一次器具清洗用水试剂配制用水0.45交有资质单位处理0.050.060.550.56生活用水化粪池蒸汽灭菌用水纯水机61.13604860一体化污水处理设备48.5648.56绿化用水崖城水质净化厂序号平台名称实验时间1生物医药猪研究平台1200h/a2精准育种平台1200h/a3生物材料产品开发平台1200h/a本项目建设科技城猪精准育种与模型研发中心大楼1栋，地上7层，人才培训基地；4、5层为生物医药猪研发平台；6层为精准育种平台；7拟建二级活性炭过滤吸附处理装置位于大楼楼顶东侧。拟建危废暂存间设项目实行人车分流，步行人员从场地东侧主入口进入院区；车辆从基地南侧入口进入后经基地南侧的地下停车出入口进入地下停车场；此外，小于4米，转弯半径为9米。消防车道与建筑之间不应设置妨碍消防车操作的树木、架空管线等障碍物。消防车道的坡度不大于8%。为使用者项目功能分区合理，各种流线组织清晰，功能结构紧凑，充分利用土工艺流程和产排污环节本项目为新建项目，主要施工活动为场地平整、打桩、土方开挖、基础建设、主体工程、装饰装修、设备安装等，在一定时间段内都将会对周围环境造成一定的影响，但这种影响一般是可逆的，随着施工期的结束将图3施工期工艺流程图施工期猪精准育种与模型研发中心的“收集保存-评价利用-共享科普”的核心大数据平台：构建可以用于数据采集、数据处理、数据存储及数据仓人才培训基地：才培训基地主要为开展猪种质资源成果展示、各类研发人才的培养以及科普教育提供服务等。主要目的为服务人类健康及相关该系统包括基因操作模块、显微操作模块。整个模块包括DNA提取室，猪精准育种平台：设置7个实验研究区，采用猪精准制备系统主要针血液及其代谢物与次生代谢物冷冻保存，以多组学（表型组、基因组、转生物材料产品开发平台：生物材料研发平台主要分为两部分，第一部第二部分是GMP车间，其主要工艺包括空调净化系统、生产过程工艺管大数据平台构建可以用于数据采集、数据处理、数据存储及数据仓库精准育种平台采用猪精准制备系统主要针对宝贵的猪遗传种质资源开展精液、胚胎、细胞系、肠道微生物及其代谢物与次生代谢物冷冻保存，以多组学（表型组、基因组、转录组、蛋白质组、代谢组等）为基础开展猪大数据研究，遗传解析猪的复杂性状，进行配套检测试验，定时质量安图s遗传材料制备与检测工艺流程及排污节点图在遗传材料入库保存之前，首先需要提交遗传材料描述性信息，明确所属的科目，以及入库保存方式与标准。按照遗传资源的规范和要求，对目录性状进行鉴定，并给予每份拟入库资源一个统一编号，同时将种质的样本接收室及洗消室位于研发中心一楼，样本接收室用于遗传材料的临时存放；洗消室用于实验器材、耗材等清洗、灭菌、消毒；实验器材、耗材先用75%酒精洗消后，再使用纯水进行清洗，高压灭菌锅洗消过程会产生非甲烷总烃G1、实验器具废水W1、实验废液S2、实预处理是在样品处理室内进行试剂配置、存放和遗传材料的预处理；体细胞、干细胞、精液、胚胎、卵母细胞的制备和培养、核酸标准化提取与制备、基大组文库和cDNA文库构建与扩增等内容主要在P1实验室、负压细胞间内进行。主要有精液冷冻保存、胚胎冷冻保存、体细胞保细管标明代码、品种代码、供体号和生产日期等信息。细管冻精制作完成后装入套管中，并标注供体号、冻精数量及生产日期。再用灭菌纱布分类、预处理、冷冻防护液、冰冻储存、化冻操作和组织样本规模化检测样品制备前需进行质量控制检测，合格方可入库保存，具体包括精液精液质量检测通过精子质量分析系统对精子密度、活力、形态、顶体细胞完整性及胚胎分级等。细胞质量检测指标包括的密度、数量、活力、为了保证冷冻样品的质量和活力，需要定期通过胚胎程序化冷冻仪、胚胎玻璃化冷冻仪检测样品的冷冻复苏效果，检测细胞活力、发育潜力等编目、制备、质控、保存效果评价过程在均在封闭实验室内完成，实样本遗传多样性特征评价，重大功能基因发掘，重大功能基因评价、基因Sanger测序一系列分子克隆实验，最终获得测序验证正确的基因打靶载体和gRNA质粒，将正确的质粒大提可以选择对基因打靶载体电转细胞前，将浓缩沉淀的质粒在预冷的离心机内14000rpm离心用移液枪吸弃上清，加预冷的75%酒精洗涤白色沉淀两遍，最后空离弃去酒精溶液，在超净台内风干20min左右待到白色沉淀变成无色透明状后，），液，待到细胞密度达到70-80%进行电转染。以10厘米皿为例，长满后大干净，然后将消化完成的细胞离心弃去消化液，PBS洗涤一遍之后再离心沉淀，用移液枪将细胞沉淀和混好质粒的BufferR溶液混匀注意避免产生的电转参数进行电转，然后将细胞打入含有预热PFF培养基的10厘米皿电转完细胞第二天即可进行分盘，如果使用筛选压力很大的药物如嘌左右，显微镜下一个视野内观察到10-15个细胞为参考进行调整，在PFF这种筛选压力较小的药物作为筛选标记，可以行挑克隆与细胞传代鉴定，首先在显微镜下用Marker笔将细胞克隆标记好，然后在超净台内吸弃PFF培养基加PBS洗涤两遍，对照Marker笔的标记在相应的细胞单克隆位置用消毒后的镊子逐个套上灭菌后的克隆环，往克隆环内滴加2滴0.25%胰酶，消化4-5分钟，套上克隆环后尽量避免挪动细胞培养皿直接在超净台内消化，然后加PF孔板或48孔板PFF贴壁情况不好的话可以提前半小时明胶包被，12小时后给挑取的细胞克隆换液。等3-5天后，24或48孔板内细胞长满后，取PCR鉴定其基因型，剩余细胞正常传代，全部细胞克隆鉴定完毕后集中冻 取液氮中冻存的HEK293FT细胞，迅速置于37℃水浴锅中，用镊子夹住冻存管轻轻晃动，直至细胞完全融化。融化后的细胞，用75%酒精消毒向已消毒的冻存管中加入1mLD10培养液，轻轻吹打冻存管中的细胞，与新鲜培养液混匀后转移至15mL离心管中，200g室温离心4min。弃离心管用0.1%明胶包被培养皿，取对数生长期的HEK293FT细胞，弃培养液使胰酶浸润所有细胞。室温消化，约50%的细胞开始脱落时，沿皿壁加入D10终止消化。晃动培养皿并将培养皿立起，使细胞跟随胰酶终止液留到离心4min，弃上清，使用合适体积的D10重悬。将单细胞悬液接种到包被于生物安全柜中配制转染混合液，加入转染试剂，并加入生物反应器75%酒精溶液及基础培养基（KnockoutDMEM/F12），提前放置于4℃冰从猪子宫中取出胚胎，泡到预冷的PBS中，在超净工作台中，将胚胎转移至预冷的75%酒精中，泡1-2分钟。将胚胎转移至PBS中洗两遍，再将基础培养基中，混匀，用细胞计数板计数，将细胞稀释至106cells/ml，每培养约一周后，细胞悬浮培养长成较大的神经球，将细胞吸取至15ml分钟，取少量于显微镜下观察，消化完成后加入基础培养基终止消化，转速500g，离心5分钟；弃上清，加入猪神经干细胞冻存液，分装至冻存管上述实验过程均在封闭实验室内完成，实验室内均设置通风橱，实验时保证门窗关闭，实验产生的非甲烷总烃G1全部收集后经二级活性炭吸生物材料产品开发平台主要为建设小型猪的人类疾病动物模型研发平台，创制人类重大疾病的动物模型，以小型猪为模式动物研发新型生物材验。DNA提取实验、细胞培养实验、培养细胞冻存及复苏在GMP车间内①取单层细胞，经无钙、镁PBS洗一次，用0.25%胰蛋白酶消化，细⑥取水相，加入2倍体积的预冷无水乙醇，沉淀DNA，混匀-20℃放先将所取得的组织，用D-Hanks或H用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用加入适当的胰蛋白酶和胶原酶，将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2~5）后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一液量1/2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，③置37℃孵箱或室温（25℃温度）下进行放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细2～3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传②按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×1时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，⑥在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃/min的速度，在30~②迅速放入36℃~37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内⑤用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养上述实验均在GMP车间内进行，产生的实验过程产生的非甲烷总烃本项目为免疫细胞研发实验室，样本中不含有传染性物质，不具有挥本项目涉及生物反应，将外购的细胞样本在培养基中放大培养后，进①细胞种子复苏：-80℃冰箱取出保存的大肠杆菌，取适量菌液划线②在超净工作台中挑取单克隆接种到LB液体培养基中，恒温摇床培③发酵种子液接种于发酵罐中进行培养，培养至此实验过程细胞发酵罐为密闭装置，培养液中无有机溶剂，不产生挥发性有机废气，发酵尾气主要为二氧化碳和水蒸气，由发酵罐自带尾气过滤装置过滤后排放。二氧化碳是空气中主要成分之一，不作为污染因子进行评价。本项目发酵尾气中二氧化碳的产生量很小，不会破坏空气正常组此实验会产生微生物废气G2、实验器具清洗废水W1、实验废液S2、当细胞生长至一定体积后，在生物安全柜中，将细胞接种至生物反应于生物安全柜中配制转染混合液，加入药物，并加入生物反应器中，培养结束后，收集细胞培养悬液，经囊式滤器澄清，核酸酶消化后，将培养皿中细胞上清液吸到离心管中，低速离心后，用过滤器过滤。滤液在离心机中进行超速离心，将浓缩液收集分装至出货管中。分装的病此实验生物安全柜中细胞培养过程产生的生物性废气由生物安全柜自外周血单个核细胞（从血液中分离的细胞）输送至实验室，采集的细采用密度梯度离心的方法分离出单个核细胞，采用磁珠分选的方法得细胞数量满足要求时，收集细胞并置换制剂，采用程序降温仪降温，此实验过程细胞扩增产生的生物性废气由生物安全柜自带过滤器处此实验会产生微生物废气G2、实验器具清洗废水W1、实验废液S2、其中，科技成果展示按照成果产出的时间进行陈列展示，包含实验用小型猪新品种培育展示平台、疾病模型猪成果展示平台、异种器官移植供体猪展示平台和人源化基因修饰猪模型展示平台。人才培训基地包含学生临床前动物实验、医师临床前培训、医疗器械评价等。科技交流服务区划分为具体工艺为挑选合适的动物，依据临床使用方法，通过外科手术、相关器械(如多功能手术动力系统、监护仪、无影灯等)和相关药品（如抗生素、生理盐水、碘伏等），进行无菌外科手术演示，观察临床手术操作过变压吸附原理，利用碳分子筛对氧和氮的选择性的是确保吸附塔内分子筛的使用寿命。装有碳分子一个塔工作时，另一个塔则减压脱附。洁净空气进子筛时氧、二氧化碳和水被其吸附，流至出口端的氩和氧。另一塔（脱附塔）使已吸附的氧气、二氧中脱离排至大气中。这样两塔轮流进行，完成氮氧项目运营期从废气、废水、噪声、固体废物等方面展开工程分析项目名称产生环节主要成分排放特征处理方式废气G1使用有机试剂非甲烷总烃经通风橱或GMP收集，通过二级活性炭吸附装置处理后，经楼顶40m高排气筒P1排放。G2生物医药猪研究平台中的慢病毒的包装和浓缩实验及CAR-T实验工艺微生物经生物安全柜过滤后经楼顶1根40m高排气筒P2排放。/柴油发电烟尘经楼顶1根40m高排气筒P3排放。/地下停车场THC无组织排放废水W1二次器具清洗pH、COD、氮、总氮、LAS一体化污水处理设备处理后排入市政管网W2纯水制备BOD、SSW3生活污水PH、COD、氮、总磷、总氮经化粪池静置沉淀后排入市政管网。N空调通风机组、环保设备风机、生活水泵、消防水泵等选用低噪设备，合理布局，设置减振基础等。废包装材料原材料外包装交物资回收部门一次器具清洗废水及实验废液实验全程委托有资质单位处置实验沾染废物实验全程委托有资质单位处置废培养基细胞培养委托有资质单位处置实验动物尸体及组织模拟手术委托有资质单位处置废离子交换树脂纯水制备交由厂家回收利用废活性炭废气处理委托有资质单位处置生活垃圾员工生活由环卫部门收集处理与项关的原有环境污染本项目为新建项目，所在区域目前为空地，该项目涉及区域无遗留环境问题。研发中心场地项目西侧项目北侧项目东侧项目南侧环境质量现状状况公报》数据，2021年，我市环境空气质量优良率为100%、优良天数为年平均浓度为8微克/立方米；可吸入颗粒物（PM10）日平均浓度范围为8~污染物年评价指标现状浓度(μg/m3）标准值(μg/m3）%达标情况PM2.5年平均质量浓度3534达标PM10247034达标SO24607达标NO284020达标CO日平均浓度第95百分位数0.64.0达标O38h平均第90百分位数66达标注：CO单位为mg/m3。为了了解项目区域周边的大气环境现状，根据本项目特点，本项目周边大气环境现状引用《三亚崖州湾科技城综合医院项目环境影响报告书》中的点位采样时间风向气温(℃)三亚崖州湾科技城综合医院项目内下风向东北2.421.462北2.025.159东北2.127.557东北2.325.660北2.220.965东北2.026.361东北27.758东北2.024.162东北2.421.365东北2.125.861东北28.259北2.024.363北2.120.465北25.363东北26.660北23.462东北2.221.463东北2.024.860北27.357东北23.6592月20日第一次北2.522.164北2.226.460北2.327.557东北2.124.3592月21日第一次东北2.221.763北2.025.361东北27.758东北23.260表21监测结果单位采样点位采样时间非甲烷总烃三亚崖州湾科技城综合医院项目内下风向0.790.830.820.810.980.960.930.910.790.810.780.800.670.660.650.670.750.720.700.742月20日第一次0.820.820.830.852月21日第一次0.670.660.690.65表22环境空气质量现状监测情序号点位非甲烷总烃监测时间监测小时极值标准值标准指数超标倍数达标情况1三亚崖州湾科技城2.150.832.00.4150达标2.160.982.00.490达标综合医院项目内下风向2.170.812.00.4050达标2.180.672.00.3350达标2.190.752.00.3750达标2.200.852.00.4250达标2.210.692.00.3450达标非甲烷总烃满足《大气污染物综合排放标准详解》确定的评价标准。项目所2.地表水环境质量现状评价境状况公报》数据，2021年，监测的6个宁远河南塔电站、崖城大桥2个断面水质均为地表水Ⅱ类，满足《地表水环3.声环境质量现状调查环境保护序号名称坐标/m保护对象保护环境功能区相对厂址方位相对厂界距离EN1三亚寰岛实验中学（在建）教育人群二类环境空气功能区西北2三亚寰岛实验小学教育人群西北251m3航天云海居住人群西侧465m4三亚东合逸海郡居住人群西侧5水岭子村居住人群东侧358m3.地下水环境保护目标污染物排放控制标准项目实施过程中主要的大气污染物为施工活动产生的粉尘、扬尘等，粉项目非道路移动施工机械用柴油机排放污染物需满足《非道路移动机械用柴油机排气污染物排放限值及测量方法（中国第三、四阶段）》类别昼间夜间施工期噪声70dB（A）55dB（A）本项目在实验过程中需要用到有机实验试剂的操作均在通风橱或洁净车P1排放。项目非甲烷总烃有组织排放执行《大气污染物综合排放标准》序号污染最高允许排放浓度（mg/m3）最高允许排放速率（kg/h）排放途径排气筒高度（m）执行标准1非甲烷总烃50排气筒P140GB16297-注：P1排气筒高度为40m，其所在建筑物高度为39.3m，排气筒高度不能满足《大气污染物综合排放标准》(GB16297-1996)中“高出周围200m半径范围的建筑5m以上”的要求，非甲烷总烃的排放速率按照50%执行。表26实验室废气无组织排放污染物项目排放限值（mg/m3）限值含义无组织排放监控位置执行标准非甲烷总烃监控点处1h平均浓度值在厂房外设置监控点GB37822-201930监控点处任意一次浓度值本项目污水处理过程产生少了异味，无组织排放。厂界臭气浓度废气执行《恶臭污染物排放标准》（GB14554-93）中“恶臭污染物排放标准污染物项目排放限值（mg/m3）无组织排放监控位置臭气浓度20（无量纲）周界本项目柴油发电机组产生的燃烧废气经排气管接入烟气管道，引至楼顶表28备用柴油发电机及汽车尾气无组织排放控制标准污染物项目最高允许排放浓度mg/m3最高允许排放速率，kg/h无组织排放监控浓度限值排气筒高度m二级排放限值（mg/m3）监控位置颗粒物40周界外浓度最高点SO2550400.40周界外浓度最高点NOX240403.75周界外浓度最高点注：P3排气筒高度为40m，其所在建筑物高度为39.3m，排气筒高度不能满足《大气污染物综合排放标准》(GB16297-1996)中“高出周围200m半径范围的建筑5m以上”的要求，非甲烷总烃的排放速率按照50%执行。本项目蒸汽灭菌废水、实验器具二次清洗废水、纯水制备排浓水排入自建一体化污水处理设施进行处理后与经化粪池处理后的生活污水一同排入市政管网，最终排入崖城水质净化厂进行处理。污水排放执行项目废水排放标总磷、总氮、总余氯参照执行《污水排入城镇下水道水质标准》（GB/T污染物pHCODBOD5氨氮总磷总氮总余氯LAS排放标准6~940050030045870820本项目运营期北侧、南侧、西侧厂界噪声执行《工业企业厂界环境噪声排放标准》（GB12348-2008）2类标准，东侧厂界噪声执行《工业企业厂界环境噪声排放标准》（GB12348-2008）4类标准。其厂界环境噪声标准限值表30工业企业厂界环境噪声排放限值单位：dB（A）声环境功能区类别昼间夜间2类60504类7055一般工业固废执行《一般工业固体废物贮存和填埋污染控制标准》(GB18599-2020)中相关要求进行妥善贮存；医疗废物的存储应满足《医疗卫生机构医疗废物管理办法》等相关文件及规范的要求；危险废物在危废间内暂存总量控制指标“十四五”期间，国家将继续实施主要污染物总量控制制度，将化学需氧量、氨氮、氮氧化物、挥发性有机物等4项污染物作为约束性指标进行考废水：根据项目周围的环境特征，结合本项目的特点，本项目实验楼实验人员生活污水与实验清洗废水收集后经预处理后进入市政污水管网，最终凡是需要向环境排放各种污染物的单位或个人，都必须事先向环境保护部门办理申领排污许可证手续，经环境保护部门批准后获得排污许可证后方能向施工期环境保护措施建设项目施工期大气污染物主要是扬尘及装修废气，根据《海南省大气①土方工程，包括土方的开挖、运输、平整、压实等施工过程，遇到干燥、大风天气，易起尘，应洒水压尘，并尽量缩短起尘施工时间。遇到四级②工地道路实施洒水抑尘。工地内裸露地面，晴天起风天气，扬尘严重③施工过程产生的弃料及其他建筑垃圾应及时清运，在工地内临时堆置得超过车辆槽帮上沿，车斗应用苫布遮盖严实。苫布边缘至少要遮住槽帮上料、渣土或废弃物输送至地面或地下楼层时，可从升降梯打包装框搬运，不（9）规范车辆运输管理。车辆应按照批准的路线和时间进行物料、渣土和垃圾的运输。建设单位应监督施工单位使用排放合格的移动机械。应配备降尘防尘装置。做好工地周围保洁工作。保洁责任区宜扩大至施工工（11）合理安排施工时间。避开大风天气，遇到可造成扬尘污染的风力（12）鼓励机动车辆使用清洁能源，并对施工车辆经常进行维修，减少（13）使用环保涂料。环保涂料苯浓度很低，可减少苯挥发对空气质量（14）通风。装修期间及刚完成装修后，应开窗，让室内的甲苯、二甲苯、氨、甲醛等污染物尽量扩散，不宜过早入住。根据有关文献（史军，除甲醛，竹炭绿植真的给力吗，中国环境报，2011.10.31第4版），通风3个③在施工承包合同中明确施工单位的扬尘污染防照扬尘污染防治措施施工的，应当要求施工单位立即改正，并及时报告建设（17）施工单位制定具体的扬尘污染防治实施方案，落实下列扬尘污染防治措施：①在施工工地设置硬质封闭围挡，并采取覆盖、分段作