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文档简介

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理显色反响颜色反响染色剂有机物紫色双缩脲试剂蛋白质橘黄色/红色苏丹Ⅲ/Ⅳ脂肪砖红色斐林试剂复原糖蓝色碘液淀粉糖类实验步骤1、复原糖的检测〔1〕取一支试管1，注入2mL梨匀浆；〔2〕另取一支试管2，注入1mL斐林试剂甲液和1mL斐林试剂乙液，振荡，混合均匀，制成斐林试剂；〔3〕将试管2中刚配制好的斐林试剂注入试管1中，振荡混匀；〔4〕将试管放入烧杯中水浴加热，观察颜色变化。2、脂肪的检测〔1〕取材：取一片花生切片，选择最薄切片放在载玻片中央；〔2〕染色：滴加2-3滴苏丹Ⅲ染液染色3分钟，用吸水纸吸去染液；〔3〕去浮色：再滴加1-2滴体积分数50%的酒精溶液，洗去浮色；〔4〕制片与观察：吸去酒精，滴加一滴清水，盖上盖玻片，制成临时装片，在显微镜下找到子叶最薄处，寻找橘黄色脂肪颗粒3、蛋白质的检测取一支试管，参加2mL稀蛋清，再参加双缩脲试剂A1mL，振荡摇匀，再参加双缩脲试剂B4滴，振荡摇匀，观察颜色变化。注意斐林试剂极不稳定，要现配现用，先混合后一次参加。甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液

乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液

使用时，将4—5滴乙液滴入2ml甲液中，配完后立即使用。用斐林试剂鉴定可溶性复原糖时，溶液的颜色变化过程：

浅蓝色→棕色→砖红色沉淀蛋白质鉴定原理

鉴定生物组织中是否含有蛋白质，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。在碱性溶液中，双缩脲能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反响叫双缩脲反响。

由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反响。紫色注意双缩脲试剂A：

质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液

双缩脲试剂B：

质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液使用时，先参加2ml双缩脲试剂A，振荡摇匀；再参加3—4滴双缩脲试剂B。

斐林试剂双缩脲试剂鉴定物质可溶性还原性糖蛋白质或多肽成

分甲液乙液A液B液0.1g/mlNaOH溶液0.05g/mlCuSO4溶液0.1g/mlNaOH溶液0.01g/mlCuSO4溶液添加顺序甲、乙两液等量混合均匀后再注入(即现配现用)先加A液1ml，摇匀；再加B液3~

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