微生物室臭氧灭菌验证方案与报告

第1页共8页贵州益佰制药股份有限公司微生物室臭氧灭菌验证报告1.概述臭氧（O3）是一种广谱高效灭菌剂，具有强烈杀菌消毒作用。在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O2）和单个氧原子（O），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为氧分子（O2），不存在任何有毒残留物，为无污染消毒剂。2.验证目的微生物室使用臭氧灭菌的效果直接影响到产品的品质。为确保臭氧灭菌的有效性，减少对员工身体健康的损害，通过对在一定的时间微生物室内臭氧浓度的测试，验证微生物室内臭氧浓度是否达到标准规定；并通过沉降菌试验，确定臭氧对微生物的消毒效果。因此，制订本验证方案进行验证。3.验证职责3.1品研部化验员3.1.13.1.2负责记录并整理数据3.2品研部主管3.2.1负责监督验证方案的实施3.2.2负责对验证方案有效性的确认4．仪器臭氧检测仪：FX6000L-0型固定式臭氧检测仪，生产厂家：深圳市华利奥电子有限公司。测试原理：检测管测试采用电化学原理，直读分析数据。检测范围：0~50PPm。分辨率：0.01ppm。5．验证内容5.1测试一：微生物室臭氧浓度达到消毒浓度所需时间5.1.1臭氧消毒浓度要求微生物室臭氧浓度达到20mg/m3（即9.33ppm）的消毒浓度。5.1.2测试方法臭氧发生器开始工作时计时，期间每隔5分钟记录当下的臭氧浓度，微生物室臭氧浓度达到消毒浓度（9.33ppm）后继续监测10min后关闭臭氧发生器；5.1.3连续监测2次5.1.4数据记录，见附表15.2测试二：臭氧浓度降低到作业现场允许浓度所需时间5.2.1允许人员进入作业的臭氧浓度要求臭氧浓度降低浓度0.2mg/m3（即0.93ppm），为允许人员进入作业的浓度要求。5.2.2测试方法臭氧达到消毒浓度20mg/m3（即9.33ppm）后关闭臭氧发生器，期间每隔10分钟记录当下的臭氧浓度，臭氧浓度降低到作业现场允许浓度（0.93ppm）后继续检测20min，停止数据记录；5.2.3连续监测2次5.2.3数据记录，见附表25.3臭氧消毒效果验证5.3.1验证方法5.3.1.1培养基大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）培养基制备：将培养基加热溶化，冷却至45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15m1。制备好的培养基平皿应在2~8℃环境中存放，存放时间不可超3天。5.3.1.2试验条件环境温度16～28℃；相对湿度45～65%；室内无外界强气流，无强烈阳光照射或其他热辐射。消毒时关闭排风设施，使整个被消毒的微生物室空气通过净化系统风管形成循环，臭氧发生器开始工作。5.3.1.3测试步骤5.3.1.3.1沉降菌的对照试验在臭氧发生器开启灭菌前，关闭微生物室的排风设施。依据GB/T16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法确定采样点和采样数。在微生物室内取3个采样点放置3只培养皿，放置点离地0.8m左右，打开培养皿盖，暴露30分钟后，盖上培养皿，取出所有培养皿，倒置放置。5.3.1.3.2灭菌后沉降菌测试依据5.2臭氧浓度降低到作业现场允许浓度的时间，进入消毒间。参照5.3.1.3.1的采样点和采样数进行测试。5.3.1.3.3全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温箱中30~35℃培养48~72小时，观察结果并将结果记录。5.3.2数据记录见附表3、45.3.3验证效果判定标准依据GB50457-2008医药工业洁净厂房设计规范。沉降菌：1万级，沉降菌≤3个/皿；10万级，沉降菌≤10个/皿判定为合格。沉降菌：1万级，沉降菌＞3个/皿。10万级，沉降菌＞10个/皿，判定为不合格。检测人：日期： 复核人：日期：检测人：日期： 复核人：日期：结论：微生物室臭氧浓度验证报告结论通过对微生物室开启臭氧发生器，设定重复两次进行臭氧浓度测试，验证微生物室内臭氧浓度达到标准浓度所需的时间；在关闭臭氧发生器后，重复两次测试微生物室臭氧浓度降低到人员可进入作业所需的时间。并通过沉降菌试验，确定臭氧对微生物的消毒效果。由以上附录1至附录4的数据记录表可得，微生物室臭氧发生器开启到达到臭氧消毒浓度9.33ppm时需要30min，降低到人员可进入作业的臭氧浓度0.93ppm时需要60min，且沉降菌试验表明消毒有效。最终确定微生物室臭氧灭菌开启时间为30min，关闭臭氧发生器后60min后，人员可进入作业。报告者：