PEG诱导动物细胞融合_第1页
PEG诱导动物细胞融合_第2页
PEG诱导动物细胞融合_第3页
PEG诱导动物细胞融合_第4页
PEG诱导动物细胞融合_第5页
已阅读5页，还剩5页未读， 继续免费阅读

付费下载

VIP免费下载

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验六

PEG诱导动物细胞融合

(必做，验证性实验）了解细胞融合的基本原理,并掌握PEG诱导动物细胞融合的方法实验目的概述细胞融合细胞融合(cellfusion)是指两个或多个细胞通过质膜融合形成单个双核或多核细胞的现象称为细胞融合,结果产生杂交细胞(hybrid),亲本相同的融合细胞称为同核体(homokaryon),反之称为异核体(heterokaryon).细胞融合在机体正常发育的各个时期都可以观察到.上世纪60年代首次体外人工诱导细胞融合获得成功以来,由于其应用的广泛性和广阔前景,已逐步发展成为重要的细胞工程技术.人工诱导细胞融合主要包括:病毒和化学融合剂以及电融合和激光融合等方法.细胞融合的意义细胞融合能把亲缘关系较远，甚至毫无亲缘关系的生物体细胞融合在一起，为远缘杂交架起了桥梁，是改造细胞遗传物质的有力手段。它的意义在于从此打破了仅仅依赖有性杂交重组基因创造新种的界限，扩大了遗传物质的重组范围。PEG诱导鸡血细胞融合PEG是乙二醇的多聚物,存在不同分子量的多聚体,它可改变各类细胞的膜结构,使两细胞相互接触部位的膜脂双层中脂类分子发生疏散和重组,此时相互接触的两细胞的胞质沟通成为可能,从而造成细胞之间发生融合.PEG介导细胞融合,其融合效果受以下几种因素的影响:分子量及浓度、pH值、处理时间和温度等.以鸡血细胞为实验材料，经PEG诱导处理后，形成具有二个或多个核的细胞，可视为融合细胞.

实验原理实验材料及试剂材料：鸡静脉血试剂：生理盐水；

GKN液；

Alsver液；

50%聚乙二醇采取鸡血1200r/min,离心三次5min,5min,10min取混合液1mL混合液取血细胞沉淀取适量稀释液滴加于载玻片镜检滴加PEG(稀释液的1/2)静置3分钟加入适量GKN稀释加入4mL生理盐水加入Alsver液混合(1:4v/v)实验操作流程实验结果观察时注意不同程度的融合现象。通常分为五个阶段：两细胞（或多细胞）接触，粘连；细胞膜形成穿孔；两细胞（或多细胞）的细胞质连通；通道扩大，两细胞（或多细胞）连成一体；细胞完全合并，形成一个含有两个或多个核的细胞。

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 作业报告

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论