高效液相色谱法测定食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基磺酸的

高效液相色谱法测定食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基磺酸的残留量陈妙兰、蔡佳梓、李燕华(广东省江门市质量计量监督检测所邮编：529000)[摘要]目的：建立高效液相色谱法定量测定食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基磺酸的残留量的方法。方法:采用C18色谱柱，流动相为5%乙腈：95%磷酸二氢铵(20mmol/L)，流速为0.5mL/min，检测波长为210nm，进样容积为10"L，柱温为25°C。结果：氨基磺酸在0.02g/L〜0.30g/L范围内线性关系良好，r=0.9998(n=6)；氨基磺酸平均回收率为90.20%~94.00%。结论:高效液相色谱法准确、可靠、重复性好，检测方便。可用于食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基磺酸的残留量定量测定。[关键词]环已基氨基磺酸钠；氨基磺酸；高效液相色谱法[Abstract]Objective:Toestablishamethodtoquantitativedeterminetheaminosulfonicacidresiduesfromsodiumcyclohexylaminosulfonicoffoodadditivesbyhighperformanceliquidchromatographymethod.Method:C18chromatographycolumn,flowphaseis5%acetonitrile:95%ammoniumdihydrogenphosphate(20mmol/L),flowrateis0.5mL/min,detectionwavelengthis210nm,samplingvolumeis10/L,columntemperatureis25C.Result:Aminosulfonicacidkeepslinearrelationshipin0.02g/L〜0.30g/Lrange,r=0.9998(n=6);Averagerecoveryrateofaminosulfonicacidis90.20%〜94.00%.Conclusions:high-performanceliquidchromatographicmethodisaccurate,reliable,andrepeatability,easyformeasurement,andcanbeusedforquantitativedeterminationofaminosulfonicacidresiduesinfoodadditivessodiumcyclohexylaminosulfonic.[Keywords]sodiumcyclohexylaminosulfonic;aminosulfonicacid;highperformanceliquidchromatography氨基磺酸的分子式为NH2S03H。市售商品为白色粉末，在常温下，比较稳定。氨基磺酸的水溶液具有与盐酸、硫酸等同等的强酸性，故别名又叫固体硫酸，它具有不挥发、无臭味的特性。氨基磺酸主要用于工业锅炉和民用锅炉的除垢剂等；而食品级(高纯度)的氨基磺酸也是生产食品添加剂环已基氨基磺酸钠的重要原料之一［1］，主要以环己胺为原料，氨基磺酸化合成环己基氨基磺酸后与氢氧化钠作用而制得的环己基氨基磺酸钠(甜蜜素)，作食品甜味剂使用。由于氨基磺酸对上呼吸道有刺激性；受热分解，放出氮、硫的氧化物等毒性气体，已有一些实验室监测方法。但目前国内文献中极少有关食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基磺酸的残留量方面的资料，也没有使用精密仪器进行微量分析的经验。只在GB12488-2008中7.13中有氨基磺酸残留量的检测方法，该方法主要是采用薄层色谱法定性试验［2］。该方法的试剂前处理繁琐，试验结果效果不显著。本文采用高效液相色谱法测定对食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基磺酸的残留量，该方法准确、可靠、重复性好，检测方便。仪器与试剂仪器BSA224S-CW型电子天平：Sartorius公司；Agilent1200高效液相色谱仪

(美国安捷伦公司)，配G1315D紫外检测器；色谱柱(Kinetex,C18,100x4.

6mm,2.6”);酸度计(METTLERTOLEDO);超纯水机(Miniporesynergy)试剂本方法所有试剂均为市售，未作进一步纯化处理，其中氨基磺酸，磷酸二氢铵和磷酸为分析纯，乙腈为色谱纯，试验用水为超纯水。20mmol/L磷酸二氢铵溶液。1.2.2磷酸溶液(1mol/L):在500mL水中加入53.5mL磷酸，混匀后加水定容至1000mL。1.2.3标准储备液：称取氨基磺酸0.10g，用超纯水溶解后，定容至50mL。标准使用液:取20.00mL标准储备液于100mL容量瓶中，用超纯水稀释到刻度,浓度为0.4g/L。精密吸取标准使用液(0.4g/L)0.5,1.020,5.0,7.5mL分别置于5个10mL棕色容量瓶中,用超纯水稀释至刻度,混匀，浓度分别为0.02g/L、0.04g/L、0.08g/L、0.20g/L、0.30g/L。方法与结果样品配制样品溶液制备：称取样品5.00g，超纯水溶解后，用1mol/L磷酸调至pH=2.10，再定容至100mL，摇匀待测。色谱条件:C18色谱柱：Kinetex,100x4.6mm,2.6p;流动相：乙腈：20mmol/L磷酸二氢铵(用1mol/L磷酸调至pH=2.10)=5:95;流速：0.5mL/min；柱温:25°C;检测波长：210nm；结果2.3.1标准曲线的绘制：浓度分别为0.02g/L、0.04g/L、0.08g/L、0.20g/L、0.30g/L的标准溶液依次进样10pL,按2.2的色谱条件,以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标进行线性回归,得回归方程为：A=13211.26c+21.55(n=6),r=0.99984。标准物氨基磺酸(0.04g/L)的图谱如下(图1):对照标准溶液HPLC图谱在0.02g/L~0.30g/L浓度范围内，氨基磺酸的浓度与峰面积呈良好的线性关系。2.3.2检出限：检出限按下式进行计算:检出限二S二3Nbb式中:S---最底相应值;b---标准曲线回归方程中的斜率，响应值/pg或响应值/ng;N---为仪器噪音的3倍，即仪器能辨认的最小的物质信号。在采用高效液相色谱法测定食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基磺酸残留量的方法标准曲线的绘制色谱中得回归方程为:A=13211.26c+21.55(n=6),r=0.99984由上述可得b=0.99950,S=0.002g/L为最底响应值其检出限为2ppm。

氨基磺酸(0.002g/L)图谱如下(图3):从色谱图可以发现，用液相检测氨基磺酸的峰形比较理想。加标回收:通过对样品环已基氨基磺酸钠的加标实验来验证该处理方案的可行性，加标浓度分别为0.05g/L、0.10g/L、0.20g/L，获得了较理想的回收率，结果详见表1。表1:加标实验数据样品本底值(g/L)加入量(g/L)测得量(g/L)回收率(％)相对标准偏差(RSD%)0.020.05000.066092.000.6100.065691.200.065190.200.050.10000.142392.310.5950.143193.100.144094.000.050.20000.233592.750.8230.231790.850.233091.50由表1中看其回收率在90.20%~94.00%的范围，通过以上试验表明，用高效液相色谱法定量测定食品添加剂环已基氨基磺酸钠中氨基