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1GB/T6682-2008分析实验室用2）；）；丙醇、乙醇、M-MLVRT反转录酶、RNA酶抑制剂病毒都具有很强的免疫原性，同时都是RNA病毒，因此可利用间接ELISA、Dot-ELISA和RT-PCR方法试验室保存的感染TuMV或CMV的标准样品，阴性样品及阳性样品皆通过RT-PCR检测及测序验证。阴性对35.2.4加抗血清试验室保存的感染TuMV或CMV的标准样品，阴性样品及阳性样品皆通过RT-PCR检测及测序验证。阴性对45.3.5加抗血清显色底物NBT66μL和BCIP33μL加到10mL底物液中反应，待阳性对照显色明显，而阴性没有任何显色时终止反应（显色5min～20mi），取单头蚜虫或称取0.1g植物组织加液氮研磨成粉末状，迅速将其移入灭菌的无RNase1.5TuMV-F:5′-GTAACCAAGACCGACTuMV-R:5′-TATGCCTCTCCGTGCMV-F:5′-AACCACCCAACCT5 逆转录总体积为20μL。在无RNase的PCR管中依次加入3μL待检测RNA，1μL相应病毒下游扩增引物仪中42°C反应1h，70°C反应5min。同样处理阳性对照、阴性对照和空白对照，合成的cDNA置于-20依次在灭菌的PCR管中加入ddH2O14.8μL、10×PCR缓冲液2.5μL、MgCl2（25mmol/L）2.5μL、dNTP（10mmol/L）2μL、10pmol/μL上游引物1μL、10pmol/μL下游引物1μL、Taq酶（5U/μL）0.2μL、cD制备1%的琼脂糖凝胶。取上述PCR产物10μL，加入1μL上样缓冲液，混匀后移入胶孔，并在样品孔67A.1间接酶联免疫吸附测定3A.1.3抗体缓冲液A.1.7酶标抗体8每5mL底物稀释缓冲液中先加入33μL的NBT，混匀后再加入16.5μL的BCIP，该试剂配制好后，应A.2.7
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