城市吸血蠓类监测规程

1城市吸血蠓类监测规程本文件规定了城市吸血蠓类监测的方法规程。本文件适用于城市吸血蠓类的监测。农村吸血蠓类监测也可参照本文件。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。蠓类ceratopogonidae双翅目细角亚目蠓科中的主要吸血蠓类（库蠓属Culicoides、蠛蠓属Lasiohelea、细蠓属Leptoconops）。3.2蠓种群构成groupconstitutionofceratopogonidae在某一生态环境内蠓种的构成。3.3季节消长seasonaldistribution一年内蠓类或优势蠓种群活动数量的季节性变化。4监测方法4.1灯诱法4.1.1适用范围适用于城市公园绿地、居民区绿化带、运动场、校园、河道两侧、城郊居民户及牲畜棚等室内外蠓类成虫的监测。4.1.2器具、试剂诱蚊灯(光催化诱蚊灯，诱捕灯波长360-380nm)。4.1.3操作步骤选择远离干扰光源和避风的场所作为挂灯点，诱蚊灯光源离地面1.5m。日落前1h接通电源，开启诱蚊灯诱捕蠓类，直至次日日出后1h（或根据监测目的决定诱集时间）。密2闭收集器后，再关闭电源。记录温度、湿度和风速数据，收集、分类和记录蠓类数量。（参见表A.1）4.1.4密度计算密度计算见式（1）D=N1T......................................(1)式中：D—蠓密度，单位为只每台夜［只/（台·夜）]或只每台小时［只/（台·h）]；Nm—蠓数量，单位为只；N1—灯的数量，单位为台；T—诱蠓小时数或诱蠓夜数，单位为时（h）或夜。4.2人诱停落法4.2.1适用范围适用于城市公园绿地、居民区绿化带、运动场、校园、河道两侧、城郊居民户周边等场所吸血蠓类成虫的监测。4.2.2器具、试剂计数器、手电筒、电动吸蚊器等。4.2.3操作步骤选择当地蠓类刺叮高峰期，监测者裸露一侧小腿，静止不动，记录15min内停落在小腿上被拍死或捕获的蠓虫数，或根据监测目的决定诱集时间。记录诱蠓开始时间与结束的时间、地点、温度、湿度和风速数据（参见表A.2）。4.2.4密度计算停落指数计算见式（2）I=NhT......................................(2)式中：I—停落指数，单位为只每人次［只/（人·次）]或［只/（人·min）]；Nm—停落蠓数量，单位为只；Nh—诱蠓的人数，单位为人；T—诱蠓次数或诱蠓时间，单位为次或分（min）。34.3挥网法4.3.1适用范围适用于城市公园绿地、居民区绿化带、运动场、校园、河道两侧、城郊居民户周边等场所飞行中蠓类成虫的监测。4.3.2器具、试剂捕虫网(规格见附录C)、乙醚等。4.3.3操作步骤选择蠓类活动高峰时间，监测者手持网柄呈“∞”形挥网，高度不超过1.5m，边走边挥，以50次/min的频率挥动捕虫网，挥网5min，收网前用力快挥3次至4次，使捕获的蠓集中到网底。用乙醚麻醉蠓虫，将蠓虫取出分类、计数，并记录温度、湿度和风速数据（参4.3.4密度计算密度计算见式（3）NmD=Nn (3D=式中：D—网捕蠓密度，单位为只每网（只/网）；Nm—蠓数量，单位为只；Nn—网的数量，单位为网。5标本制作与保存蠓虫标本制作与保存见附录B。6统计分析监测结束后，对监测数据进行统计分析，得出蠓类种群构成、生境密度、季节消长等。4（资料性附录）蠓类监测记录表格表A.1蠓类成虫监测记录表5表A.2吸血蠓类成虫监测记录表6（规范性附录）蠓类标本制作和保存B.1酒精保存法将采集的蠓类标本装入小玻璃指管内，放入标签并加满75%乙醇，以棉花塞紧并使管内不残留气泡，但不能紧压标本，然后再将指管放入另一装有75%乙醇的大瓶中密封保存。采集标签应写明采集地点、釆集时间、采集方法、釆集人和标本釆集号。B.2蠓类成虫玻片标本制作B.2.1固定：取出存于75%乙醇中的蠓虫，在显微镜下用解剖针切下蠓虫一侧翅，展平翅粘在滴有中型树胶的洁净载玻片上，制成翅的玻片标本，割下翅的虫体转移至50%乙醇中浸泡15min后转移到蒸馏水中泡15min，更换蒸馏水再次浸泡15min。B.2.2消化：蒸馏水浸泡后的虫体移至10%氢氧化钠溶液中腐蚀，至雌虫受精囊、雄虫尾器等清晰可见。B.2.3脱水：腐蚀消化后虫体移至蒸馏水中清洗2遍，每遍15min，而后将标本逐级移入50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、无水乙醇脱水各15min，脱水的过程中可用微针轻微挑拨虫体，使酒精能够充分进入虫体。B.2.4整姿封盖：在原展翅的玻片上，于翅侧加1滴中型树胶，用解剖针将脱过水的虫体转移到中型树胶中，此时虫体较脆，移动注意避免破碎，在体视显微镜下将蠓虫的头、胸、腹分离，并分别摆放，头部正面向上，触角及触须理直；胸部侧置，足理直；腹部腹面向上，尤其尾器要放平。暂不盖盖玻片，待胶稍干，标本位置固定后滴加数滴树胶后盖片。盖玻片尽量放低，轻轻盖上，避免将气泡封在片内。B.2.5干燥：室温平放5~7天晾干或恒温箱≤60℃烤干。B.2.6标签书写：玻片制好后，均应贴上标签。头向朝向自己，左端贴上采集标签，标明采集时间、地点、方法、采集人等信息。右边贴上鉴定标签，写明虫名、性别、鉴定人