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96.1.简洁说明革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌在细胞壁的化学组成和构造方面的主要不同点。答:在化学组成上,革兰氏阳性细菌细胞壁肽聚糖含量很高30-9和蛋白质,革兰氏阴性细菌细胞壁肽聚糖含量很低〔5-2,不含有垣酸,脂质和蛋白质含量较高。在构造方面,革兰氏阳性细菌细胞壁厚度大〔20-80纳米〕均匀,化学组分简洁,革兰氏阴性细菌细胞壁薄,层次较多,有外膜,成分较简洁,肽聚糖层很薄〔仅2-3纳米,故机械强度较革兰氏阳性细菌弱。某制药长生产林可霉素该厂为了提高质量,请你从微生物遗传变异的原理为该厂设计获得高产菌株的试验方案。答:见教材218页产量突变株的筛选,琼脂块培育法的操作程序某些微生物能在2C化合物为唯一碳源的培育基上生长,它是通过哪些途径得到细胞生长3C以上的化合物,如核糖等?答:乙醛酸循环途径,2C化合物如乙酸+CoACoA+草酰乙酸→柠檬酸,走TCA循环途径生成草酰乙酸,在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸,抑制1、3二个限速步骤,逆EMPHMP菌种退化的根本缘由是什么?常用的菌种保存方法有哪几种?答:有关基因的负突变。斜面低温保藏法、矿油保藏法、载体吸附保藏法、真空冷冻枯燥保藏法、液氮冰箱保藏法、寄主保藏法用何法可以获得耐终产物反响阻遏的突变株?答:见教材145页〔一〔二〔三〕点97.1应实行什么措施?腐胺〔丁二胺〕在细胞内是如何形成的?它在细胞内有何生理意义?生尸胺、腐胺,对人有毒,不能食用,但可以降低血压。什么叫抗代谢物?简述磺胺药的作用机制。180页98.2.产生养分缺陷突变株的原理是什么?简述筛选养分缺陷型突变株的方法,并举一例说明其在生产上的应用状况。已答过99.1.为什么说土壤是人类最丰富的“菌种资源库”?246页土壤所含水分本身是一种淡薄的盐类溶液,其中含有各种有机和无机氮素及各种盐类,养基的。土壤中的固体局部含有1—15%的有机物质成分,而且每年有大量的动物尸体、排空气容积的7—8%。土壤本身一年四季温度变化不大,更为微生物在土壤中生长生殖制造了有利条件。2.某发酵工厂消灭发酵特别状况,你如何推断它是否因感染噬菌体而引起?并设计一个解决的方案。答:12、PH34、产生大量气泡,有时发酵液呈现粘稠状,可拔丝5、代谢产物削减或停顿6、镜检可觉察菌体显著削减,革兰氏染色后呈现红色碎片。78、倒平板培育看到噬菌斑解决方案:1、更换菌种2、残糖较高时,提高温度85—95℃,10分杀死噬菌体,补充玉米浆34、加药物抑制〔符合食品和医药卫生〕4.有的微生物能在以乙酸为唯一碳源的培育基中生长,试阐述它怎样利用乙酸来合成己糖和戊糖。96.32023.2什么是Ames答:见教材215致癌性成正比,超过95%的致癌物质对微生物有诱变作用,而90%以上的非致癌物质对微生物没有诱变作用。2023.3什么叫反响抑制和反响阻遏作用?它们在发生气制上有何不同?〔通常是催化第一步反响的酶〕活性的作用;一般针对紧接代谢途径支点后的酶反响阻遏是末端代谢产物阻挡整个代谢途径酶的合成作用,往往影响从支点到终点的酶。化作用受到影响,从而调整酶的反响速度及代谢过程。反响阻遏作用用操纵子学说解释。在阻遏的操纵子体系中,调整基因R产生的阻遏物基因O结合,于是转录作用被抑制,酶合成自然停顿。2023.4什么叫挨次归纳法?他在争论生物合成过程中有何用途?用什么方法鉴别某菌株三种不同的精氨酸基因突变型A、B、C相邻在不含精氨酸培育基上的生长谱?假设基因突变型A在培育基内积存氨基酸AA1,B积存AA2,C积存AA3,试断定图中三种精氨酸基因突变株的阻断挨次。2023.2在发酵过程中如何推断发酵液是否染了杂菌?答:1、溶解氧水平特别变化2、CO2含量上升3、耗糖速度加快4、代谢产物削减或停顿5、6、平板划线或斜面培育是否有杂菌2023.1.试述自发突变的机制。答:自发突变:生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变可由:①背景辐射和环境因素;②微生物自身有害代谢产物DNA复制进程中碱基配对错误引起2023,2什么叫抗代谢物?简述TWP(磺胺增效剂)的作用机理。活性的化学物质TMP可以抑制二氢叶酸复原酶,可使二氢叶酸无法复原成四氢叶酸,同时磺胺与PABA构造类似,两者发生竞争性拮抗作用,这样,凡能利用二氢蝶酸和PABA合成叶酸的细菌就无法合成叶酸,生长受到抑制。2023.1.何为微生物的同步生长?如何获得同步生长的微生物〔各举一例〕?同步生长:使群体中的全部个体细胞尽可能地处于同样细胞生长和分裂期中;方法:①环境条件诱导法,如藻类的光照、黑暗把握,举例温度调整法②机械筛选法,如用过滤法收集同步生长的细胞2023.2如何从野生型和养分缺陷型混合菌液中检出养分缺陷菌株(至少两种方法)?并说明原理。以限量补充培育法;养分缺陷型菌株在根本培育基上生长受限逐个检出法:养分缺陷型菌株在根本培育基上生长受限而在完全培育基上则可生长影印平板法:同逐个检出法2023.3.试论述组成型突变株的获得及富集方法.1生长缓慢的亲株被恒化器渐渐淘汰E.coli在低浓度乳糖的恒化器。2将菌株轮番在有、无诱导物的培育基中培育,在第一个生长周期在含葡萄糖的培育基中极少量的组成型突变株与占确定优势的亲株将以同样的速率生长势3使用诱导性很差的基质,如将经诱变的群体生长在移种能作为碳源,但不能作为诱导物或其诱导性很差的基质上,便可筛选出,组成型突变株,例如:4生长,因酶的诱导受抑制,只有那些不需要诱导物的突变株才能生长;5提高筛选效率的方法,尽管用上述方法能富集组成型突变株,但突变株的数量只是比原来相对提高很多,但与未突变株比还是占少数2023.1.在大肠杆菌高密度培育过程中,如何让抑制其代谢过程中产生的乙酸对生长抑制?答:为防止有害代谢产物乙酸的生成,可承受自然培育基,降低培育基的pH,以甘油代替葡萄糖作碳源,参与甘氨酸、甲硫氨酸,降低培育温度〔从37℃下降到26-3℃,以及承受透析培育基去除乙酸等。2023.3.推断一化合物对抗生素合成起诱导物作用还是作为前体,其依据是什么?答:葡萄糖效应。选用化合物和葡萄糖做混合C源,假设是诱导物是缓慢利用的C源,消灭二次生长现象。假设是前体,应当是快速利用,而且不消灭二次生长现象。2023.1、什么叫微生物的耐药性?微生物产生耐药性的途径有哪些?试述细菌对青霉素的耐药性机制及如何抑制青霉素的耐药性。答:对药物的适应性即是耐药性。细菌对青霉素产生耐药性主要有三种机制:1.β解灭活;2.细菌体内青霉素作用靶位——青霉素结合蛋白发生转变; 3.细菌对青霉素产生耐药性主要有三种机制:1.β解灭活;2.细菌体内青霉素作用靶位——青霉素结合蛋白发生转变; 3.细胞壁对青霉素类的渗透性减低。 其中以第一种机制最为常见,也最重要。抑制青霉素的耐药性:1合理应用青霉素诱变作用。2循环使用抗生素即抗生素干预策略。3对青霉素的构造进展改造,保存其母核即6—氨基青霉烷酸,再对其R基团进展改造或取代,合成各种相应的半合成青霉素。2023.2氧自身固氮如何抑制氧气对固氮酶的抑制的?答生物固氮大气中的分子氧在常温常压条件下通过微生物固氮酶的催化而复原成氨的过程。 分为:自生固氮菌、共生固氮菌、联合固氮菌条件:ATP、{H}、固氮酶、复原底物N2、镁离子。严格厌氧环境机制:①呼吸保护:强化呼吸,以降低氧压②构象保护:由耐氧的铁硫蛋白与固氮酶结合形成耐氧的酶复合物。2023,3、试述生长速率对细菌个体大小及其组分的影响。响生长速率但对细胞大小几乎没有影响。细胞中DNA含量随生长速率的提高而增加,但程度低一些,因此以细胞质量衡量,DNA含量是削减的。细胞的外壳的厚度通常不变,胞壁越大,含RNA越多,其中大局部是核糖体。生长速率随核糖体含量线性地增加。2023.1、某菌株在根本培育基上无法生长,如在根本培育基中添加0.1﹪碱水解酵母核酸,的生长必需物。答:该菌株为养分缺陷型突变型的菌株。该菌株为缺少RNA突变型的菌株。试验方案:承受生长谱法。见教材223页。鉴定养分缺陷型的操作:把生长在完全培育液里0.1毫升与MM混合4个区,然后按区加上AMP、GMP、CMP、UMP,经培育后,如觉察某一养分物的四周有生长圈,就说明此菌就是该养分物的缺陷型。2023.2、在微生物培育过程中,引起培育环境pH变化的缘由有哪些?在实践中,实行什么措施使微生物处于较稳定和适宜的pH环境中?答:166页2023.3、向发酵液添加次级代谢物的前体不愿定能促进次级代谢物的合成,其缘由是什么?答:①前体物质可能不被细胞吸取或者不能到达次级代谢产物合成的部位;②添加的物质可能对细胞本身的合成产生反响抑制作用所需的直接前体;③添加的前体不是次级代谢产物合成过程中起限制作用的物质中高浓度的无机磷的抑制作用④抗生素合成过程的启动包含几种把握机制,除上面已述及的调整机制外,尚有两种机制:一种是细胞外的一些小分子效应物起辅阻遏物作用或抑制剂的作用抑制剂被初级代谢耗竭后次级代谢合成才启动,这种调整机制可解释碳源分解代谢物的调一类诱导作用或激活作用的物质。2023
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