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文档简介
11.220
41DB34
鸡滑液囊支原体
LAMP
Technical
Regulations
for
Rapid
Detection
安徽省市场监督管理局
DB34/T
2020前 言
DB34/T
2020
Amplification
4.1
高速台式冷冻离心机（最大转速
15000
rpm）4.2
4.3
L、1000
L）4.4
4.5
4.6
电热恒温水槽（室温～100℃）4.7
4.8
4.9
4.10
pH
mL，浓盐酸调
DB34/T
2020二水乙二铵四乙酸二钠
18.61
80
pH
100mL。
十二烷基硫酸钠
20
80
pH
100
mL。
mol/L
三羟甲基氨基甲烷-盐酸（pH
8.0）2
mol/L
乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH8.0）0.4
mL，20％十二烷基硫酸钠（SDS）溶液（pH
mL，5
mol/L
氯化钠
mL，灭菌双蒸水
200
250
mL。
碱性酚
25
mL，三氯甲烷
24
mL。5.7
5.8
双蒸水（符合
GB/T
6682
的要求）5.9
5.10 DL2000
Marker5.11 6×Loading
Buffer
MSEF-TUCP011096PrimerExplorer
CACAAATGGATGGTGCTATTCTT
-3'——B3：5'-TACTGCGTCACCTTCAAGTGCT-3'
无菌采集咽喉拭子，关节囊肿和胸部囊肿的内部炎性分泌物，放入盛有
1.0
mL
PBS
却后的
PBS
溶液，无菌条件下加入青霉素
1000
IU/mL）的
1.5
mL
DB34/T
2020
1.5
mL
制备的样品在
24
1.5
mL
L，加入
10
30
10
rpm
10
min。
取上清
1.5
mL
灭菌离心管中，加入等体积异丙醇，混匀，置
-80℃冰箱中
30
min，
弃上清，沿离心管开口方向管壁缓缓滴入
mL
灭菌双蒸水溶解沉淀，作为模板备用。若需长期保存须放置在
8.2
Bst
Polymerase
设所需
PCR的检测总数为
n，其中
为被检样品、阳性对照与阴性对照之和，每个样本测试反应体系配制见表1。
加样DB34/T
2020在各设定的
PCR
8.1.6
中制备的
DNA
溶液各
s。
LAMP
反应
8.2.2
中离心后的
PCR
管编号，放入
65℃水浴锅内
30～60
min，之后置
80℃温育
20
每个样本取
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