聚山梨酯80检验操作规程

有限公司GMP管理文件文件名称聚山梨酯80检验操作规程文件编号共7页制 订制订日期年月日审 核审核日期年月日批准人批准日期年月日颁发部门颁发日期年月日执行部门质管部生效日期年月日分发部门办公室、GMP办、质管部、生技部1、名 称：聚山梨酯80Jushanlizhi80Polysorbate80本品为聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯。2、 代号或编号：F—053、 引用标准：《中国药典》2000年版二部。检验项目标准规定性状本品为淡黄色至橙黄色的黏稠液体；微有特臭，味微苦略涩，有温热感。本品在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中易溶，在矿物油中极微溶解。相对密度：1.06〜1.09黏度：25°C时为350〜550mm2/S酸值：不大于2.2皂化值：45~60羟值：65~80碘值：18〜24鉴另U显乳白色浑浊溴试液褪色呈胶状物氯仿层显蓝色检查酸碱度pH值应为5.0〜8.0颜色与对照液比较，不得更深冻结试验于5C±2C放置24小时不得冻结水分W3.0%炽灼残渣W0.2%重金属不得过百万分之十4、操作方法：性状性状仪器、设备：试管。操作步骤：取样品适量于试管中，观察，是否为淡黄色至橙黄色的黏稠液体；闻之，是否微有特臭，口尝之味微苦、略涩，用手直接接触样品是否有温热感。取样品适量于烧杯中，分别加水、乙醇、甲醇、醋酸乙酯、矿物油搅拌，观察互溶状态。相对密度仪器、设备：韦氏比重秤、温度计。操作步骤：取20°C时相对密度为1的韦氏比重秤，用新沸过的冷水将所附玻璃圆筒装至八分满，置20C的水浴中，搅动玻璃圆筒内的水，调节温度至20C，将悬于秤端的玻璃锤浸入圆筒内的水中，秤臂右端悬挂游码于1.0000处，调节秤臂左端平衡用的螺旋使平衡，然后将玻璃圆筒内的水倾去，试干，装入供试液至相同的高度，并用同法调节温度后，再把拭干的玻璃锤浸入供试液中，调节秤臂上游码的数量与位置使平衡，读取数值，即得供试品的相对密度。黏度仪器设备：恒温水浴锅、温度计、秒表、平氏黏度计。4.1.3.2操作步骤：取毛细管内径为3.4~4.2mm的平氏黏度计1支，在支管F上连接一橡皮管，用手指堵住管口2，倒置粘度计，将管口1插入样品中，自橡皮管的另一端抽气，使样品充满球C与A并达到测定线m处，提出黏度计并迅速倒转，抹去粘附于2管外的样品，取下橡皮管使连接于管口1上，将黏度计垂直固定于恒温水浴中，并使水浴的液面高于球C的中部，放置15分钟后，自橡皮管的另一端抽气，使样品充满球A并超过测定线m，开放橡皮管口，使样品在管内自然下落，用秒表1准确记录液面自测定线m下降至测定线m处的流出时间。依法重复测定3次以12上，每次测定值与平均值的差值不得超过平均值的±5%。另取一份样品同样操作，并重复测定3次以上。以先后两次取样测得的总平均值按公式计算，即为样品的运动黏度。计算公式运动黏度（mmz/s）=Kt式中：k为用已知粘度的标准液测得的粘度计常数，mm2/s2；t为测得的平均流出时间，s。酸值试剂：乙醇、乙醚、酚酞、氢氧化钠。仪器、设备：分析天平、锥形瓶、胖肚吸管、滴定管、回流装置。操作步骤取样品10g,精密称定，置250ml锥形瓶中，加乙醇一一乙醚（1:1）混合液［临用前加酚酞指示液1.0ml，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）调至微显粉红色］50ml振摇使完全溶解，附回流冷凝器煮沸10分钟，放冷，加酚酞指示液5滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至粉红色持续30秒钟不退。计算公式Ax5.61样品的酸值二GA 样品消耗滴定液的体积（ml）G 样品的重量（g）皂化值试剂：乙醇制氢氧化钾滴定液、乙醇、酚酞、盐酸。4.1.5.2仪器、设备：锥形瓶、胖肚吸管、移液管、滴定管回、流装置、分析天平操作步骤：取样品适量［其重量（g）约相当于250/样品的最大皂化值］，精密称定，置250ml锥形瓶中，精密加入乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）25ml，加热回流30分钟，然后用乙醇10ml冲洗冷凝器内壁和塞的下部，加酚酞指示液1.0ml，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定剩余的氢氧化钾，至溶液的粉红色刚好褪去，加热至沸，如溶液又出现粉红色，再滴定至粉红色刚好褪去，同时做空白试验。计算公式：样品的皂化值=（B—A心°5GB——空白试验消耗滴定液容积（ml）A——样品消耗滴定液容积（ml）G 样品的重量（g）羟值试剂：对甲苯磺酸、醋酸乙酯、醋酐、吡啶、甲酚红、麝香草酚蓝、氢氧化钠。4.1.6.2仪器、设备：分析天平、锥形瓶、移液管、滴定管、恒温水浴锅。操作步骤：取样品2.0g，精密称定，置干燥的250ml具塞锥形瓶中，精密加入酰化剂（取对甲苯磺酸14.4g，置500ml锥形瓶中，加醋酸乙酯360ml，振摇溶解后，缓缓加入醋酐120ml,摇匀，放置3日后备用）5ml，用吡啶少许湿润瓶塞，稍拧紧，轻轻摇动使完全溶解，置50±1°C水浴中25分钟（每10分钟轻轻摇动）后，放冷，加砒碇一水（3：5）20ml，5分钟后加甲酚红一麝香草酚蓝混合指示液10滴，用氢氧化钠滴定液（1mol/L）滴定至溶液显灰蓝或蓝色，同时做空白试验。计算公式：样品的羟值」B—A）X56.1+DGB——空白试验消耗滴定液的容积（ml）；A——样品消耗滴定液的容积（ml）；G 样品的重量（g）；D——样品的酸值。碘值试剂：氯仿、溴化碘、碘化钾、硫代硫酸钠、淀粉。仪器、设备：分析天平、碘瓶、移液管、滴定管。操作步骤：取样品适量［其重量（g）约相当于25/样品的最大碘值］，精密称定，置250ml的干燥碘瓶中，加氯仿10ml，溶解后，精密加入溴化碘溶液25ml，密塞，摇匀，在暗处放置30分钟。加入新制的碘化钾试验10ml与水100ml，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定剩余的碘，滴定时注意充分振摇，待混合液的棕色变为淡黄色，加淀粉指示液1ml，继续滴定至蓝色消失，同时做空白试验。计算公式：样品的碘值= （B—A）从269GB——空白试验消耗滴定液的容积（ml）；A——样品消耗滴定液的容积（ml）；G 样品的重量。鉴别鉴别（1）试剂：氢氧化钠、盐酸。仪器、设备：试管、移液管。操作步骤：取样品的水溶液（1-20）5ml，加氢氧化钠试液5ml，煮沸数分钟，放冷，用稀盐酸酸化，观察是否显乳白色浑浊。鉴别（2）试剂：溴。仪器、设备：试管。操作步骤：取样品的溶液（1-20）,滴加溴试液，观察溴试液是否即褪色。鉴别（3）仪器：试管、量筒。操作步骤：取样品6ml,加水4ml混匀，呈胶状物。鉴别（4）试剂：硫氰酸铵、硝酸钴、氯仿。仪器、设备：移液管、分液漏斗、分析天平。操作步骤：取样品的溶液（1-20）10ml，加硫氰酸钻铵溶液（取硫氰酸铵17.4g与硝酸钻2.8g，加水溶解成100ml）5ml，混匀，再加氯仿5ml,振摇混合，静置后,观察氯仿层是否显蓝色。检查酸碱度试剂：邻苯二甲酸氢钾、磷酸二氢钾、无水磷酸氢二钠。4.3.1.2仪器、设备：酸度计、洗瓶、容量瓶、烧杯、分析天平、量筒。操作步骤：取磷酸盐标准缓冲液（pH6.86）对酸度计进行定位，再用邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液（PH4.00）校正酸度计至符合要求后，取样品2.0g，加新沸过的冷蒸馏水40ml溶解后，测定即得。记录pH值是否为5.0〜8.0。颜色试剂：重铬酸钾、氯化钻。仪器、设备：比色管、移液管。操作步骤：取样品10ml于比色管中，与同体积的对照液（取比色用重铬酸钾液8.0ml与比色用氯化钻液0.8ml，加水至10ml）比较，是否更深。冻结试验仪器、设备：烧杯。操作步骤：取样品，置烧杯内，于5°C±2°C放置24小时不得冻结。水分试剂：碘、无水吡啶、无水甲醇、二氧化硫仪器、设备：硫酸干燥器、具塞烧瓶、分析天平、量筒。操作步骤：（1）费休氏试液的制备与标定：①配制：称取碘（置硫酸干燥器内48小时以上）110g,置干燥的具塞烧瓶中，加无水吡啶160ml,注意冷却，振摇至碘全部溶解后，加无水甲醇300ml，称定重量，将烧瓶置冰浴中冷却，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g,再加无水甲醇使成1000ml，密塞，摇匀，在暗处放置24小时。本液应遮光，密封，置阴凉干燥处保存。临用前应标定浓度。②标定：用水分测定仪直接标定；或取干燥的具塞玻瓶，精密称入重蒸馏水约30mg，加无水甲醇2〜5ml,用本液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指示终点；另作空白试验，按下式计算。F二WA-B式中：F为每1ml费休氏试液相当于水的重量mg；W为称取重蒸馏水的重量mg；A为滴定所消耗费休氏试液的容积ml；B为空白所消耗费休氏试液的容积ml。（2）测定法：精密称取样品适量（约消耗费休氏试液（1〜5m1），用水分测定仪直接测定；或将样品置干燥的具塞玻璃瓶中，加无水甲醇2~5ml，在不断振摇（或搅拌）下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指示终点，另作空白试验。计算公式：样品中水分含量％=———巧卩xioo%WA 样品所消耗费休氏试液的容积（ml）B—空白所消耗费休氏试液的容积（ml）F——每1ml费休氏试液相当于水的重量（mg）W 样品的重量（mg）4.3.5炽灼残渣试剂：硫酸。仪器、设备：分析天平、坩埚、高温电阻炉、干燥器、移液管。操作步骤：取样品1.0g置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；加硫酸0.5〜1ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在500〜600°C

炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在500〜600°C炽灼至恒重，即得。计算公式：炽灼残渣%=炽灼残渣重量炽灼残渣%=炽灼残渣重量(g)

样品重量(g)xlOO%4.3.6重金属试剂：硝酸、盐酸、氨试液、酚酞、醋酸盐、硫代乙酰胺仪器、设备：移液管、水浴锅、纳氏比色管、瓷皿操作步骤：取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后,放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加