无菌试验规程

文件名称：无菌试验作业指导书版次:D-0文件编号：QACP-SOP-QCP第1页共9页大型无菌试验标准操作规程目的：验证UHT杀菌机、无菌罐、灌装机等设备处理过的物料所达到的商业无菌的质量要求。范围：UHT杀菌机、无菌罐、无菌灌装机参考资料：Tetrapak无菌测试手册定义AQLAcceptablequalitylevel的简称，可接受产品质量水平QACPQualityassurancecontrolpoint的简称，解释为质量保障控制点。SOPStandardoperationalprocedure的简称，解释为标准操作规程。程序、内容入）超高温杀菌机+无菌灌装机测试测试产品品种：必须是白奶、花色奶类的中性产品，不可以是酸性或乳饮料类产品。测试试验过程：总共做3批保温试验第1批:杀菌机、灌装机分别在清洗、升温形成无菌环境后，杀菌机进料灌装机灌注生产完成第1批保温试验。第2批:在完成第1批保温试验后可以连续让杀菌机、灌装机分别在清洗、升温，杀菌机进料灌装机灌注生产完成第2批保温试验。第3批:在完成第2批保温试验后必须间隔24小时后方可进行第3批试验，待满足间隔时间规定后让杀菌机、灌装机分别在清洗、升温，杀菌机进料灌装机灌注生产，完成试验要求生产的数量。3试验数量基于90%的可信度上：必须做够3批保温试验产品，必须每批每台灌装机生产32400包基于95%的可信度上：必须做够3批保温试验产品，必须每批每台灌装机生产33500包4试验评判：每台灌装机每批保温试验产品的坏包数不超过1包，否则判定此批保温试验不合格，判定此批保温试验不合格需要重新再做一批。B）超高温杀菌机+无菌罐+无菌灌装机测试1.测试产品品种：必须是白奶、花色奶类的中性产品，不可以是酸性或乳饮料类产品。2测试试验过程：文件名称：无菌试验作业指导书版次:D-0文件编号：QACP-SOP-QCP第2页共9页第1批和第2批:杀菌机、无菌罐、灌装机分别在清洗、升温，杀菌机先进第1批料液并直接向灌装机供料，待灌装机将第1批保温试验生产完毕后，灌装机停机进行中间清洗，第1批保温实验完成。杀菌机处理完第1批料液后继续处理第2批料液，并全部打入到无菌罐，待第2批料液打入到无菌罐后杀菌机停机清洗，无菌罐中的料液须存储2小时后方可以向第2次升起温的灌装供料生产，待第2批料液灌装机全部生产完毕后，第2批保温试验完成。第3批:在完成第2批保温试验后必须间隔24小时方可进行第3批试验，待杀菌机、无菌罐、灌装机分别在清洗、升温，待杀菌机进料处理第3批料要全部打入到无菌罐，在存储2小时以后，方可向灌装机供料，待第3批料液灌装机全部生产完毕后，第3批保温试验完成。第4批:以验证无菌罐的最长存储时间为主要目的，在完成第3批保温试验后可以立刻准备进行第4批试验，让杀菌机、无菌罐、灌装机分别清洗、升温，杀菌机进料处理第4批料液并全部打入到无菌罐，待无菌罐中的料液存储时间满足60小时后方可向升起温的灌装机供料生产，待第4批料液灌装机全部生产完毕后保温试验完成。3试验数量：基于90%的可信度上：必须做够4批保温试验产品，且前3批保证每台灌装机生产包数32400包，第4批可以只有1台灌装机单独生产且生产包数32400包基于95%的可信度上：必须做够4批保温试验产品，且前3批保证每台灌装机生产包数33500包，第4批可以只有1台灌装机单独生产且生产包数33500包4试验评判：每台灌装机每批保温试验产品的坏包数不超过1包，否则判定此批保温试验不合格需要重新再做一批。灌装车间卫生推荐要求文件名称：无菌试验作业指导书版次:D-0文件编号：QACP-SOP-QCP第3页共9页TOC\o"1-5"\h\z标准号： 03颁布日期： 11/11/97版号： 01页数： 1物理指标空气流速 0.2-0.3m/s正压值 2-4mmH）温度 15-30°C湿度 30-70%换气频率 10-15次/小时注意:灌装间应保持温湿度恒定。卫生条件一般用空气降落试验检查灌装车间卫生状况，菌落计数不超过30个。空气降落试验方法:将灭菌营养琼脂倒入直径9cm并经过灭菌处理的培养皿中，放入灌装间，打开培养皿暴露15分钟；而后，放入35±2°C恒温箱内保温两天，取出计数。如果菌落数大于30个，应该对灌装间作彻底清洗，并进行必要的特殊处理，如改进空气过滤系统、用紫外灯或乳酸消毒灌装车间。第I条 无菌试验前的准备节1.01（1）.生产加工区与灌装区的清洗生产加工区及灌装区：从地面到天花板作彻底清洗,并进行空气降落试验以检验无菌灌装间卫生状况（附录1中列出了灌装间的基本要求及空气降落试验方法）。（2）.超高温（UHT）杀菌设备与灌装机的清洗检查在无菌试验之前，进行两次完整的CIP。第一次CIP主要是针对系统内化学残留物质检查,具体方法是:在最后15分钟的CIP清水冲洗阶段，每隔2分钟进行一次电导率测试（电导率测定仪量程为0〜105口s/cm±1.5%）;最后取样时间应尽量靠近冲洗循环结束阶段。另外，在CIP后，还需检查一些关键点处（如管道末端/弯管及保温段）是否有沉淀物。检查结束后，进行第二次CIP。第II条无菌试验操作步骤无菌试验只适用于整条生产线检查，不适用于生产线局部检查;当在无菌试验标准上达成统一协议后，不仅要注意设备操作及整体安装的环境卫生，而且要注意原料（配方组份）与半成品的微生物质量，因为这将影响所获得的结果。无菌试验评估应由利乐包装（中国）有限公司与客户按以下内容共同协商进行:文件名称：无菌试验作业指导书版次:D-0文件编号：QACP-SOP-QCP第4页共9页评估AQL标准无菌试验标准通常用质量接受水平AQL表示，又称为最大可接受坏包率。需要强调的是坏包率不可能为0,AQL是食品生产商的一项总体质量方针，应当由客户自己确定。文中所列条件基于AQL1:1000,文末附录4列出了其它AQL值及相关要求。不论所制定的AQL值是多少，应注意：•坏包率与可信度密切相关，•坏包率只表示在某段时间内，特定的现存条件下，所达到的结果，与该生产线在其它时段、其它条件下所获得的结果没有可比性。操作参数与原料质量对于生产操作参数(如灭菌温度)及原料质量说明，无法给出统一要求，因为各公司设计及安装形式各不相同；但对于具体情况，应达成统一协议。中间产品质量要求从微生物角度看，不论生产何类产品，要使最终产品AQL达到1:1000,其进入超高温灭菌机(UHT)之前的半成品应满足以下要求。芽抱总数(cfu/ml) 100耐热芽抱计数(cfu/ml) 10取样方法无菌试验阶段，采用随机取样；同时应进行目的性取样以用于故障排除；在评估无菌试验结果时，应剔除目的性取样。不同情况下的目的性取样及其取样数量(推荐使用)：取样 取样数量TOC\o"1-5"\h\z生产开始 5包替换包材连接前后 2+2包纵封贴条发生变化前后 2+2包灌装机停机 2包生产结束 5包文件名称：无菌试验作业指导书版次:D-0文件编号：QACP-SOP-QCP第5页共9页无菌试验次数及取样量在即将开始无菌试验之前,应就无菌试验等级与客户达成协议。一般推荐，每台灌装机在投入商业生产前，进行三次无菌试验;最先两次无菌试验安排在连续前两天完成，停车一天后，第四天进行第三次无菌试验。每次试车后，安排一次完整的CIP,第三次试车前需增加一次CIP。若在杀菌机与灌装机之间装有无菌罐，如果50%的产品直接从灭菌机进入灌装机，而另外50%产品灭菌后进入无菌罐，储存5小时后供进一步无菌试验使用，并且无菌罐的密封性及相关功能达不到要求，则其生产产品的坏包率将远高于前者。每次无菌试验使用的产品类型、等级、灌注体积及装配应统一;生产应安排在类似的时段及在同样的生产条件下进行。当AQL为1:1000，可信度为90%时，取样数量为2400包。注意:如果用于无菌试验的灌装机与其它灌装机安装在同一生产线上，则所有灌装机产品阀的蒸汽屏障应处于工作状态。无菌测试成品评估方法所有的样品应随机获得，低酸产品在30〜37oC下保温5-7天,而高酸产品在20-25oC下保温10天,此后进行以下评估：•检查所有外包装，如胀包或其它感官缺陷•对所有样品进行pH测定（除高酸产品外,pH计精度应达到0.01，pH变化在标准的上下限0.2以内）•对所有样品进行感官检验测定（包括色质/气味/分层/结块等）坏包样品的定义产生以下情形的样品，可视为微生物不合格可疑样品：保温试验后，样品的期望pH值下降0.2（或以上），样品的风味或口感发生变化，以及产生胀包及外观缺陷。为了确认可疑样品是否为微生物不合格,需进一步进行微生物检验（如划线试验）与包装密闭性测定；对于划线试验，菌落数小于等于3个的，可忽略不计。污染菌的鉴别应当场进行。机械损伤样品不计入坏包数量。无菌试验记录无菌试验记录应在生产条件下进行，包括使用对数方格表及曲线图进行记录；将所有的机器设定记录下来（灌装机记录表见附录5）。所有样品应按时间编号，认真记录保温试验结果，报告格式见附录6。工厂接收标准无菌试验工厂接收标准由客户确定，主要为AQL与可信度。若规定AQL1:1000/可信度90%，三次保温试验的总坏包数量为3包。（附录4表2中列出了其它相关的AQL值/可信度及接收标准）

文件名称：无菌试验作业指导书版次:D-0文件编号：QACP-SOP-QCP第6页共9页低于接收标准结果的处理在保温试验之前，应就对低于接收标准的结果处理程序,与客户达成统一意见。当三次保温试验总坏包量超过3包时，应对整条生产线进行研究分析,并重复三次保温试验，直到达标为止。第III条附录4不同的AQL与可信度下的取样说明标准号：04颁布日期： 1/9/98版号： 01页数： 1表1.可信度，取样量与AQL之间的关系（每次试验有1个坏包）；可信度(%)'"'"'"'''''—AQL 取样999080706050(1:1000)4600230017001400950740(1:2000)940048003400280019001480(1:3000)1410072005100420028502220(1:4000)1880096006800560038002960(1:5000)23500120008500700047503700(1:6000)282001440010200840057004440(1:7000)329001680011900980066505180(1:8000)3760019200136001120076005920(1:9000)4230021600153001260085506660(1:10000)4600023000170001400095007400表2.不同可信度下，评估合格的生产线坏包数量可信度（％）999080每次试验取样量（1：1000）4600680010000230040005400170031004400每次试验取样量23500340005000012000200002700085001650022000

(1:5000)每次试验取样量(1:10000)4600068000100000230004000054000170003100044000三次试验坏包总量369369369文件编号：QACP-SOP-QCP 第7页共9页表3.半成品微生物指标40^^指标项目1:10001:20001:30001:40001:50001:60001:70001:80001:90001:10000TSC100503025201614121110TRSC10532211111TSC:芽抱总数，cfu/ml文件名称：无菌试验作业指导书版次:D-0文件编号：文件名称：