遗传学果蝇杂交

黒腹果蝇杂交验证

遗传学规律实验陆岩冰罗雪萍王志敏王培杨磊郑涛扎西卓玛实验目的1学习并掌握果蝇杂交技术2理解并验证遗传学定律原理：（1）分离定律（2）自由组合定律（3）版型遗传规律（4）连锁互换定律3记录实验结果掌握实验数据的统计处理方法4学习并掌握重组值求法以及遗传学图的绘制方法实验原理1相互区分的相对性状都是有相对的等位基因决定的2在杂交实验中，配子形成和受精时染色体的行为跟基因的行为是一致的：（1）分离定律：在生物的体细胞中，控制同一性状的遗传因子成对存在，相融合；在形成配子的减数分裂过程中，同源染色体及其上的等位基因彼此分离，分离后的遗传因子分别进入不同的配子中，随配子遗传给后代（2）伴性遗传规：位于性染色体上的基因的遗传行为与性别有关；

实验原理（3自由组合定律：在形成配子时，非同源染色体上及其上的非等位基因间自由组合，即一对染色体上的等位基因与另一对染色体上的等位基因的分离或组合是彼此间互不干扰的，各自独立地分配到配子中去；（4）连锁互换定律：配子形成过程中，位于同一染色体上的基因是连锁在一起，作为一个单位进行传递，称为连锁律。在生殖细胞形成时，一对同源染色体上的不同对等位基因之间可以发生交换，称为交换律或互换律。在减数分裂第一次分裂中期，位于赤道班上的同源染色体的非姐妹染色单之间发生片段交换，导致连锁群的等位基因发生一定的重组，重组率越大，交换律越高。实验原理1重组值的大小与基因间距离有关，依次可确定相关连锁基因在染色体上的位置与排列顺序，从而做出基因连锁图。2果蝇生活史短，繁育率高，饲养简便，并且染色体数目少，相对性状容易区分，故选用果蝇作为本次的遗传学研究材料3本次试验选取了果蝇的体色、眼色、翅形，刚毛四个形状为研究对象，其中体色为檀黑色是由位于第Ⅲ染色体上的隐性基因e控制；白眼、短翅、卷刚毛三个形状则分别由位于X染色体上的w、m、sn3控制实验材料与仪器果蝇品种：黒腹果蝇6品种（灰体、短翅、白眼，卷刚毛）黒腹果蝇e品种（檀黑体、长翅、红眼、直刚毛）实验材料：玉米粉、琼脂粉、蔗糖、酵母粉、丙酸、水、乙醚实验器材：培养瓶、烧杯、玻璃棒、量筒、标签、称量纸、移液枪、毛笔、纱布、胶头滴管、脱脂棉、棉线、剪刀、电子天平、电炉、恒温培养箱、双筒解剖镜实验步骤制备果蝇培养基处女蝇的收集果蝇的杂交与培养F1代果蝇的性状观察与统计F1代处女蝇的收集F1代果蝇的杂交与培养F2代果蝇形状的观察与统计℃（一）制备果蝇培养基配方：A:糖6.2克，加琼脂0.62克，在加水38毫升，煮沸溶解。B:玉米粉8.25克，加水38毫升，加热搅拌均匀将A、B混合加热成糊状（大约混合后体积减少约1/5）后，从电炉上取下，冷却至50~60℃时，加入0.7克酵母粉，搅拌均匀后，加入0.5毫升丙酸搅拌。分装置培养瓶中。（二）处女蝇的收集选取瓶中已有卵和幼虫的培养瓶，将其中的老果蝇全部转移除去，只留下卵和幼虫。收集自转移后8小时之内瓶中羽化出来的新果蝇。收集的果蝇用乙醚麻醉后用放大镜在百瓷板上将果蝇雌雄分开，这时的雌果蝇即为处女蝇。本次实验共需收集6号品种处女蝇与e品种处女蝇各5只，分别放至已加入培养基的培养瓶中，放至25℃恒温培养箱中，并在瓶身分别做好标签如下：

6品种处女蝇（P）e品种处女蝇（P）（灰、短、白、卷）(檀黑、长、红、直）+mwsn3e+++1号瓶2号瓶（三）果蝇的杂交与培养本次试验分为正交与反交两组同时进行正交组：6品种♂×e品种♀反交组：6品种♀×e品种♂A.正交步骤如下：1.从6品种原始培养瓶中果蝇转移出麻醉，在白纸板上用放大镜观察仔细挑出5只雄果蝇。2.将上述挑出的果蝇移入2号瓶中，并将标签如下：

三号瓶（正交）6品种（+mwsn3/+YYY）×e品种（e+++/e+++）

♂♀

××月××日生技1102班第六小组覆盖于原标签上，之后放入25℃恒温培养箱中培养

B.反交步骤如下：1.从e品种原始培养瓶中果蝇转移出麻醉，在白纸板上用放大镜观察仔细挑出5只雄果蝇。2.将上述挑出的果蝇移入1号瓶中，并将标签如下：

四号瓶（反交）

e品种（e+++/eYYY）×

6品种（+mwsn3/+mwsn3）

♂♀

××月××日生技1102班第六小组

覆盖于原标签上，之后放入25℃恒温培养箱中培养C.每两天观察一次果蝇，当三号(四号)培养瓶中蛹变黑时，将亲本转移出培养瓶。（四）F1代果蝇的性状观察与统计：成虫转移出之后，当三号(四号)培养瓶中再次出现成虫时，每天统计果蝇形状并填写表格如下，并当天统计完成后，转移出培养瓶，直至培养瓶中再无成虫产生。表型正交后代数目

♂♀合计灰长红卷xxxxxxxx总计F1代果蝇性状、数量观察统计表正(反)交xx月xx日（五）F1代处女蝇与雄果蝇的收集在开始统计F1代果蝇性状数量起第三天，开始收集F1代处女蝇，累计收集正(反)交F1代处女蝇10只，雄果蝇10只，分装置两只以装培养基的培养瓶中，并贴上标签：

五(七)号瓶六(八)号瓶F1代处女蝇正(反)交F1代雄果蝇正(反)交第六小组第六小组（六）F1代果蝇的杂交与培养

将六(八)号瓶中的雄果蝇转移到五(七)号培养瓶中，比用标签如下，覆盖于五(七)号培养瓶原标签，并置于恒温培养箱中培养，待培养瓶中蛹变黑时，将成虫转移出培养瓶。

九号瓶十号瓶F1代正交组F1代反交组灰长红直♀×♂灰长红直灰长红直♀×♂灰短白卷(e+++/+mwsn3×e+++/+YYY)(+mwsn3/e+++×+mwsn3/eYYY)xx月xx日xx月xx日第六小组第六小组（七）F2代果蝇性状与数量统计与F1代果蝇的方法相同实验数据的总合分析与实验预期分离定律的验证6品种与e品种进行杂交仅关注其体色性状，灰色对黑色为显性,可分析其遗传树状图如下：正反

P檀

黑体(♀)×灰体(♂)

e/e+/+

↓

F1

灰体

+/e

↓

F2

灰体

檀黑体

1+/+,2+/ee/e

比例

3：

1通过实验统计数据，运用χ2检验，来验证实验是否符合分离定律反交

P灰体(♀)×檀黑体(♂)

+/+e/e

↓

F1灰体

+/e

↓

F2灰体

檀黑体

1+/+,2+/ee/e

比例

3：

1伴性遗传规律的验证以果蝇的眼色作为研究对象，决定果蝇眼色的基因w位于果蝇的X染色体上，故应符合伴性遗传规律，分析其遗传树状图如下通过实验数据统计分析，运用χ2检验验证是否符合伴性遗传规律

正交

P

红眼(♀)×白眼(♂)

+/+w/Y

↓

F1红眼

+/w、+/Y

↓

F2红眼

白眼

1+/+,1+/w,1+/Y1w/w

比例

3;

1

反交

P白眼(♀)×

红眼(♂)

w/w+/Y

↓

F1红眼、

白眼

1+/w,1w/Y

↓

F2红眼

白眼

1+/w,1+/y1w/w,1w/Y

比例

1

：

1自由组合定律的验证选取6品种与e品种的体色与眼色为研究对象，决定果蝇体色的基因位于第Ⅲ染色体上，决定果蝇眼色的基因为与x染色体上，故两基因在遗传过程中互不影响，应符合自由组合定律。分析其遗传图谱如下：

正交

P檀黑红(♀)×

灰白(♂)

e+/e++w/+Y

↓F1

灰红

1+w/e+，1e+/+Y

↓

F2

灰红

灰白

黑红黑白1++/++,1++/+w1+w/+Y1e+/ew1e+/+Y,1e+/+w1+w/eY1e+/ey1ew/ey2++/e+,2++/eY1ew/=Y1ew/e+9：3：3：1其中正交灰眼：黑眼=3:1，红眼：白眼=3:1,反交灰眼：黑眼=3:1，红眼:白眼=1:1眼色性状符合分离定律，眼色遗传符合伴性遗传规律，两者在遗传过程中互不干扰，符合自由组合定率，通过实验数据统计分析，运用χ2检验来验证实验验是否符合自由组合定律

反交

P灰白(♀)×

檀黑红(♂)

+w/+we+/eY

↓F1

灰红灰白

1+w/e+，1+w/eY

↓

F2灰红

黑红

灰白黑白

1++/+w,1++/ew1e+/ew2+w/ew,1+w/+w1++/+Y,1e+/+w1e+/ey1+w/eY,1+W/+y1ew/ey1e+/+Y+,+1+/eY1ew/+Y1ew/ew6