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文档简介

AthesissubmittedtoinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofEngineering高中生物实验重难点诠释(带*的为重点实验)实验一:生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定**1、实验材料的选择:(1)可溶性还原糖的鉴定:生物组织中的糖类有还原糖和非还原糖两类。常见的还原糖有葡萄糖、果糖和麦芽糖;蔗糖(甘蔗茎、甜菜的块根等)、淀粉(马铃薯、番薯的块茎等)是非还原糖。在双子叶植物中,光合作用的主要产物葡萄糖形成后,合成为淀粉暂时储存在叶子内,因此最好不用双子叶的叶子作为实验的材料。有些单子叶植物,如韭菜,叶子内虽然含有大量的可溶性还原糖,但由于叶片中叶绿素颜色较深,对于鉴定时的颜色反应起着遮盖作用,导致实验现象不明显,一般也不选用。本实验最理想的实验材料是还原糖含量较高的植物组织,而且要求组织的颜色较浅或近于白色,如苹果和犁的果实,也可以用白色的甘蓝叶、白萝卜替代。经实验比较,颜色反应的明显程度依次为:苹果、梨、白色甘蓝叶和白萝卜。(2)脂肪的鉴定:所用材料要求一脂肪含量高,二有一定大小做徒手切片,花生种子符合本实验的要求。实验前要将花生种子浸泡3~4h,有利于切成薄片,但浸泡时间也不宜过长,否则组织太软,切下的薄片不易成形。(3)蛋白质的鉴定:适宜材料有豆浆、鸡蛋清。若用鸡蛋清,必须按要求稀释,否则影响实验效果,而且实验后易粘住试管壁不易洗刷2、试剂的选用及注意事项:(1)可溶性还原糖鉴定过程中,因斐林试剂很不稳定,故应将组成试剂的两种溶液分别配制,使用是再加以混合,即现配现用。切不要将甲液和乙液分别加入组织样液中。实际上这个反应利用的是斐林试剂中的氢氧化铜作为弱氧化剂参与还原糖的反应,而氢氧化铜放置过久沉淀过多则不利于反应。在水浴加热时,试管底部不要触及烧杯底,以防止试管受热不均匀而爆裂;并注意试管口也不要朝向自己或他人,防止沸腾的溶液冲出试管造成烫伤。另外,加入的斐林试剂不要太多,反而会使实验效果不理想。(2)脂肪鉴定实验键是能否切出符合要求的薄切片,太厚光线不能通过。(3)蛋白质的鉴定实验中,使用双缩脲试剂时,应先加试剂A(NaOH),造成碱性环境后再加入试剂B(CuSO4)(注意和使用斐林试剂的区别)。另外试剂B不能太多,否则硫酸铜的蓝色将遮盖颜色反应的真实效果。3、斐林试剂与双缩脲试剂的区别:(1)溶液浓度不同(课本)(2)使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热的条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定还原糖的存在,实验中溶液颜色的变化过程为:浅蓝色----棕色-----砖红色鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应的实质是在碱性条件下,Cu2+与双缩脲发生的紫色反应。而蛋白质分子中有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲发生颜色反应,可以使用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。(3)使用方法不同:见课本,注意NaOH和CuSO4的使用先后顺序。二.用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质的流动*1、显微镜的结构:2、使用时的注意事项:(1)显微镜的镜头有两种:目镜和物镜。目镜可从镜筒上端开口处插入,目镜长度与放大倍数成“反比“,即目镜越长,放大倍数越小;目镜越短,放大倍数越大。而物镜的上端有螺丝,可旋转固定在镜筒下端连接的转换器的3个开口上,且物镜长度与放大倍数成“正比”,即越长,放大倍数越大。焦距调好后镜头与盖玻片的距离越远,物镜越短,放大倍数越小;反之,放大倍数越大。显微镜的放大倍数为目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。在显微镜下所成物象为倒立放大的虚象。此外,由于低倍物镜的通光量比高倍物镜的通光量大,所以低倍镜的视野较明亮;而高倍物镜,虽然放大倍数大,实际观察到的标本区域小,视野教暗4.实验中有6次搅拌,除最后一次搅拌外,前5次搅拌均要朝向一个方向,并且在析出DNA,DNA再溶解和提取中,各步搅拌都要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,防止DNA分子断裂。5.特别注意实验中有两次使用蒸馏水:一次在第1步,加水是为了使血细胞洗水膨胀破裂,加水后必须充分的搅拌,不应少于5min,使血细胞充分破裂;第二次加蒸馏水是在第3步,加水是为了喜事氯化钠溶液。6.实验中有三次加氯化钠溶液。在步骤2中,当加入氯化钠后,必须充分晃动烧杯,使二者混合均匀,加速染色质中DNA与蛋白质分离,使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中。在步骤5中,加氯化钠溶液也是为了DNA的再度溶解,不过这时溶液中蛋白质含量已很少。在步骤8中,加的氯化钠溶液的浓度比前2次低的多,但还是为溶解DNA。7.在步骤7中,必须使用冷的酒精。十一、性状分离比的模拟实验实验中的两个小筒,分别相当于动物体内储存精子和卵细胞的器官(精巢和卵巢)。为了保证D和d配子与自然状态下相似,即1:1,小筒内的D和d小球的数量应该相等。而且抽取小球时,为了保证每次抽取到D或d的概率相等,应该进行有放回的抽取。抽取的过程即为受精。十二、调查人群中的遗传病调查某遗传病的发病率应该在人群中随机抽样,而调查该病的遗传规律,如X染色体的隐性遗传,则应该调查某患病家族的遗传病历史。十三、用当地某种生物做有性杂交的实验(见课文)十四、种群密度的取样调查。植物种群密度的调查方法:样方法。(常见的有五点取样法、等局取样法)动物种群密度的调查方法:标志重补法。十五、设计并制作小生态瓶,观察生态系统的稳定性1制作的小生态瓶应该是个完整的生态系统,即应该有非生物的物质(空气,水等)、非生物的能量(太阳能等)、生产者、消费者、分解者。各种生物之间以及生物与无机环境之间,必须能够进行物质循环和能量流动。生物之间要有合适的食物链结构,生物的数量不宜过多。小生态瓶必须上一透明的,这样可保证生态瓶中有充足的太阳能。当然,小生态瓶一定要封闭。2.观察稳定性:通过观察植物、动物的生活情况,水质变化,基质变化等判断生态系统的稳定性。十六、观察二氧化硫对植物的影响。*1.用注水法测出3个玻璃罩的容积(L),用溢水法测出放入植物后玻璃罩的容积,从而计算出要得到14mg/m3和28mg/m3的二氧化硫所需的亚硫酸纳的量。2

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