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葡萄球菌属及检验1.同学们大家好,欢迎来到微生物检验技术课堂。今天我们学习的内容是葡萄球菌属,葡萄球菌属是一类触酶试验阳性革兰染色阳性的球菌,因为他们在显微镜下经常成堆成团成葡萄串状,因此而得名。2.葡萄球菌广泛分布于自然界,而且大多数没有致病性,构成了人体的正常菌群,但是我们要注意的是有些人体的皮肤和鼻咽部可携带致病性菌株,特别是医务工作者的携带菌率可高达70%以上,而其中金黄色葡萄球菌是致病性最强的一类,是引起医院感染的重要微生物,也是最常引起化脓性感染的球菌。3.下面我们来学习葡萄球菌的生物学特性,首先来看一下它的形态与染色,革兰染色表现为阳性球菌,而且呈现不规则的葡萄串状排列,这类细菌它一般没有荚膜,没有鞭毛,而且不形成芽孢,大多数呢,也没有形成菌毛。4.下面我们再来看它的培养特性,葡萄球菌属为需氧或兼性厌氧菌,最适的生长温度为35到37摄氏度,它们的营养要求不高,在大多数的培养均能够生长良好,我们来看一下右边这张图,这个是葡萄球菌在液体培养基中的生长现象,我们可以看到它呈均匀浑浊生长。5.如果将这类球菌接种到普通琼脂平板上,培养24到48小时,那么就会在普通培养基上形成直径是2到3毫米大小的圆形菌落,而且菌落表面光滑凸起,边缘整齐湿润,并且不同的细菌可以产生不同的脂溶性色素,比如金黄色,白色,柠檬色等。6.如果我们把金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上培养后观察结果,我们来一起看看菌落呈什么颜色呢?是金黄色,这主要是由于产生了脂溶性的金黄色色素的缘故,那我们再仔细观察一下,会发现菌落的周围有明显的β溶血环,这主要是由于金黄色葡萄球菌产生了溶血素的缘故。7.另外葡萄球菌属中的某些菌株耐盐性强,他们能够耐受10%到15%的氯化钠,因此可以用高盐培养基对葡萄球菌属进行分离培养,当我们接种粪便,呕吐物或者是剩余食物的标本进行培养的时候,可以利于葡萄球菌的这个生长特点进行分离培养,因为在高盐的情况下,革兰阴性菌一般是不能生长的,从而达到分离选择培养的目的,我们再来看左边这张图,它显示的是金黄色葡萄球菌在高盐甘露醇平板上的培养结果,因金黄色葡萄球菌能够分解甘露醇,因此我们的菌落呈现的是淡橙黄色而表皮或者腐生葡萄球菌,呈现的则是白色或者是柠檬色。8.另外,在高盐卵黄磷脂平板上,金黄色葡萄球菌可以产生卵磷脂酶,所以,在菌落的周围可形成白色的沉淀环,而表皮葡萄球菌或者是腐生葡萄球菌,则没有这个现象,因此我们还是强调一下,大多数葡萄球菌,它们耐盐性极强的,所以综上所述的高盐甘露醇和高盐卵黄磷脂平板都可以作为葡萄球菌的选择培养基。9.我们再来看看生化反应,葡萄球菌属的生化反应,首先是碳水化合物氧化发酵试验(O/F试验)呈发酵型,金黄色葡萄球菌能分解多种糖类产酸(如:葡萄糖,麦芽糖,蔗糖,甘露醇)。10.血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌是阳性,其他球菌是阴性.致病性葡萄球菌可产生2种血浆凝固酶:结合型和游离型,这两种凝固酶使我们能够在玻片法上看到微小的凝集颗粒,试管法上看到液态血浆不流动的现象。11.乳胶凝集试验阳性,此试验不仅可检测金黄色葡萄球菌凝固酶,还可检测葡萄球菌A蛋白(SPA)。12.下面我们一起了解一下葡萄球菌属的临床意义,葡萄球菌属所致的疾病,主要包括侵袭性疾病和毒素性疾病,首先侵袭性疾病,也就是我们通常所说的化脓性感染,比如金黄色葡萄球菌,它主要可以引起皮肤软组织的疖、痈、蜂窝组织炎等,还有外科手术切口、创伤等局部化脓性的感染,播散入血后,也可引起全身感染,引发败血症和脓毒血症,表皮葡萄球菌是医院感染的重要病原菌,腐生葡萄球多引起住院患者的尿路感染;毒素性疾病是葡萄球菌属因为能产生肠毒素,通过污染食物从而引起食物中毒,婴幼儿也可引发皮肤烫伤综合症毒素,休克综合症毒素等,最后还有部分葡萄球菌可因长期使用抗生素而引起菌群失调导致假膜性肠炎。13.通过刚才讲到的葡萄球菌所指的疾病中有一类疾病是食物中毒,大家注意到没有,我们都知道食品安全关系到人民的生命安全,食品安全问题不仅仅是哪类国家的问题,乃是全球全人类的问题。这就是习总书记提出的“构建人类命运共同体”,总书记在“七一”重要讲话精神中对我们青年一代的殷切期望中就有希望我们青年学生有社会责任感和担当意识;做好人民餐桌上的“守护神”,从而以科学态度和精益求精的“工匠精神”为祖国、为人民奉献一生。13.那么假如我们碰到以上这些患者,在临床上是如何对葡萄球菌属进行检验呢?下面我们主要从标本采集、检验程序和检验方法三个方面来共同学习。14.首先标本采集,根据病情采集标本,临床上常见的标本种类有:脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。注意在采集标本时一定要遵循无菌操作原理,避免正常菌群污染。15.根据不同的检验标本,我们先进行设计检验程序,根据我们前面所学的知识,一起来看一下,当我们取到一份脓汁标本时,我们首先可以将标本进行涂片、染色、镜检,如果革兰染色镜检的结果是革兰染色阳性呈葡萄串状排列的球菌,那此时我们就可以做出初步诊断报告,查见革兰阳性球菌葡萄串状排列,疑为葡萄球菌。16.但是有时临床上需要对标本中的疑似致病菌进行分离培养,那么我们对于不同的脓汁、穿刺液、中段尿等标本可以选择血琼脂平板进行接种,血液和脑脊液标本则需要进行增菌之后再接种到血琼脂平板中,而粪便、呕吐物或者是剩余的食物标本则可接种在高盐甘露醇平板上或者是高盐卵黄磷脂平板上,从而有利于葡萄球菌的分离检出,经过以上分离培养之后,可根据菌落的形态、所产生的金黄色色素、β溶血现象等等,对平板上的可疑菌落
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