餐具洗涤剂中姜酚和姜烯酚的测定 高效液相色谱串联质谱法

餐具洗涤剂中姜酚和姜烯酚的测定高效液相色谱串联质谱法本标准规定了餐具洗涤剂中6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、6-姜烯酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚含量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于餐具洗涤剂中6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、6-姜烯酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样经混合溶剂提取，提取液氮吹浓缩后，用高效液相色谱测定姜酚和姜烯酚，保留时间和紫外光谱图定性，外标法定量。4试剂除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，实验用水均为GB/T6682中规定的一级水。4.16-姜酚对照品（CASNo:23513-14-68-姜酚对照品（CASNo:77398-92-610-姜酚对照品（CASNo:107257-18-16-姜烯酚对照品（CASNo:23513-13-58-姜烯酚对照品（CASNo:104186-07-410-姜烯酚对照品（CASNo:104186-05-2），纯度均≥98%。4.2乙腈：色谱纯。4.3甲醇：色谱纯。4.4丙酮：色谱纯。4.5甲酸：色谱纯。4.6二氯甲烷：色谱纯。4.725%氨水。4.8无水硫酸钠。4.9正丁醇。4.10提取液：移取10mL甲酸，10mL甲醇溶液到1L容量瓶中，用二氯甲烷定容到刻度。4.11酸化二氯甲烷溶液：移取10mL甲酸溶液到1L容量瓶中，用二氯甲烷定容到刻度。4.12洗脱溶液：移取10mL甲酸到1L容量瓶中，加入100mL丙酮，用二氯甲烷定容到刻度。4.13流动相A：移取10mL正丁醇，0.1mL氨水到1L容量瓶中，用水定容到刻度。4.14流动相B：移取10mL正丁醇，0.1mL氨水到1L容量瓶中，用乙腈定容到刻度。4.15单独标准储备液（1000μg/mL分别准确称取对照品（4.1）10mg（精确至0.01mg）于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀。4.16混合标准中间液1（10μg/mL）：准确移取1.0mL单独标准储备液（4.15）于100mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度，摇匀，4.17混合标准中间液2（1μg/mL）：移取1mL混合标准中间液1（4.16）于10mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度，摇匀，4.18标准工作溶液：用甲醇将混合标准中间液2（4.17）分别配成一系列浓度4.0ng/mL、8.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、80.0ng/mL、160.0ng/mL的标准工作溶液。5仪器和设备5.1高效液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。5.2分析天平：感量为0.1mg、0.01mg。5.3离心机：转速不低于10000r/min。5.4涡旋振荡器。5.5超声波清洗器。6分析步骤6.1试样处理称取1.0g（精确至0.1mg）样品于15mL塑料离心管中，加入10mL提取液（4.10），涡旋混匀，加入3g无水硫酸钠（4.8），再次涡旋混匀后，于离心机6000r/min离心5min。取2mL提取液（4.10）于预先活化的硅胶小柱，待自然流干后，加入2mL洗脱溶液（4.12），自然流干。上柱液和淋洗液均弃去。再加入5mL洗脱溶液（4.12），完全收集于氮吹试管中。40℃氮气吹干后，用0.5mL甲醇（4.3）溶解残渣，溶液过0.22μm有机滤膜后待测。6.2参考仪器条件6.2.1色谱条件a)色谱柱：C18柱（50mm×2.1mm，1.7µm），或等效色谱柱；b)流动相：梯度洗脱，流动相洗脱程序见表1；表1洗脱程序时间（min）流动相A流动相B0653565355.0207.0207.565356535c)流量：0.3mL/min；d)检测波长：290nm；e)柱温：30℃;f)进样量：3μL。6.2.2质谱条件a)离子化模式：负离子模式；b)喷雾电压：3000V；c)鞘气：50Arb，d)辅助气：10Arb；e)离子源温度：280℃,传输管温度300℃;f)监测模式：选择反应监测（SRM），各化合物SRM参数参见附录B。6.3测定6.3.1标准曲线绘制分别将标准工作液（4.18）注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定标准溶液，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准溶液色谱图参见附录A中的图A.1。6.3.2样品测定将按6.1处理好的待测试样溶液注入高效液相色谱-串联质谱仪，在上述色谱条件下测定试样溶液，记录SRM色谱图，以保留时间及SRM离子对的相对丰度比定性，待测液中目标化合物的保留时间与标准溶液中目标化合物的保留时间一致（相对偏差在±2.5%以内同时待测液中目标化合物的相应监测离子丰度比与标准溶液中目标化合物的监测离子相对丰度比一致（最大允许偏差见表1），则可判定样品中存在目标物。采用外标法定量。试样溶液中待测物的响应值应在标准曲线的线性范围之内。表2定性测定时离子对相对丰度的最大允许偏差离子对相对丰度>50%>20%~50%>10%~20%≤10%允许的相对偏差6.3.3空白试验除不称取试样外，均按6.3.2进行。7结果计算试样中待测物的含量X按公式（1）计算： 式中：X——试样中待测物的含量，μg/kg；c——试样溶液中待测物浓度，μg/L；V1——提取溶液体积，mL；V2——上柱溶液体积，mL；V3——定容体积，mL；m——试样质量，g。8检出限和定量限6-姜酚的检出限为1.2μg/kg，定量限为4.0μg/kg；8-姜酚、10-姜酚的检出限为0.3μg/kg，定量限为1.0μg/kg；6-姜烯酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚的检出限为5μg/kg，定量限为10μg/kg。9回收率与精密度方法的回收率为86.6~118.3%，相对标准偏差为0.7~6.2%。10允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。RelativeAbundanceRelativeAbundance（资料性附录）标准溶液SRM质谱图000000图A.16种化合物标准品定量SRM离子对色谱图（资料性附录）六种化合物的参考保留时间和离子对参数表B.1六种化合物的参考保留时间和离子对参数化合物保留时间（min）RFLens定量离子对（m/z）碰