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文档简介

血清葡萄糖浓度的测定〔GOD-POD法〕1编辑ppt实验目的1、掌握血糖变化的临床意义。2、掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理。2编辑ppt生理性高血糖

可见于摄入高塘食物后，或情绪紧张肾上腺分泌增加时。生理性低血糖

见于饥饿和剧烈运动时。临床意义低血糖<2.8mmol/L高血糖〔空腹〕>7.1mmol/L3编辑ppt临床意义病理性高血糖糖尿病：胰岛素绝对或相对缺乏的糖尿病患者。内分泌腺功能障碍：引起各种对抗胰岛素的激素分泌过多，或升高血糖的激素增多引起的高血糖。〔胰岛素是唯一降低血糖的激素〕颅内压增高：可刺激血糖中枢，引起血糖增高。如脑膜炎、颅外伤、颅内出血等。脱水引起的高血塘：如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。病理性低血糖特发性功能性低血糖最多见，其次是药源性、肝源性和胰岛素瘤等。4编辑ppt实验原理——

酶法分析偶联酶反响定量法：ABC酶1酶2使用此方法条件：当单酶反响的底物或产物用物理化学手段不能区分时

〔即：当测定A或B很困难时，可用酶2作为指示酶，通过测定C的含量来间接测定A的含量〕5编辑ppt实验原理——

酶法分析以H2O2酶作指示酶系统：〔本次实验使用方法〕某底物H2O2显色过氧化物酶底物相应酶H2O2氧化色素原吸光度过氧化物酶的底物有两类：1.

单一色素原：邻联茴香胺、二氨基联苯胺、四甲基联苯胺等2.

成对色素原：苯酚与4-氨基安替比林

本次实验所使用的两种色素原同时存在以脱氢酶作指示酶系统：〔略〕6编辑ppt实验原理葡萄糖苯酚O2葡萄糖氧化酶〔GOD〕葡萄糖酸H2O红色醌类化合物4-氨基安替比林过氧化物酶〔POD〕H2O2氧化色素原2

H2O27编辑ppt实验器材与试剂器材：5mL移液管，微量可调式移液器，721E分光光度计，37℃恒温水浴。试剂：1、0.1mol/L磷酸盐缓冲液〔pH7.0〕2、酶试剂4℃保存3、酚溶液用棕色瓶贮存4、酶酚混合试剂酶试剂与酚溶液等量混合5、苯甲酸钠溶液〔12mmol/L〕6、葡萄糖标准储存液〔100mmol/L〕7、葡萄糖标准工作液〔5mmol/L〕8编辑ppt操作步骤试剂/mL空白管标准管测定管血清------0.020葡萄糖标准液---0.020---蒸馏水0.020------酶酚混合试剂3.003.003.00先取3支试管，然后按表格操作混匀，置于37℃水浴中，保温25min，在波长510nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管的吸管度9编辑ppt计算公式血清葡萄糖浓度=A

测定A

标准X5

mmol/L葡萄糖标准液5

mmol/L参考值：空腹血清葡萄糖浓度：3.89

~

6.11

mmol/L10编辑ppt1、葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿酸葡萄糖含量。〔因为尿液中等等尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过氧化物酶反响，而造成结果假性偏低。〕2、血液样品需及时别离血细胞。〔因为红细胞的酵解将导致测定结果偏低。建议测定样品以草酸钾-氟化钠

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