微生物培养标本采集标准化

微生物培养标本采集标准化培训

1整理ppt我们应该追求：

“准确的病原学诊断〞

“针对性病原学治疗〞

正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！

微生物让人类步步为营!2整理ppt

随着现代医学的进步和人类对疾病的不断认识，医学的学科分类越来越细，疾病的分类越来越完善，而与之相关的实验室检验也日趋精密复杂。在多数情况下，实验室检验比病人的主诉敏感、准确、客观，而现代医学对疾病的诊断和治疗越来越依赖于实验室检验结果。“君子慎始，差之毫厘，谬以千里〞

——?礼记?3整理ppt良好的标本是成功了一半！为了取得准确的、可靠的检验结果，必须取得高质量的标本。高质量的标本是高质量的检验的第一步。没有高质量的标本，再先进、再精密的仪器也得不出准确的结果，而很多采集标本的患者和医务人员都有无视了标本的采集质量而引起结果很大的偏差的经历。4整理ppt标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关键；但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道问题所在之处，造成的后果是？．．．．．．

临床医生最不能接受的问题:阳性率低、标本污染5整理ppt棉花纤维+竹/木条

抑菌区是因为：植物分泌出来的：脂肪酸；树脂；福尔马林；6整理ppt氯气，重金属与胶水的影响

7整理ppt推荐使用专业运送培养基

多用途运送系统–需氧+厌氧低氧化的环境–不会对标本的微生物造成损害拭子是深入培养基中来保护苛养菌与厌氧菌两面是以塑料密封,不透水和漏气–减少污染和维持缺氧环境8整理ppt流感嗜血杆菌在三种不

同的运送基的存活率9整理ppt根本原那么1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.棉拭子标本宜用运送培养基6.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂8.送检标本应注明来源和检验目的10整理ppt如何提高细菌阳性检出率？标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本高质量、多种别离培养基培养环境11整理ppt“正确的微生物学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。〞

——著名的临床微生物检验专著ManualofClinicalMicrobiology的主编PatrickMurray12整理ppt细菌学试验的各种标本的运送及贮存条件

13整理ppt正常菌群的分布位部常见菌种皮肤表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等口腔链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、类白喉杆菌等鼻咽腔甲型链球菌、卡他球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等眼结膜皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等胃正常一般无菌

肠道类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜杆菌等阴道乳酸杆菌、白色念球菌、类白喉杆菌、大肠杆菌等

尿道表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、耻垢杆菌等14整理ppt血培养标本采集、运送标准化操作15整理ppt一、血培养指征患者出现寒战、体温超过38℃或低体温，疑心血流感染时，尤其存在以下情况时，应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎；留置中心静脉导管超过72小时；感染性心内膜炎；骨髓炎；有严重根底疾病；免疫缺陷伴全身感染病症；临床医生疑心有血液感染可能的其他情况。16整理ppt二、采血时机一旦疑心有血流感染可能，应立即采血做血培养，最好在抗生素使用前或停用抗生素24小时后，以寒战、发热时采集为宜。17整理ppt2023/12/251818整理ppt

三、采血流程㈠消毒1、培养瓶消毒程序：用消毒液消毒培养瓶橡皮塞，待枯燥后使用。2、皮肤消毒程序：用消毒液从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达5cm以上，待消毒液挥发枯燥后〔常需30秒以上〕穿刺采血。㈡静脉穿刺和培养瓶接种成人用注射器无菌穿刺取血后，排尽针头内空气，直接注入血培养瓶，勿换针头〔如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头〕，先注入厌氧培养瓶，防止注入空气，然后注入需氧培养瓶，轻轻混匀以防血液凝固。近年来，临床普遍采用负压血培养瓶，将血从患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污染环节。19整理ppt㈢本卷须知1、检验单需注明抗菌药物使用情况、血液采集时间和部位、临床诊断等患者信息。2、采血部位通常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗生素的静脉处采血。除非疑心有导管相关的血流感染，否那么不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管易被皮肤正常菌群污染。3、采血次数：对于成年患者，应该同时分别在两个部位采集血标本，在两个不同部位别离到同样菌种才能确定是病原菌。20整理ppt21整理ppt4、细菌性心内膜炎：在24小时内取血3次，每次间隔不少于30分钟。必要时次日再做血培养2次。5、采血量：以培养基与血液之比10:1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。采血量少会明显降低阳性率。成人每次每培养瓶采血8~10ml，婴幼儿每次培养瓶采血2ml。22整理ppt23整理ppt四、运送要求1、所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2小时内，如果不能及时送检，宜置于室温环境。血培养瓶送到检验科放入培养箱前，不应暂存于冰箱内。2、送检标本应正确粘贴条形码，注明采样时间和送检时间。3、平安防护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。24整理ppt25整理ppt26整理ppt27整理ppt28整理ppt29整理ppt尿液标本采集和运送标准化操作30整理ppt一、采集时机宜为抗菌药物使用前的清晨第一次尿液。二、采集方法〔一〕、清洁中段尿1、女性：采集前用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液等冲洗外阴，用手指分开阴唇，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10~20ml于无菌容器内。2、男性：采集前用肥皂水或0.05%~0.1%的碘伏溶液清洗尿道口，擦干后上翻包皮，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10~20ml于无菌容器内。〔二〕、耻骨上膀胱穿刺主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿，脊柱损伤患者的尿液采集。先用0.25%的碘伏消毒穿刺部位皮肤，然后使用无菌注射器直接从耻骨联合与脐连线上高于耻骨联合2cm处刺入膀胱吸取尿液10~20ml于无菌容器内。31整理ppt〔三〕、导尿管尿1、直接导尿法：使用0.05%~0.1%的碘伏溶液消毒会阴局部，用导尿管直接经尿道插入膀胱，先弃其前段尿液约15ml，再留取中段尿10~20ml于无菌容器内。2、留置导尿管法：医院内尿路感染中，临床最常用方法。采集前先夹住导尿管，采集时那么松管弃其前段尿液，使用0.25%~0.5%的碘伏消毒导尿管的采样部位，使用无菌注射器斜刺入导尿管〔从采样口或靠近尿道的导尿管管壁〕抽取10~20ml尿液于无菌容器内。3、回肠造口导尿管法：摘除导管，弃去里面的尿液，先用0.05%~0.1%的碘伏消毒吻合口，再将导尿管插入到清洁的吻合口，直至筋膜的深部采集10~20ml尿液于无菌容器内。32整理ppt〔四〕、小儿收集包对于无自控能力的小儿可应用收集包采集尿液，这种装置由于很难防止会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。三、标本运送标本采集后应及时送检并接种，室温下保持时间不宜超过2小时〔夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存〕。如果不能及时运送或接种，应4℃冷藏。但保存时间也不应超过8小时。33整理ppt四、本卷须知1.不应从集尿袋中采集尿液。2.尿液中不应加防腐剂或消毒剂3.假设尿液培养前患者曾使用抗菌药物，应反复屡次送检。4.屡次采集或24小时尿液不应用于尿液培养。5.除非进行流行病学调查，不应对长期留置导尿管患者常规进行尿液培养。6.培养结果应结合临床表现、菌落计数以及微生物种类等进行综合判断。34整理ppt手术部位感染标本标准化操作35整理ppt一、一般原那么1.在抗菌药物使用前，且仅在有临床感染病症或伤口恶化或长期不能愈合时采集标本。2.皮肤或黏膜外表的清洁。⑴闭合伤口和穿刺物标本：消毒方法同血培养标本的皮肤消毒。⑵开放伤口：无菌生理盐水充分冲洗伤口部位，不可以用消毒剂。3.采集新鲜的感染组织，防止采集浅表的组织碎屑。4.假设可以采集穿刺物或活检标本，应防止拭子标本。二、容器1.较大的标本：含有少量生理盐水的带螺纹口的无菌塑料容器。2.标本较小或拭子标本：MW&ETRANSWAB运输培养基，适用于需氧和厌氧菌。36整理ppt三、采集方法㈠封闭性脓肿1.注射器穿刺抽取脓液。2.假设无法抽到脓液，应先皮下注射少量无菌生理盐水，再次穿刺抽吸脓液；假设脓液过多，应先切开引流，在基底部或脓肿壁采集标本。脓液的量以大于1ml为宜。3.排除注射器内部及针头的气体，用无菌橡皮塞封闭针头送检；或直接打入血培养瓶中。疑为厌氧菌，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中。㈡组织和活检标本1.采集足够大的组织，体积以1mm3为宜，防止在坏死区域采集。2.将小块的组织放在运输培养基内；较大的放在无菌容器中，并参加少量无菌生理盐水。37整理ppt㈢开放伤口1.无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除外表的渗出物和碎屑。2.用拭子深入伤口的基底部或伤口-正常组织边缘部采集两个标本，分别用于培养和革兰氏染色。四、标本的标识填写患者信息、标本类型〔深部组织、表浅组织、脓肿和穿刺物等〕、标本的来源〔腹腔、腿和上臂等〕，记录标本采集的日期和时间及是否在使用抗生药物前采集，选择检查工程〔需氧培养或厌氧培养〕。五、标本的送检为了更好地别离病原菌，标本应在采集后的30分钟内送到实验室，送检时应保持标本的湿润〔尽量采用运输培养基，组织可以放在生理盐水中〕。在送检前或运送过程中，禁止将标本放于冰箱。假设不能及时送检，运输培养基中标本应室温保存。但最长不可超过24小时。38整理ppt脓及创伤感染标本的采

集及运送标准化操作

39整理ppt

(1)应首先用无菌生理盐水清洗脓液及病灶的杂菌，再采集标本，以免影响检验结果。(2)一般用棉拭子采取脓血液及病灶的深部的分泌物，瘘管也可以无菌手续采取组织放入无菌试管内送检。40整理ppt

(3)脓肿标本以无菌注射器抽取为好，最好在切开排脓时，以无菌棉拭子采取，也可以将沾有脓汁的最内层敷料放人无菌平皿中送检。41整理ppt〔4〕先用无菌生理盐水棉签擦拭切口外表2遍，去除外表的污染菌，再用含生理盐水的无菌棉签用力擦拭病灶边缘或脓腔囊壁后放入无菌试管中送细菌室。厌氧培养时应吸取深部标本而不能擦拭外表。42整理ppt其他事项疑有放线菌感染时选取脓液中的“硫磺样颗粒〞于无菌容器内送检当创伤出血，敷用药物2h内及烧伤在12h内不应采集标本。43整理ppt脑脊液培养标本的采集

及运送标准化操作

44整理ppt采集时间：疑心脑膜炎时应立即采集脑脊液，最是在应用抗生素之前采集脑脊液。采集方法：无菌腰穿采集脑脊液3～5ml，分装到3个无菌小瓶中〔各1～2ml〕。用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于2ml。45整理ppt标本采集后注入无菌小瓶中送检也可将抽取液直接注入血培养瓶,用血培养仪培养。脑膜炎奈瑟菌离体后会迅速自溶,肺炎链球菌和流感嗜血杆菌也很容易死亡,因此,标本应立即送检,并注意保温、防枯燥。切不可置冰箱保存,否那么会影响检出率。46整理ppt穿刺液类标本的采取穿刺液培养标本包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液等穿刺液培养标本。采集时间：一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前，或在停止使用抗菌药物之后2-3d采集标本。47整理ppt采集方法：①无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本；②标本采集量应＞1ml。胸腔积液、腹水可抽取10ml,心包液、关节液等可抽取2～5ml。③标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检也可将抽取液直接注入血培养瓶,用血培养仪培养。48整理ppt胃液及胆汁培养标本抽取空腹胃液5ml，置无菌管内送检；胆汁培养标本由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁，采集胆汁量为5ml，置无菌管内送检；胃液和胆汁采集后必须立即送检。49整理ppt眼.耳.鼻培养标本的采取眼、耳、鼻培养标本用拭子常规采集各种标本。标本采集过程中应注意防止被黏膜上的正常菌群污染，标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。50整理ppt

痰标本采集与运送标准化操作51整理ppt一、采集目的一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。二、一般原那么1、采集标本的最正确时机应在使用抗菌药物之前。2、宜采集清晨第二口痰。3、对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天一次，连续2~3天。不建议24小时内屡次采集送检，除非痰液外观性状出现改变。4、疑心分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。52整理ppt5、如何获得较高“质量〞的痰？

清晨头几口(2-3口〕痰菌的阳性率高，因为呼吸道内的分泌物经过一夜的聚集总比白天吐的1口痰中含菌量多。如果病人痰多那么以第3-4口痰为更好，这是因为头1-2口痰往往混有咽喉部的分泌物，而第3—4口痰来自呼吸道的深部。要想留到理想的痰标本，病人清晨起床后先做几次深呼吸，然后用力咳嗽以得到呼吸道深部的痰。所以在告诉病人留痰标本时，不应仅简单地说一声留早晨第一口痰就算了，而应具体加以指导，不然痰培养的阳性率不会高。

53整理ppt三、采集方法㈠自然咳痰法与雾化导痰法1、用物准备：无菌容器、生理盐水〔250ml或500ml〕、化验单。2、核对患者床号、姓名等。3、无痰或痰量极少者可用3%~5%氯化钠溶液5ml雾化吸入约5分钟后留取痰液。4、如有可能，应在医护人员直视下留取清晨第二口痰。嘱咐患者留取前摘去牙托、清洁口腔、如刷牙后反复生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深部咳出痰液，置无菌容器内，应尽可能防止唾液及鼻咽局部泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。㈡支气管镜法鼻或口腔插入支气管镜。常用采集方法有经支气管镜吸引、支气管肺泡灌洗、防污染毛刷采用或防污染支气管肺泡灌洗等。54整理ppt㈢经人工气道吸引法1、用物准备：负压吸引器、生理盐水、一次性吸痰管、无菌手套、无菌容器〔试管〕、化验单。2、核对患者床号、姓名等。3、将患者头部转向操作者一侧。4、进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，调节吸引器至适宜负压〔成人：40.0~53.3kPa；小儿：＜40.0kPa〕。5、将一次性吸痰管外包装去除，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。55整理ppt6、折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出。将一次性吸痰管与吸引器别离〔使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15秒，吸痰前后需吸入高浓度氧气1——2分钟〕。7、将痰液注入无菌容器内，如痰液黏稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲洗入无菌容器内。四、运送和保存应在2小时内送至实验室，否那么应4℃冷藏，但放置时间不可超过24小时。56整理ppt57整理ppt上呼吸道标本的采集、运送标准化操作58整理ppt【标本送检指征】1病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，疑心为咽部链球菌感染，应做细菌培养。2细菌性咽－扁桃体炎：明显咽痛、畏寒、发热，体温可达39℃以上。3上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管－支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。59整理ppt【标本的采集方法】嘱患者先用清水漱口，由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引,用压舌板将舌向下向外压，用无菌棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧,反复擦拭数次然后送检，拭子应防止触及舌、口腔粘膜和唾液。60整理ppt生殖道标本的采集1、男性标本：〔1〕如疑为急性淋病奈瑟菌或其他化脓性细菌感染应在清洗龟头部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒剂消毒后，挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取，立即送检，或以专用的细拭子插入尿道口1-2cm，停留十余秒钟轻轻旋转采集标本置无菌容器。〔2〕如疑为前列腺炎、精囊炎的慢性淋病耐瑟菌感染应由医师按摩前列腺，以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。61整理ppt2、女性标本：〔1〕成年妇女自宫颈采取标本，应在扩阴器的支持下，选取有炎症或分泌物部位，先以无菌棉拭子拭去表浅层分泌物，再用另一拭子取分泌物送检。如做厌氧或真菌培养应另外采取标本。外阴糜烂：用生理盐水清洗后用无菌棉拭子擦洗，取边缘的分泌物至无菌容器，立即送检。〔2〕如未成年幼女疑患性病传播疾病时，不应使用扩阴器，以一无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检。62整理ppt粪便标本采集63整理ppt【标本送检指征】1急性腹泻：大便次数明显增多，腹痛，里急后重，往往伴有发热，大便性状为粘液便或脓血便。2慢性腹泻：大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等病症。3无痛性大量水样便或米泔样稀便。4先吐后泻：恶心、呕吐、腹痛、腹泻。有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。5抗生素治疗后腹泻：常发生于长期抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。6高热惊厥：通常为中毒性痢疾，多见于婴幼儿和小儿。64整理ppt肠道正常菌群比较复杂，在肠道中菌群间有共生或过路、互不相干和制约关系等现象。一旦失去了正常生态平衡，在临床上的一个表现就是菌群失调症。如常住细菌在种群和数量上的比例失调就能引起慢性腹泻，因此在留取粪便标本时应注意防止细菌污染。65整理ppt粪便标本采集时应挑取有脓血、粘液局部的粪便2—3g；液状粪便取絮状物，盛于灭菌的广口盒中，并及时送检和接种。在无法获得粪便时，可用无菌生理盐水或增菌液湿润直肠，将棉拭子插入肛门4～5cm深处(小儿2～3cm)，轻轻转动一周擦取直肠外表的粘液后取出，盛入无菌试管或保存液中送检。66整理ppt采集时间：1.腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便；2.伤寒患者于发病2w以后采集粪便；3.疑心霍乱时立即采集粪便送检。67整理ppt厌氧菌感染培养标本标本采集1.要注意防止标本污染和与空气接触，严格遵守无菌操作；2.用注射器抽取胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液或无菌手术抽出脓液；3.抽出液体标本后，要尽快排除注射器内的空气。68整理ppt厌氧菌感染培养标本标本运送①标本采集后不得冰箱储存，必须尽快〔半小时内〕送实验室；②运送方法：a注射器运送〔标本抽取后尽快排除空气〕或接种到专门的运送培养基中直接运送；b含运送培养基的无氧小瓶运送；c厌氧罐运送〔组织块〕；d大量液体标本运送时要装满标本