丙泊酚对大鼠急性脑损伤S100β蛋白、脑组织总钙、含水量及组织形态学的影响

丙泊酚对大鼠急性脑损伤S100β蛋白、脑组织总钙、含水量及组织形态学的影响目的：观察丙泊酚对大鼠急性脑损伤S100β蛋白含量、脑组织总钙含量、脑含水量及组织形态学的变化，探讨丙泊酚对大鼠急性脑损伤脑组织的影响。方法：健康雄性SD大鼠84只采用随机数字表法分为六组，每组14只（n=14）。假手术组（S组）、脑损伤组（I组）、脂肪乳组（F组）、丙泊酚低剂量组（L组）、丙泊酚中剂量组（M组）和丙泊酚高剂量组（H组）。采用改良Feeney法自由落体脑损伤装置，制备大鼠脑损伤模型：SD大鼠采用10%水合氯醛以350mg/kg腹腔内注射进行麻醉，待其翻正反射、睫毛反射消失提示麻醉成功。将大鼠仰卧位固定于手术台上，气管切开插管，接小动物呼吸机，潮气量2～3ml/100g，通气频率50～60次/min，吸呼比1:2，分离左侧股静脉，并置管用于静脉泵药；分离右侧颈总动脉并置管用于采集血样。动、静脉置管后，俯卧位固定大鼠，碘伏消毒皮肤，无菌操作，正中切开，剥离骨膜，暴露右顶骨，用牙科钻在冠状缝后1.5mm，中线旁2.5mm处钻一直径5mm骨窗，保持硬膜完整。垫片置于骨窗上，用20g砝码于30cm高处沿着套管自由坠落，致右顶叶脑损伤，打击力为600g·cm，打击后用骨蜡封闭骨窗，缝合头皮。S组仅颅骨开窗后用骨蜡封闭，不实施打击，经左侧股静脉以3.49mlkg-1h-1的速度持续泵注等容量的0.9%生理盐水60min；I组在脑损伤模型制备成功后，经左侧股静脉以3.49mlkg-1h-1的速度持续泵注等容量的0.9%生理盐水60min；F组在脑损伤模型制备成功后，经左侧股静脉以3.49mlkg-1h-1的速度持续泵注等容量的20%脂肪乳60min；L组、M组和H组在脑损伤模型制备成功后，经左侧股静脉分别以17.46mgkg-1h-1、34.92mgkg-1h-1和69.84mgkg-1h-1的速度持续泵注丙泊酚60min。在脑损伤模型制备成功后，各药物干预15min（T15）和60min（T60）时，每组随机选取8只大鼠取动脉血各1.5ml，检测血清S100β蛋白含量，各药物干预60min时迅速断头取脑，检测脑组织总钙含量及脑组织含水量；其余6只大鼠光镜下观察右侧大脑皮层组织形态及病理学变化，其中2只大鼠电镜下观察右侧大脑皮层神经细胞超微结构变化。结果：1、一般情况：完成实验的84只大鼠，各组大鼠的体重无统计学意义。2、血清S100β蛋白含量的比较：与S组比较，其余五组在T15和T60时血清S100β蛋白含量均明显升高（P＜0.05）；与I组比较，在T15和T60时，L组、M组和H组血清S100β蛋白含量均显著降低（P＜0.05）；与F组比较，在T15时和T60时L组、M组和H组血清S100β蛋白含量均显著降低（P＜0.05）；与L组比较，在T15时H组血清S100β蛋白含量明显升高（P＜0.05），在T60时M组和H组血清S100β蛋白含量均显著降低（P＜0.05）；与M组比较，在T15和T60时H组血清S100β蛋白含量均明显升高（P＜0.05）；与T15时比较，L组、M组和H组在T60时血清S100β蛋白含量均显著减少（P＜0.05）。3、脑组织总钙含量的比较：与S组比较，其余五组脑组织总钙含量均明显升高（P＜0.05）；与I组比较，L组、M组和H组脑组织总钙含量均显著降低（P＜0.05）；与F组比较，L组、M组和H组脑组织总钙含量均显著降低（P＜0.05）；与L组比较，M组和H组脑组织总钙含量均显著降低（P＜0.05）；与M组比较，H组脑组织总钙含量明显升高（P＜0.05）。4、脑组织含水量的比较：与S组比较，I组、F组和H组脑组织含水量均增多（P＜0.05）；与I组比较，L组脑组织含水量减少（P＜0.05）；与F组比较，L组脑组织含水量减少（P＜0.05）；与L组比较，H组脑组织含水量增多（P＜0.05）；与M组比较，H组脑组织含水量增多（P＜0.05）。5、大脑皮层组织光镜结果比较：S组：细胞形态结构完整，细胞核无固缩，细胞无水肿；I组：细胞形态结构破坏，细胞核固缩，细胞严重水肿，神经细胞变性坏死多见；F组：细胞形态结构破坏，细胞核固缩，细胞严重水肿，神经细胞变性坏死多见，与I组无差别；L组：细胞形态结构不规整，细胞核固缩和神经细胞变性坏死较I组和F组减少，细胞水肿较I组和F组减轻；M组：细胞形态结构较规整，细胞核固缩明显减轻，神经细胞变性坏死较I组和F组少见，细胞水肿较I组和F组明显减轻，可见正常神经细胞；H组：细胞形态结构不规整，细胞核固缩较I组和F组少见，细胞水肿较I组和F组减轻。丙泊酚各剂量组细胞核固缩、神经细胞变性坏死以及细胞水肿程度M组最轻。6、大脑皮层神经细胞超微结构透射电镜结果比较：S组：核膜规整，核仁均匀，染色质均匀，粗面内质网及线粒体无扩张，无肿胀，线粒体嵴可见，突触前膜、突触后膜及突触间隙清晰可见。I组：核膜不规则，严重内陷，核固缩严重，染色质聚集或边集，线粒体明显肿胀，空泡样变，线粒体嵴断裂，粗面内质网明显扩张或消失，数目减少，突触前膜、突触后膜不清晰，多数有融合，突触间隙模糊不清。F组：核膜不规则，严重内陷，核固缩严重，染色质聚集或边集，线粒体明显肿胀，空泡样变，线粒体嵴断裂，粗面内质网明显扩张或消失，数目减少，突触前膜、突触后膜不清晰，多数有融合，突触间隙模糊不清，与I组无差别。L组：核膜欠规则，内陷不严重，核固缩，染色质聚集或边集，线粒体肿胀，粗面内质网轻度扩张，个别正常，突触前膜、突触后膜尚清晰，突触间隙大致正常，少数有融合，突触小泡增多不明显。M组：核膜较规则，无明显内陷，偶见核固缩，染色质较均匀，线粒体轻度肿胀，线粒体嵴可见，粗面内质网轻度扩张，数目增多，大多正常，突触前膜、突触后膜清晰，突触间隙大致正常，少数有融合，突触小泡明显增多。H组：核膜较完整，内陷不明显，轻度核固缩，染色质轻度聚集或边集，线粒体轻度肿胀，线粒体嵴可见，粗面内质网明显扩张，数量增多，突触前膜、突触后膜尚清晰，突触间隙大致正常，少数有融合，突触小泡增多不明显。结论：丙泊酚能够减轻大