盐酸黄连素肠溶微囊的制备及体外溶出度考察

盐酸黄连素肠溶微囊的制备及体外溶出度考察

微囊是近年来发展迅速、具有开发潜力的新型药物，在药物释放系统的研究中得到了广泛应用。微囊化技术具有以下优点:①掩盖药物的不良气味及口味;②提高药物的稳定性;③防止药物在胃内失活或对胃的刺激,方便临床用药。盐酸黄连素临床上常用于肠道感染、菌痢等疾病的治疗。盐酸黄连素味极苦,给患者特别是儿童服用带来不便;并且常见一些胃肠道不良反应,影响了临床应用。彭智聪等通过正交法制备了黄连素微囊并进一步将其制成干糖浆,刘洁等采用聚丙烯酸树脂Ⅳ号制备了盐酸黄连素微囊并测定了其溶出度。本实验采用溶剂挥发法制备盐酸黄连素肠溶微囊,不仅可有效掩盖药物的苦味,改善患者服药的顺应性、方便临床用药,而且可以实现药物直接在肠道释放,从而提高疗效,降低其胃肠道的不良反应。1试验仪器UV-2102PC型紫外可见分光光度计[尤尼柯(上海)仪器有限公司];XSJ-2型双筒生物显微镜(重庆光学仪器厂);ZRS-8G智能溶出试验仪(天津大学无线电厂);85-2恒温磁力搅拌器(常州国华电器有限公司);盐酸黄连素(陕西旭煌植物科技发展有限公司,含量为98%,批号:051201);聚丙烯酸树脂Ⅱ号(上海德祥医药技术有限公司);丙酮,甲醇,油酸山梨醇酯,液体石蜡,硬脂酸铝。2方法和结果2.1微囊配方的确定取适量聚丙烯酸树脂Ⅱ号,溶于适量丙酮和甲醇的混合溶剂中,于室温条件下搅拌,分散均匀后,再加入一定量的盐酸黄连素,于10℃水浴中搅拌,使之分散均匀后倒入10℃的适量液体石蜡中,继续搅拌并逐渐升温至35℃,保持3～4h,过滤,将所得微囊用正己烷冲洗干净,干燥即可。根据前期预实验结果,确定影响微囊质量的因素主要有:油酸山梨醇酯的质量A(W乳化剂);丙酮与甲醇的体积之比B(V丙酮/V甲醇);硬脂酸铝的质量C(W抗黏剂);盐酸黄连素的质量D(W药物)4个正交设计内容,确定聚丙烯酸树脂Ⅱ号量为0.30g,液体石蜡的体积为75mL。以A、B、C、D为影响因素,每个因素选取3个水平,见表1,以微囊的包封率和载药量为优化指标,用正交表L9(34)安排实验。2.2标准曲线的绘制精密称取盐酸黄连素对照品25.00mg,置100mL量瓶中,加少许无水乙醇溶解,加人工肠液(pH6.8)至刻度,制成0.25g·L-1的母液。分别精密吸取0.4,0.8,1.2,1.6,2.0mL母液各置50mL量瓶中,加人工肠液至刻度,摇匀。配制成质量浓度为2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mg·L-1的5份溶液,用紫外分光光度计在最大吸收波长231nm处测定其吸光度,以吸收度对浓度进行线性回归,作标准曲线得标准曲线方程Y=67.9X+0.007,R2=0.9995。表明在2.0～10.0mg·L-1质量浓度范围内,线性关系良好。2.3载药量与包封率的计算精密称取盐酸黄连素肠溶微囊适量(约相当于黄连素20mg),用少量的纯化水洗涤3次后,弃去水洗液,残余微囊70℃烘干,加入人工肠液加热使微囊破坏,药物完全溶出后过滤至100mL的量瓶中,并加入人工肠液至刻度。再精密吸取2mL于50mL的量瓶中,加入人工肠液至刻度,于231nm的波长处测定其吸收度,代入回归方程求盐酸黄连素的浓度,计算水洗后微囊中药物的实际含量。另称取等量微囊,加入人工肠液加热使微囊破坏,其余步骤同上,计算载药量。以水洗后微囊中药物实际含量与载药量的比值的百分数计算包封率。对载药量和包封率进行综合评分,载药量最大为满分10分,其余微囊的载药量与最大载药量相比乘10得微囊载药量的得分。包封率的评分标准同载药量。实验结果采用加权评分方法,加权系数由实验目的来权衡,载药量和包封率的加权系数均为0.5。见表2。由表2可见,实验设计的A、B、C、D四因素均影响微囊的载药量和包封率,其极差分别是2.94,6.13,3.39,1.19,即溶剂>抗黏剂>乳化剂>药物(B-C-A-D)。以微囊的包封率和载药量为考察指标,确定微囊制备的最佳工艺条件是A1B2C1D1,即树脂量为0.30g,抗黏剂为0.03g,丙酮体积为5.0mL,甲醇体积为1.0mL,液体石蜡体积为75.0mL,油酸山梨醇酯量为0.40g,盐酸黄连素质量为0.05g,经验证此工艺制备的微囊包封率为85.00%,载药量为11.18%。2.4溶出度测定方法精密称取盐酸黄连素肠溶微囊适量(约相当于黄连素15.00mg),按中国药典2000版二部溶出度测定方法,分别以磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(pH6.4、6.8、7.4)及盐酸溶液(pH1.0)为溶出介质,每种介质测定6个平行样,在(37±0.5)℃、75r·min-1条件下进行溶出度试验。分别于10,20,40,60,90,120min(其中pH6.4于150、180min继续取样两次)取样5mL(同时补充同体积同温新鲜溶出介质),依法测定其对应吸光度,计算样品浓度。依下列公式,计算累积溶出百分量:Qn(%)=VsΣk=1n−1Ck+VrCnWQn(%)=VsΣk=1n-1Ck+VrCnW式中Vs为取样体积,Vr为介质体积,C为样品浓度,n为取样次数,W为盐酸黄连素肠溶微囊的含药量。然后将平均累计溶出百分量对时间作图,得溶出曲线,结果见图1。盐酸黄连素肠溶微囊在pH6.8、7.4的溶出介质中60min内溶出超过70%,在pH6.4的溶出介质中,10min内溶出低于20%,但在pH1.0的溶出介质中,120min内溶出低于10%。2.5目镜效果对比依优化的实验结果,制备盐酸黄连素微囊,然后进行评价。在目镜为4倍的光学显微镜下观察拍照,结果见图2。可观察到微囊形态圆整、表面光洁、大小比较均匀。3盐酸黄连素肠溶微囊的制备和释放药物的确定聚丙烯酸树脂是目前国内外广泛应用的包衣材料,是甲基丙烯酸与甲基丙烯酸及其酯类分别搭配相互共聚而成。用它作为包衣材料,易成膜,防潮性能好,不易崩解,具有安全、惰性、溶解速度快等优点。彭智聪等采用明胶用冷凝法将盐酸黄连素制成微囊,再进一步制成干糖浆。刘洁等采用聚丙烯酸树脂Ⅳ制备了盐酸黄连素微囊,该微囊在水中几乎并不溶解,在酸性介质中则可快速溶解,30min内溶出度在70%以上。本实验利用聚丙烯酸树脂Ⅱ号能溶于有机溶剂丙酮和甲醇的特点,采用溶剂挥发法制备了盐酸黄连素肠溶微囊。体外溶出结果显示,该微囊在酸性介质中并不溶解,120min内溶出低于10%,在人工肠液中则可快速溶解并释放出药物,60min内溶出超过70%,可以实现药物直接在肠道释放,避免药物在胃液中释放而产生不良反应。在pH为6.4的溶出介质中,10min内溶出度低于20%,从而使患者在服用时,不会因微囊在口腔中短时间释放过多而感觉味苦。本实验采用正交实验优化制