色甘酸钠滴眼剂的稳定性研究

色甘酸钠滴眼剂的稳定性研究

彩甘钠（cpg）通常用于临床应用，以防治气管哮喘和过敏性鼻炎等过敏疾病，并在春季卡他性膜炎综合征。美国药典XXI版第三增补版收载的2%SCG滴眼剂,为加有适当稳定剂和抑菌剂的灭菌水溶液,要求作灭菌试验。澳大利亚处方集(APF)对SCG滴眼剂采用过滤法灭菌。该滴眼剂的热稳定性未见报道。本文应用薄层色谱法测定SCG滴眼剂的含量并研究其热稳定性。一、滴眼剂原液未经100灭菌、封闭冷却冷却、干燥双波长薄层扫描仪(岛津CS-930型),色甘酸钠对照品(99.26%)(天津中津制药厂),色甘酸钠滴眼剂(湖北潜江制药厂)。试验溶液Ⅰ组:滴眼剂原液(未经100℃灭菌);Ⅱ组:滴眼剂原液封于安瓿中经100℃加热30min灭菌后取出,迅速冷却至室温。Ⅲ组与Ⅳ组:滴眼剂原液按体积比100:1加入30%双氧水,分别避光放置10天与15天。Ⅴ组:滴眼剂原液按体积比100:1加入30%双氧水后,立即封于安瓿中经100℃加热煮沸10min,迅速冷却至室温。Ⅵ组:SCG水溶液(未加EDTA-2Na和尼泊金乙酯)经日照40天已自然变黄。二、试验条件1.薄层板的制备取硅胶GF254加入0.6%CMC-Na溶液按1:3的比例调匀,用涂铺器制成20×10cm,0.3mm厚的薄层板,阴干后经110℃活化1.5h,冷却后置干燥器备用。2.薄膜层析效果的确定经数十种常用展开剂的实验选择,以氯仿-甲醇-冰醋酸-水(18:5:20:7)的分离效果最佳。展开前薄板需在层析缸内饱和30min。展开后薄板在UV254紫外灯下观察可见色甘酸钠斑点(Rf=0.68)呈暗红色,尼泊金乙酯斑点(Rf=0.93)呈微弱浅红色,若再经碘蒸气显色1.5h后可见微黄色分解产物斑点(Rf=0.8)(图1)。3.齿轮扫描线性化常数s光源为氘灯;狭缝2×2nm;双波长锯齿扫描;λs=272nm;λR=354nm;线性化常数×7;横轴×1;纵轴×1;DELY“Y”=0.2。三、实验方法1.标准曲线的绘制精密称取SCG对照品2.000g,以蒸馏水配制成2%SCG溶液,再用蒸馏水稀释成浓度各为2、4、6、8、10(μg/μl)的一组色甘酸钠标准溶液。在同一薄层板上定量点上5个浓度的标准溶液各1μl。直接上机扫描,所得数据以其点样量y(μg)和积分面积值x进行回归,得回归方程2.标准曲线的绘制取如上配制的一组色甘酸钠标准溶液。在同一薄层板上定量点上5个浓度的标准溶液各1μl,按层析条件展开约10cm后取出晾干,上机测定。结果见表1。3.同浓度的滴眼剂的加标检测(1)板内误差:在同一薄层板上点5个相同浓度的滴眼剂,展开后上机检测(表2)。(2)板间误差:分别在5块薄层板上点相同浓度的滴眼剂,展开后上机检测(表2)。四、稳定性试验取Ⅰ～Ⅵ组试液,分别在同一薄层板上点样1μl,按上述条件进行薄层层析和扫描,层析图谱见图1,测定结果见表3。五、求有效的试验标准根据分数有效期法求两个加速温度(T1、T2)t0.9,再以1gt0.9对作图得一直线,并外推到温室求得有效期。1把预先配制的SCG水溶液(未加稳定剂)和SCG滴眼剂封于安瓿中,各分成两组,分别置70±0.5℃水浴中40h及90±0.5℃水浴中15h后取出,迅速冷却至室温,测定其含量,将结果换算成浓度(表4)。六、色甘酸钠的稳定性色甘酸钠的分解产物可能为草酸和1,3-双(2-乙酰-3-羟基苯氧基)-2-羟基丙烷。以少量双氧水处理10天,肉眼见颜色轻度改变,但薄层展开后不见杂质斑点,检测表明含量仅下降3.82%;放置15天后颜色微黄,展开后见微弱黄色的分解产物斑点(Rf=0.8),检测表明含量下降6,87%。这说明氧化过程比较缓慢。若加入双氧水又经10min煮沸处理,则溶液明显变黄,检测表明含量下降13.99%,薄层板上可见清晰的分解产物斑点。研究表明,在色甘酸钠的浓度下降3.82%～6.87%时,薄层板上出现肉眼可见的杂质斑点。层析时此杂质与未加稳定剂而经40天日照自然变黄的色甘酸钠水溶液中的分解产物Rf值相同(均为0.8),说明为同一物质,且极性小于色甘酸钠(Rf=0.68)，可能为色酮氧化开环所致。在稳定性试验中,经100℃加热30min灭菌后与未灭菌的滴眼剂,其含量经t检验,结果p>0.01两者无差异,证明该滴眼剂可进行常规加热灭菌。本文采用分数有效期加速试验法预测2%SCG滴眼剂的有效期,并同2%SCG水溶液进行了平行对照试验(表5)。两种溶液在室温(25℃)时的有效期分别为:25914h(2.96年)和18591h(2.12年),表明2%SCG水溶液(未加EDTA-2Na和尼泊金乙酯)稳定性较差,其有效期明显低于滴眼剂,证明EDTA-2Na能有效地避免Ca2+、Mg2+及其它微量金属离子的催化作用,提高SCG的稳定性