原子吸收光谱法测定全血中微量元素

原子吸收光谱法测定全血中微量元素

人体含有各种必要的、不需要的和有害的微金属元素。准确检测这些微量元素,有利于控制人体体液的离子平衡,保障身体健康,指导人们的膳食结构。检测人体内微量元素的样本可以是唾液、体液、尿液、血液、头发和组织器官。血液样本能全面反映人体内微量元素含量情况,取样方便,已成为检测人体内微量元素最主要的样本。微波消解样品快速、完全、元素无挥发性损失、玷污小,目前在分析领域越来越受到重视和应用。本文采用微波消解全血样,消解液定容至一定体积后直接上机火焰法测铜、锌;消解液稀释20倍后上机火焰法测铁、镁;消解液用25g/L镧溶液稀释5倍后上机火焰法测钙;消解液直接上机石墨炉法测铅;消解液稀释10倍后上机石墨炉法测镉,用标准曲线法定量。结果满意。1材料和方法1.1铜的氧化预处理AA6800原子吸收光谱仪(日本岛津),附ASC6100自动进样器;MK-Ⅱ型压力自控微波溶样系统(上海新科微波技术研究所);旋转振荡器;1000mlGILSON微量移液器。镧溶液(25g/L):称取氧化镧25g,加75ml盐酸于1L容量瓶中,用去离子水定容。磷酸二氢铵(20g/L):称取磷酸二氢铵20g,以水溶解稀释至1000ml。必要时用氨水(1+1)和盐酸(1+1)调节pH值,用二硫腙去除磷酸二氢铵液中残留的铅。铁、锌、钙、镁、铜、铅和镉标准储备液(1.00mg/ml):由北京标准物质研究所购得。硝酸(1%,v/v)。水为重蒸去离子水,硝酸为工艺超纯,其它试剂为优级纯。1.2显示工作条件1.2.1火焰法测定见表1。1.2.2石墨法测定1.2.2.峰面积积分测定测定波长283.3nm,灯电流10mA,光谱通带1.0nm,氩气作保护气,峰面积积分测定,氘灯扣背景。石墨炉升温程序:干燥110℃,斜坡升温20s,保持10s;灰化850℃,斜坡升温25s,保持15s;原子化1550℃,瞬间升温,保持2s;去残2100℃,瞬间升温,保持2s。原子化时停气。1.2.2.峰面积积分测定测定波长228.8nm,灯电流8mA,光谱通带1.0nm,氩气作保护气,峰面积积分测定,氘灯扣背景。石墨炉升温程序:干燥110℃,斜坡升温20s,保持5s;灰化700℃,斜坡升温20s,保持13s;原子化1500℃,瞬间升温,保持2s;去残2100℃,瞬间升温,保持2s。原子化时停气。1.3标准溶液的制备用标准储备液逐级稀释成标准使用液系列,见表2。1.4微波消解和标准测定全血样(抽静脉血,用60g/LEDTA-2Na抗凝,置于冰箱中)于旋转振荡器上振荡混匀,用微量移液器吸取血样1000μl置于聚四氟乙烯内胆中,加入5mlHNO3,混匀,先放入电热预消解器上进行预消解,再加2mlH2O2混匀,盖上内盖进行微波消解1档3min,2档3min。消解至无色,于预消解器上脱硝后自然冷却,用硝酸定容至10ml。同时做空白试验。取此消解液直接上机火焰法测Cu、Zn,标准曲线法定量。取此消解液直接上机石墨炉法测Pb,自动进样器进样,进样量:10μl消解液+5μl磷酸二氢铵,标准曲线法定量。此消解液用硝酸溶液稀释10倍后石墨炉法测Cd,进样量:10μl消解液+5μl磷酸二氢铵,标准曲线法定量。取此消解液0.50ml,用硝酸溶液稀释定容至10ml,上机火焰法测Fe、Mg,标准曲线法定量。取此消解液1.00ml,用镧溶液稀释定容至5ml,上机火焰法测Ca,标准曲线法定量。2结果与讨论2.1消解溶剂的选择试验用HNO3、H2SO4、HClO4、HCl分别与H2O2混合作为消解混合酸。结果表明,仅HCl消解效果不佳。考虑到H2SO4介质存在对原子吸收测定影响很大,而HClO4直接与有机物接触有爆炸的危险,本法选择HNO3和H2O2混合作为消解用酸。试验表明,5mlHNO3+2mlH2O2微波1档3min,2档3min能很好地消解全血样。2.2条件选择2.2.1灰化温度的影响由于全血样组成复杂,不加基体改进剂直接测定干扰很大,测定结果很不理想。铅、镉均属于易挥发元素,如不加基体改进剂,灰化温度铅高于450℃,镉高于350℃损失会很大。加入基体改进剂磷酸二氢铵20g/L后,铅的灰化温度可提高到850℃,镉的灰化温度可提高到700℃而元素不损失。在此灰化温度下,样品中大部分干扰成分被消除。试验表明,样品消解液进样量10μl,20g/L磷酸二氢铵进样量5μl,吸光度最大且稳定而背景吸收最小。2.2.2扩大线性范围锌镁在火焰原子吸收灵敏线上测量灵敏度很高,以至于线性范围太窄,影响测量。旋转燃烧头150以适当降低仪器灵敏度扩大线性范围。这样,锌在0～1.6μg/ml,镁在0～0.80μg/ml成线性关系。2.2.3剂能生成磷酸介质中存在的磷酸根等杂质干扰钙的测定,释放剂镧能与其生成更稳定的磷酸镧而有效地把钙释放出来。试验表明,用25g/L镧溶液稀释血样消解液能很好地消除干扰成分对钙的测定。2.2.4谱线干扰的测定铁的灵敏线附近谱线很复杂,容易出现光谱干扰,适当减小狭缝可滤去一些不必要的谱线以提高测定的准确度。本法测铁选择光谱通带为0.2nm,结果理想。2.3建立待测组线性回归以标准溶液的吸光度(Y)对相应的浓度(X)进行线性回归,得7种待测组分的回归方程及相关系数。方法检出限以空白液重复测量所得标准偏差的3倍为准,方法检出限乘以稀释倍数便得原始血样的最低检测浓度,见表3。2.4标准曲线的消解取同一血样3份,在其中2份中分别加入一定量的待测元素标准液,按