流式细胞仪在不孕诊断中运用学习

精子DNA碎片率检测方法介绍（SDFA）及流式细胞仪在不孕诊断中运用ICSI(intracytoplasmicsperminjection)

卵母细胞单精子显微注射技术2.IUI(intrauterineinsemination)3.IVF4.ART主要内容1.SDFA（精子DNA碎片率检测）进一步的精液检查2.免疫性不孕/流产病因学诊断自然杀伤细胞的检测3.自然杀伤细胞检测相关试剂

SDFA检测方法背景-自从生殖领域不孕诊疗的不断发展，精液检查一直是我们所关注的，但其评价的标准的确定，还尚未达成一致

-许多检测声称是更优越的，并能给临床医生提供更多信息-我们仍然需要有统一的评价标准精子DNA碎片检测:1980开始当初声称能预测IUI,IVF,及ICSI的成功率之后，碎片率的检测一直未标准化新的数据证明：碎片率的检测能提供IUI还是IVF/ICSI助孕方式选择的参考意见

不孕患者初诊筛查流程ART初诊患者IUI患者不孕患者精液常规分析已做碎片分析未做碎片分析80-90%第一次IUI败70-80%总是失败无精子碎片率检查进行精子碎片分析IUI失败后放弃ART更高的IUI成功率大部分人在失败后不会尝试ART更多婴儿出生IUI失败的病人将行IVF/ICSI首次ART患者什么是SDFA？SDFA通过评估精子的健康状况，帮助不孕患者选择更适合的助孕方式SDFA能评估精子的DNA损伤程度，而此异常有可能引起IUI助孕的失败DNA碎片指数---DFI精子经酸处理及染色后1.DNA完整的细胞染色--绿色2.DNA受损的细胞染色--红色DNA碎片指数---DFI基于荧光强度的差异可用流式细胞仪分析检测DNA碎片指数---DFI计算受损DNA细胞所占的比值即患者精液标本的DNA碎片率指数---DFISDFA检测文献支持-1大样本多中心临床研究结果证实SDFA检测结果DFI指数：1.能指导辅助生殖助孕方式选择2.能预测辅助生殖助孕的成功率SDFA检测文献支持-2已发表的文献中SDFA检测结果---DFI指数在不同人群中的异常发生率自然杀伤细胞（NK）的检测1.自然杀伤细胞是淋巴细胞的一种其细胞表面表达CD56+等2.在不孕或反复自然流产患者，其外周血或子宫内膜上NK细胞活性增加3.使用抗体荧光染色技术，通过流式细胞仪可检测NK细胞NK细胞检测相关抗体编号品名克隆亚型规格349041MouseIgG1-FITCX40MouseIgG1,k100ug349043MouseIgG1-PEX40MouseIgG1,k100ug347202MouseIgG1-PerCP-Cy5.5X40MouseIgG1,k50ug340442MouseIgG1-APCiiii100ug349044MouseIgG-PerCPiiii100ug347747CD56-PEMY31MouseIgG1,k100tests347617CD16-PEB73.1MouseIgG1,k100tests349201/340542CD3-FITCSK7MouseIgG1,k50/250tests347463CD45-FITC2D1MouseIgG1,k100tests347493/347497/333945CD14-FITC/CD14-PE/CD14-APC-Cy7MOP9MouseIgG1,k100tests340436CD14-AP