2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件【知识精讲精研】高二下学期生物人教版选择性必修3

2.2

动物细胞工程动物细胞融合技术与单克隆抗体导入资料1传统抗体制备：向动物体内反复注射某种抗原（如灭活的一、单克隆抗体的制备新冠病毒），使动物产生抗体，然后从动物血清中分离出所需抗体。

思考：

1.抗体由什么细胞产生？

2.血清中只有一种抗体吗？

3.传统方法制备的抗体有什么缺点？

抗体产量低、纯度低、特异性差

如何得到大量的单一抗体？注意：每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。一、单克隆抗体的制备思考：1.B淋巴细胞能无限增值生产大量的单一抗体吗？B淋巴细胞与癌细胞融合2.哪种细胞能够无限增殖？3.可否获得一种兼具两者优势的细胞？资料21975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒用绵羊一、单克隆抗体的制备红细胞免疫小鼠后，取小鼠脾脏里的B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合，从而获得了世界第一株既能大量增殖，又能产生抗绵羊红细胞抗体的融合细胞，即杂交瘤细胞。通过培养单一杂交瘤细胞，他们得到了单克隆抗体。由于这一贡献，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。

思考：

仿照该实验，尝试说出制备抗新冠病毒单克隆抗体的简要过程。小鼠单克隆

抗体注射灭活的

B淋巴细胞新冠病毒

骨髓瘤细胞杂交瘤

细胞动物细胞培养动物细胞融合植物体细胞杂交定义使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞的全能性诱导细胞融合的方法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、2+高Ca-高pH融合法结果获得杂交细胞获得杂种植株一、单克隆抗体的制备动物细胞融合技术

自主阅读课本48页内容，完成表格内容一、单克隆抗体的制备杂交瘤细胞的制备

多种B淋巴细胞思考：1.动物细胞融合完后，培养基中有哪些类型的细胞？2.其中我们需要的是哪种类型的细胞？

小组合作，利用材料模拟动物细胞融合的过程（若融合，只考

虑两个细胞融合）灭活新冠病毒资料3哺乳动物细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断；淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。

思考：若在基础培养基中加入氨基喋呤，能否筛选出杂交瘤

细胞？说出理由。

B淋巴细胞及同型融合细胞骨髓瘤细胞及同型融合细胞

不能无限增殖，死亡无S途径，D途径被阻断，不能增殖杂交瘤细胞有淋巴细胞的S途径和骨髓瘤细胞不断增殖特性

一、单克隆抗体的制备探究一、筛选杂交瘤细胞第一次筛选思考：根据课本内容及图2-15，尝试说出筛选的过程。探究二、筛选分泌所需抗体的杂交瘤细胞一、单克隆抗体的制备第二次筛选有限稀释法

每一个孔中尽量只接

种一个杂交瘤细胞

侧面模拟图克隆化培养一段时间取上清液进行抗体检测

★一、单克隆抗体的制备第二次筛选呈阳性检测原理：

抗原和抗体特异性结

合深度探究：如果阳性孔中的细胞不是来自单个细胞，如何进行纯化呢？

克隆化培养和抗体检测

重复多次注射到小鼠腹腔内体外培养单克隆抗体分泌所需抗体的

杂交瘤细胞

体内或体外培养细胞培养工程师在工作一、单克隆抗体的制备培养液小鼠腹水克隆培养一、单克隆抗体的制备

小组合作，根据课本图2-16，利用所给的材料，建构单克隆抗体制备流程图。要求：1.以文字和箭头的形式建构，文字部分用提供的材料贴在白板上，用白板笔画出箭头。（筛选的词条贴在箭头右侧）2.单克隆抗体制备过程中用到了哪些技术？一、单克隆抗体的制备

特定

提取

多种B淋巴细胞

诱导

融合

多种类型的细胞

用特定的选择性培养基

克隆化培养、抗体检测单克隆抗体优点：能准确识别抗原的微小差异，能与特定抗原发生特异性结合，可以大量制备。资料4女性怀孕后，体内会产生人绒毛膜促性腺激素。用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”。在妊娠第8天就可以作出诊断。

新冠病毒检测试剂盒可以检测是否感染新冠病毒。

二、单克隆抗体的应用1.

作为诊断试剂

——最广泛的应用

二、单克隆抗体的应用2.

作为药物治疗疾病张林琦教授团队资料52021年12月8日晚，由清华大学张林琦教授团队及其他公司共同研发的抗新冠病毒抗体组合药物——安巴韦单抗注射液及罗米司韦单抗注射液，正式被中国药监局批准上市，成为我国首个自主研发的抗新冠病毒抗体药物。注入体内后马上起效，可以降低80%新冠患者的住院率与死亡率”思考：ADC的抗体和药物各具有什么作用？

抗体主要发挥靶向运输作用；药物发挥治疗效应，如杀伤

靶细胞。二、单克隆抗体的应用

3.

运载药物

资料6

ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。

阅读教材50页误的是

（）A.

它们的原理都涉及细胞膜的流动性B.

都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合C.

融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞D.

前者主要为了获得细胞产品，后者主要为了获得杂种植株C当堂训练

一、概念检测

1.

下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错下列相关叙述正确的是A.

利用该单克隆抗体可以诊断是否感染

SARS病毒B.

体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体C.

将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合,经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞D.

将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体（A

）

当堂训练2.

科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。3.下图是抗新型冠状病毒的单克隆抗体制备流程示意图。动物细胞融合选择灭活的病毒（1）_______________技术为制造单克隆抗体开辟新途径。（2）根据培养基的用途分类，图中筛选1的培养基属于________培养基。（3）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用______________。（4）研究发现这些鼠源性单克隆抗体进入人体可能会失效，思考一下为什么？