Bruker核磁共相关资料

目录系统简介核磁共振仪器的组成及工作原理核磁共振原理:原子核间的相互作用仪器的分辨率及稳定性RF脉冲去偶水峰的压制技术两维核磁共振核磁共振中梯度场的应用高分辨魔角旋转光谱固体核磁共振19/19/2021B0yxz简单介绍29/19/2021核磁共振:简介39/19/2021核磁共振或简称NMR是一种用来研究物质的分子结构及物理特性的光谱学方法.它是众多光谱分析法中的一员.其它的分析方法:电子自旋共振(ESR/EPR)红外光谱学(IR)质谱学(MS)色谱学(LC/GC/HPLC)X-ray

(SCD/XRF/XRD)核磁共振成像或称MRI

已经频繁的使用在医院的疾病的诊断中.核磁共振:简介49/19/2021虽然一小部分核磁共振仪器在工业上被用来做质量控制,但核磁共振仪器现大部分仍局限在实验室使用.应用范围:结构确定Structure

Determination化学鉴定Chemical

Identification聚合物特性测定Polymer

Characterization药品开发Drug

Development催化研究Catalysis用户:化学公司Chemical

Companies药剂化学Pharmaceutical

Companies石油化工Petrochemical

Industry

高分子材料Polymer

Industry大学Universities医院Hospitals核磁共振:简介核磁共振研究的材料称为样品.样品可以处于液态,固态.众所周知,宏观物质是由大量的微观原子或由大量原子构成的分子组成,原子又是由质子与中子构成的原子核及核外电子组成.核磁共振研究的对象是原子核.一滴水大约由1022分子组成.H

C

HHm59/19/2021mm

(10-6m)nm

(10-9m)A

(10-10m)核磁共振:简介具有非零自旋量子数的原子核具有自旋角动量,因而也就具有磁矩,例如象1H,31P,13C,15N等原子核.磁矩是一矢量.如果含有此类核的物质置放于磁场中,原来无规则的磁矩矢量会重新排列而平行于外加的磁场.与外磁场同向和反向的磁矢量符合Boltzmann分布.在数量上同向与反向的差别很小,但正是这一微小的差别造就了核磁共振光谱学.B0M单位体积内原子核磁矩的矢量和定义为

宏观磁化强度矢量M

(macroscopicmagnetization.其方向与外磁场方向相同69/19/2021在磁场中,原来简并的能级分裂成不同的能级状态.如果用适当频率的电磁辐射照射就可观察到核自旋能级的跃迁.原子核能级的变化不仅取决于外部磁场强度的大小及不同种类的原子核,而且取决于原子核外部电子环境.这样我们就可获得原子核外电子环境的信息.宏观上讲,当用适当频率的电磁辐射(RF)照射样品,宏观磁化强度矢量从Z-轴转到X或Y轴上.通过接受器,傅立叶转换就得到核磁共振谱图.核磁共振:简介B0MB0MRF脉冲接收器ReceiverFTS(t)S(w)79/19/2021核磁共振:简介样品:灵敏度:非磁性及非导电样品需含»1015

原子核溶液600

MHz固体Solids成像NMR89/19/2021核磁共振:简介自旋-自旋偶合化学位移Larmor频率e.g.B0=11.7

T,99/19/2021w(1H)=500

MHzw(13C)=125

MHz化学位移~

B0

»kHz自旋-自旋偶合»Hz-kHz核磁共振:简介Information:Larmor频率化学位移:J-偶合:偶极偶合:弛豫:原子核结构测定(功能团)结构测定(原子的相关性)结构测定(空间位置关系)动力学1H13CCH3>C=CH-HCHHCDH

C

HHJHHHCJCHC109/19/2021>C=C<CH3核磁共振:简介1D谱分辨率可通过提高外磁场强度和增加谱图的维数而提高.nD

NMR

(n=2,3,4)119/19/20212D(轮廓图)NMR谱仪FMAudio反馈600谱仪129/19/2021NMR谱仪600

MHz磁体探头机柜RF产生RF放大信号检测数据采集控制数据信息交流运行控制磁体控制前置放大器计算机139/19/2021数据储存;数据处理;总体控制.NMR谱仪:机柜AQX(Digital)CCUTCUFCURCUVT

unitBSMSshimlockCCUAQR

ASURouterACBADCRX22AmplifierAmplifierPTS149/19/2021NMR谱仪:探头RF接口RF线圈+调谐元件(电容器)Helmholtz159/19/2021SolenoidRF-Coil

in

NMR

Probes169/19/2021NMR谱仪:术语和简写179/19/2021AVANCE系统:

FCU:ASU:TCU:CCU:RCU:BSMS:LOT:ACB:RX22:ADC:HPPR:LCB:PTS:XwinNMR:LINUX/WINDOWS:Pulse

Program:频率控制单元Frequency

Control

Unit频辐设置单元Amplitude

Setting

Unit时间控制单元Timing

Control

Unit协调控制单元Communication

Control

Unit接收控制单元Receiver

Control

Unit布鲁可智能磁体控制系统Bruker

Smart

Magnet

System发射/调谐开关Local

Oscillator

and

Tune

Board功放控制板Amplifier

Control

Board接收器Receiver数字/摸拟转换器Analog

to

Digital

Converter前置放大器Pre-amplifier锁场控制板Lock

Control

Board频率合成器brand

of

synthesizer

used运行软件Operating

Software计算机操作系统SGI

Operating

Software脉冲程序Operator

Instructions

for

experimentNMR谱仪:术语和简写189/19/2021AV系统:

FCU:SGU:TCU:CCU:RCU:BSMS:ACB:RX22:ADC:HPPR:LCB:XwinNMR:LINUX/WINDOWS:Pulse

Program:频率控制单元Frequency

Control

Unit信号产生单元Amplitude

Setting

Unit时间控制单元Timing

Control

Unit协调控制单元Communication

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Unit接收控制单元Receiver

Control

Unit布鲁可智能磁体控制系统Bruker

Smart

Magnet

System功放控制板Amplifier

Control

Board接收器Receiver数字/摸拟转换器Analog

to

Digital

Converter前置放大器Pre-amplifier锁场控制板Lock

Control

Board运行软件Operating

Software计算机操作系统SGI

Operating

Software脉冲程序Operator

Instructions

for

experiment2.NMR检测A:磁化强度矢量,Larmor频率B:RF脉冲,脉冲功率,探头,电击放电C:磁化强度矢量进动,旋转坐标系,接收器,前置放大器D:接收器增益值,弛预时间(T1,T2)E:傅立叶转换,正交检测,频率扫描宽度,折反峰foldingB0MB0MRF

pulseReceiverFTS(t)S(w)AECBD199/19/2021B0yxz2.a:宏观磁化强度矢量600

MHzB0yxzM209/19/2021具有非零自旋量子数的原子核具有自旋角动量,因而也就具有磁矩.在磁场中,原来无规则的磁矩矢量会重新排列而平行于外加的磁场.与外磁场同向和反磁矩矢量符合Boltzmann分布.磁矩矢量沿磁场方向的进动使XY平面上的投影相互抵消.由于沿磁场方向能量较低,故原子分布较多一些而造成一个沿Z-轴的非零合磁矩矢量.虽然在理论上经常讨论单一原子的情形,但在实际上,单一原子的核磁信号非常小而无法观测.故此我们定义单位体积内原子核磁矩的矢量和为宏观磁化强度矢量其方向与外磁场方向相同.以此矢量来描述宏观样品的核磁特性.2.a:Larmor频率核磁矩沿外磁场方向进动的频率称为Larmor频率w或共振频率.此频率的大小取决于原子核的种类及外磁场的大小.g是磁旋比.它是原子核本身的属性并只能通过实验获取.219/19/2021在案BRUKER仪器上,原子

核的频率是通过参数BFn(MHz)设置.如BF1代表第一通道.更精细的频率调节可用参数On来完成.On叫频率偏差频率或偏置频,所以总频率为SFOn:SFO1=BF1+O12.b:RF脉冲核磁信号只能在核磁化矢量位于XY平面时才能被检测到.使用与原子核Larmor频率相同无线电射频即可将M从Z-轴转向X-或Y-轴.MM+Mrf当观测信号时,RF脉冲是处于关闭状态.NMR信号是在微伏(microvolts)而RF脉冲是在千伏kilovolts.229/19/20212.b.旋转坐标系为了更好的描述与简化所研究的体系而引进旋转坐标系统.旋转坐标系统中的Z-轴与传统的三维坐标系的Z-轴一致,而其X-与Y-轴却以与核磁共振频率相同(Larmor频率)的频率绕Z-轴旋转.在此体系中,核磁矩不在围绕Z-轴旋转而是静止在某一点上.MrfMx’

rfxzyy’zxzyy’239/19/2021‘传统坐标系X-与Y-轴以Larmor频率围绕Z-轴旋转‘旋转坐标系实际应用上的例子.当磁化矢量被转到XY平面后,它仍以Larmor频率绕Z-轴旋转.同样的,核磁信号也以大致相当的频率饶Z旋转.然而此高频信号(数百兆赫)是不可能被数字化的,即使使用高分辨的ADC.实际应用上,就将检测到的信号与一参照频率想混合而得到其差频.此差频落在100KHz的范围内(声频)并很容易被数字化.混合检测的信号(10-800

MHz)参照频率(10-800

MHz)自由衰减信号(FID)(audio:0-100

kHz)接受器(RX22)数字化器(HADC)249/19/2021计算机储存2.b.旋转坐标系M

z通过RF脉冲的照射,磁化矢量将以RF脉冲的照射方向为轴在垂直于RF脉冲的照射方向的平面内转动.如使用X-脉冲则磁化矢量将围绕X-轴方向在YZ平面内转动.-只要RF脉冲打开,则磁化矢量的转动就不会停止.y-磁化矢量的转动速度取决于脉冲强度.rfx-脉冲长度将决定磁化矢量停止的位置.45o259/19/202190o180o270o360o2.b:RF脉冲M

z90o

或p/2脉冲将给出最大的信号.所以也就成为准确测定此参数的原因之一.在特定的功率强度下,通过采集一系列不同脉冲长度的谱图以确定最大值或零强度点.此点就给出90o或180o的脉冲.y在BRUKER仪器,RF脉冲一般以pn

(e.g.

p1)等参数来描述其rfx标准单位是微秒(ms).功率强度是以pln,(e.g.pl1)等参数来描述其标准单位是dB.Pulse

length901802703602.b:RF脉冲269/19/20212.b:RF产生频率合成器Sythesizer频率控制单元FCU时间控制单元TCU频辐设置单元ASU功放

Amplifier(BLAH,BLAX)到探头279/19/2021电脑指令2.c:信号接收B0M接受/发射线圈经过脉冲照射后,磁化矢量被转到XY平面上并绕Z-轴旋转.由于此转动切割了接受器的线圈,并在接受器的线圈中产生振荡电流.其频率就是Larmor频率.在NMR中,接收线圈与发射线圈是同一线圈.X信号首先被送到前置放大器然后送到接收器.接收器分解此信号使之频率降低到声频范围.模拟数字转换器将此信号数字化.V289/19/2021t2.c:前置放大器(Preamp)去接收器的信号从功放来的RF脉冲HPPR控制1HXD299/19/2021前置放大器

HPPR前置放大器有两种用途:放大检测的NMR信号(从微伏到毫伏)分离高能RF脉冲与低能NMR信号.前置放大器含有一接收发射开关(T/R).其作用就是阻止高压RF脉冲进入敏感的低压的信号接收器.2.c:接收器(Receiver)检测方法:具有Larmor频率NMR信号与激发脉冲混合,所得的差被数字化.混合检测的信号(10-800MHz)参照频率(10-800MHz)自由衰减信号(FID)(audio:0-100

kHz)接受器(RX22)数字化器(HADC)309/19/2021计算机储存2.c:接收器(Receiver)信号(10-800MHz)SFO1

+

22

MHz(32-822MHz)自由衰减信号(FID)(audio:0-100

kHz)接收器(RX22)Digitizer(HADC)计算机储存混合(I)mixingRX22检测过程:具有Larmor频率NMR信号将被混合两次.首先将信号与SFO1+22MHz的脉冲混合.然后将所得信号再与22

MHz混合

而得到具有音频的自由衰减信号(FID).使用22MHz频率是为避免频率泄露与部件间的频率干扰.混合(II)mixingIF

22

MHz319/19/20212.

c:

ADCNMR信号通常包含许多共振频率及振辐.为能更好的描述NMR信号,我们一般使用16或18

bit

ADC.增益值(RG)应被调节到一适当的值.既能充分利用又不至于使接收器过饱和.RG太低RG太高RG适当329/19/2021NMR信号被称为自由衰减信号(Free

Induction

Decay或FID).此信号并不能象COS涵数一样保持同样的振辐持续下去,而是以指数的方式衰减为零.此一现象是由所谓的自旋-自旋弛预造成.(T2

relaxation)2.d:自由衰减信号(Free

Induction

Decay)*在BRUKER仪器中,时域信号的数据点是由参数TD

设定.为使时域信号能够被完全采集到,TD应为一适当的值,以免使信号被剪断(truncation).TD

too

smallTD

set

proper339/19/2021在测量NMR信号的同时,由于仪器的电子元件及样品本身产生的噪音也同样被接收线圈检测到.为了得到适当信噪比的图谱我们一般可以增加扫描次数以达到要求的信噪比(S/N),信号平均是指通过增加扫描次数来压制噪音而增加信号强度的方法.N次额外的扫描回给出

倍的增强的信号强度在BRUKER仪器中,扫描次数是由参数ns设置.另外,增加扫描次数时,一定要考虑T1弛豫的影响,也就是说要考虑参数D1的设置2.d:信号平均(Signal

Averaging)noiselevelsignal349/19/2021FID359/19/2021谱图NSS/N14162561

(ref)2x4x16x2.d:信号平均(Signal

Averaging)2.d:弛豫效应(Relaxation)NMR信号是一个以常数为T2的指数方式衰减的涵数.T2就是横向弛豫过程的时间常数.此外,在XY平面的磁化矢量需要一定的时间回到Z-轴上.这一过程需要的时间就叫纵向弛豫时间.其时间常数是T1.T1和T2与原子核的种类,样品的特性及状态,温度以及外加磁场的大小有关.信号平均方法成功的关键就是要正确设定参数D1.D1

必须是五倍的T1

以保证在下次扫描时磁化矢量完全回到Z-轴.有时为节省时间,使用小角度的脉冲,重复扫描以达到增强信号的目的.T1=30s,

4

scansD1=150s;

90o

pulse;

600s;D1=15s;

90o

pulse;

60s;D1=15s;

30o

pulse;

60s.369/19/2021abc2.e:傅立叶转换(Fourier

Transformation)在核磁共振实验中,由于原子核所处的电子环境不同,而具有不同的共振频率.实际上,NMR信号包含许多共振频率的复合信号.分析研究这样一个符合信号显然是很困难的.傅立叶转换(FT)提供了一种更为简单的分析研究方法.就是将时域信号通过傅立叶转换成频域信号.在频域信号的图谱中,峰高包含原子核数目的信息,而位置则揭示原子核周围电子环境的信息.timefrequencyFT379/19/2021Detector

si

sigledirection.it

can

only

detect

the

magnitization

alongdetectingdirection.2.e:傅立叶转换(Fourier

Transformation)由于NMR检测器不能检测出顺时针或反时针方向的核磁信号,傅立叶转换后,将给出+w和–w两个峰.xVtxVtFT0389/19/2021-wwNMR

SignalReference

(SFO1)90o0oADCABRealImaginary数学处理399/19/2021为了区分顺时针与反时针旋转产生的峰.正交检测方法被用来解决这一问题.通过使用具有900相位差的两个基本点检测器,正负频率就很容易区分开.实际应用中,并非使用两个检测器,而是使用一个检测器.将检测到的信号分成两部分并分别送到具有偿使用900相位差两个通道中.2.e:正交检测(Quadrature

Detection)Channel

AChannel

BFTFTChannel

A

+

B409/19/20212.e:正交检测(Quadrature

Detection)2.e:傅立叶转换对Exponential(slow)Exponential(fast)pulsetimeblockfrequencyFTtimecosinefrequencyFTnoise419/19/20212.e:填零(ZeroFilling)在数据采集时,最好只采集数据直到信号衰减为零,但由于数据点较少而影响谱峰

的分辨率.增加采集时间由于信号已没,所采集到的只是噪音.在FID的尾部通过填零的方法可以很好的解决这个文题.TD=SI=128TD=128;

SI=1024TDTDSI429/19/20212.e:线宽因子(LineBroadening)Lb=0Lb=5Lb=10NMR信号一般都集中在FID的前部,后部含有的大部分为噪音.将FID乘一权重指数函数就能迫使尾部的FID为零.其程度由参数LB控制.当然还有其他的权重涵数可以利用.使用这些涵数虽可提高信噪比却一牺牲分辨率为代价.在BRUKER仪器中,这些涵数统称为窗口涵数.439/19/2021一个有问题的图谱可以通过检查FID来诊断.时域上两个涵书的乘积经傅立叶转化后,其频域的涵数将具有前两时域涵数单独转化成频域涵数的所有特征(convolution

theory).例如一个被剪切的FID可以被看成是FID乘以一常数涵.傅立叶转化后所得涵数具有FID及常数涵数的共同特征.=xFT449/19/20212.e:傅立叶转换正确图谱459/19/2021SpikeArcingBad

lineshape(shimming)2.e:傅立叶转换(FourierTransformation)采样快慢决定了观测的谱图的频率范围而由所谓的驻留时间参数(DW)确定.两者间的关系由下试确定.sw=1000

Hzsw=500

Hz469/19/2021dw=

0.5msdw=

1

ms2.e:傅立叶转换(FourierTransformation)2.e:峰折返(Folding)当NMR信号数字化时速度太慢时会导致对FID信号频率的错误表达.数学上为能

正确确定一经过坐标原点的周期涵数的频率,在某一周期内必须有两个已知点.所以对FID信号数字化采样时,也必须在某一周期内采集到至少两个点(NyquistTheorem).如果不这样就会产生峰折返.不产生峰折返所能达到的最大频率叫Nyquist

Frequency.真实峰出现峰479/19/20212.e:频域谱图宽度(Spectral

Window)在BRUKER的仪器中,频域谱图的中央点是由参数SFo1(=SF+o1)确定.其中,SF是所观测的原子核Larmor频率;o1是偏置频率可以用来改变频域谱图的中央点.o1489/19/2021o1o1在实际测试未知样品时,可以使用较大的SW值采样.然后调整O1采样.最后再调整SW.1.较大sw2.调整o13.调整swswo1499/19/2021swnew

o1new

sw2.e:频域谱图宽度(Spectral

Window)This

is

due

to

the

fact

that

the

FTonly

results

in

a

pure

absorption

lineshape

if

the

FID

was

sampled

exactly

starting

attime

t=0,

and

if

there

wasno

phaseshift

between

the

reference

frequency

and

the

received

signal.2.e:相位调整(Phasing)通常所采集到的谱图含有吸收(absorption)与扩散(dispersion)组份.通过相位调整可以的到纯粹的吸收峰.ReImReImIn

phaseOut

of

phase509/19/2021在BRUKER仪器中,相位调整首先对最大峰进行零级相位调整PH0,然后以一级相位调整PH1来调节其他的峰.FTphaseAdjust

ph0on

biggest

peak519/19/20213.

Adjust

otherpeaks

with

ph12.e:相位调整(Phasing)3.NMR:原子核间的相互作用分子中的原子并不是孤立存在,它不仅在相互间发生作用也同周围环境发生作用,从而导致相同的原子核却有不同的核磁共振频率.自旋-自旋偶合化学位移Larmor频率e.g.B0=11.7

T,529/19/2021w(1H)=500

MHzw(13C)=125

MHz化学位移~

B0

»kHz自旋-自旋偶合»Hz-kHz3.NMR:化学位移(Chemical

Shift)在磁场中,由于原子核外电子的运动而产生一个小的磁场Be(local

field).此小磁场与外加磁场(B0)方向相反.从而使原子核感受到一个比外加磁场小的磁场(B0+Blo).此一现象我们称做化学位移作用或屏敝作用.B0539/19/2021Be原子核实际感受到的磁场:B

=

(1-s)

B0s化学位移常数3.NMR:

PPM单位由于化学位移是与外加磁场成正比,所以在不同的磁场下所的花絮位移数值也不同.也会引起许多麻烦.引入ppm并使用同意参照样品,就是光谱独立于外加磁场.0

Hz4500

3000

150060000

ppm48120

Hz4500

3000

150060000

ppm4812300

MHz500

MHz300

MHz500

MHz1

ppm

=

300

Hz参照样品峰1

ppm

=

500

Hz549/19/2021In

the

example

belowthe

proton

chemical

shifts

are

referenced

to

the

proton

resonance

frequency

of

TMS.

(Set

frequency

scale

to

ppm(HZ/PPM);

press

calibrate;middle

mouse

button

on

TMS

peak;

type

0

ppm).0

ppm428610HC=OHC=CH2CH3即使使用不同的仪器或在不同的场强下,相同的官能团具有相同的ppm值.不同的官能团由于存在于不同的电子环境因而具有不同的化学位移,从而使结构坚定成为可能..559/19/20213.NMR:化学位移(ChemicalShift)The

presence

of

anuclear

spin

will

cause

a

small

perturbation

of

its

surrounding

electron

cloud.

In

the

case

of

a

chemical

bond

the

electron

cloudsoverlap,

and

as

a

result

of

this

perturbation

the

neighboring

spin

feels

a

slightly

different

magnetic

field,

dependent

onwhether

the

spin

that

it

iscoupled

to

is

up

or

down.

Note

that

the

spins

must

be

fromnuclei

that

are

part

of

the

same

molecule.3.NMR:自旋-自旋偶合(Scalar

Coupling)相邻的原子核可以通过中间媒介(电子云)而发生作用.此中间媒介就是所谓的化学键.这一作用就叫自旋-自旋偶合作用(J-偶合).特点是通过化学键的间接作用.CHH569/19/2021H异核J-couplingC

C同核J-couplingJCHJHHThe

scalar

couplings

cause

the

resonance

lines

to

be

split

in

multiple

lines,

so-called

multiplets.

Each

multiplet

represents

apossible

combinationof

spins

up

and

down.

For

instance:

consider

the

carbon

spectrumof

a

C-H

fragment.自旋-自旋偶合引起共振线的分裂而形成多重峰.多重峰实际代表了相互作用的原子核彼此间能够出现的空间取向组合.CHJCHCHJCH原始频率ww-J/2w+J/2JCH3.NMR:自旋-自旋偶合(Scalar

Coupling)579/19/2021Ha

sees

spin

b

either

up

or

down

and

therefore

has

two

possibilities

with

equal

probability,

resultingin

two

lines

withequal

intensity.

A

similarreasoning

applies

to

spin

b,

coupled

to

spin

a.3.NMR:同核J-偶合(Homonuclear

J-Coupling)多重峰出现的规则:某一原子核与N个相邻的核相互偶合将给出(n+1)重峰.等价组合具有相同的共振频率.其强度与等价组合数有关.磁等价的核之间偶合作用不出现在谱图中.偶合具有相加性.例如:Ha

HbC

CwawbJABHBHBHAHAJAB589/19/2021HaHbCCHcJAB=JACAB,CBCAAB,C是化学等价的核599/19/20213.NMR:同核J-偶合(Homonuclear

J-Coupling)HaHbCCB,C是化学不等价的核JAC=10

HzJAC=4

HzBCJ

=7

HzABHcCwAJAC609/19/2021JAC3.NMR:同核J-偶合(Homonuclear

J-Coupling)3.NMR:异核J-偶合(Heteronuclear

J-Coupling)*CH*CH2*CH3CH1H2H3CH1H2CH1*CC619/19/2021the

case

of

proton

detection,

most

of

the

proton

spins

are

not

coupled

toa

carbon

spin,

since

only

one

out

of

every

100

carbons

has

a

nuclearspin.

The

so-called

carbon

satellites

are

due

to

those

protons

coupled

to

a13C.In

most

samples

these

satellites

are

hard

to

find,

but

for

instance

in

chloroform

they

are

clearly

visible.由于一些核的自然丰度并非如此100%.顾此谱图中可能出现偶合分裂的峰和无偶合的峰.氯仿中的氢谱是一个典型的例子.105

HzH-12CH-13CH-13Cx1003.NMR:异核J-偶合(Heteronuclear

J-Coupling)629/19/2021If

the

resolution

needed

is

about

0.1

Hz

and

the

magnetic

field

corresponds

to

500

MHz,

than

along

and

short

termstability

of

better

than

1

in5

billionis

required.

In

addition

the

variation

of

the

resonance

frequency

over

the

length

of

the

sample

should

be

smaller

than

1

in

5

GHz

for

mostof

the

sample.4.NMR:分辨率与稳定性(Resolution

and

Stability)639/19/2021为能区分微小的化学位移和偶合常数,高的分辨率仪器(0.1Hz)是必须的.它不仅要求外磁场必须具有相当的稳定性,同时要求处于同位置但相同的核给出相同

的共振频率也就是说线宽要非常得心应手小.稳定性是通过稳定的磁体及锁场系统来实现,而小的线宽则通过能提供均匀场强的磁体及匀场来完成.4.NMR:锁场(Lock)实验对磁场稳定性的要求可以通过锁场实现.通过不间断的测量一参照信号(氘信号)并与标准频率进行比较.如果出现偏差,则此差值被反馈到磁体并通过增加或减少辅助线圈(Z0)的电流来进行矫正.2DLockTXLockRXLockfreq.DZ0-coil649/19/20214.NMR:匀场(Shimming)在样品中,磁场强度应该是均匀且单一,以使相同的核无论处于样品的何种位置都应给出相同的共振峰.为达此目的,一系列所谓匀场线圈按绕制所提供的涵数方式给出补偿以消除磁场的不均匀性,从而得到窄的线形.实际应用中可分为低温匀场(cryo-shims)线圈和室温匀场线圈RT-shims).低温匀场线提供较大的矫正.659/19/20214.NMR:匀场(Shimming)匀场线圈分为两组:改变Z-轴方向场强的称为纵向匀场(axial,on-axis

or

z-shims);改变垂直与Z-轴方向场强的称为横向匀场(transverse

or

off-axis

shims).669/19/20214.NMR:匀场效果(Effect

of

Z-Shims)±

Z+

Z2-

Z2+

Z4-

Z4±

Z3±

Z5679/19/2021Shimming

is

partially

an

art,

combined

witha

lotof

experience.

After

locking

the

sample,

monitor

both

the

lineshape

and

the

lock

level,

whileadjusting

the

shimcurrents.

Start

withfirst

order

shims,

then

second

order

etc.

However,

shimming

is

iterative

and

changing

one

shimcurrent

willaffect

other

shims

as

well.Spinning

the

sample

averages

the

off-axis

inhomogeneities,

so

only

the

z-shims

will

be

effective.

Stop

sample

spinning

in

order

to

adjust

the

off-axis

shims.4.NMR:匀场(Shimming)x,y,zz,z2x,y,xy,xz,yz,x2y2z,z2,z3x,y,xy,xz,yz,x2y2,xz2,yz2,x2y2z,xyzz,z2,z3,z4x,y,xy,xz,yz,x2y2,xz2,yz2,x2y2z,xyz,x3y3,x2y2z2z,z2,z3,z4,z5,z6Spinning689/19/2021Non-spinning匀场需要丰富经验为基础.通过观察锁场信号高低,样品信号线形及FID.4.NMR:匀场(Shimming)当初次安装仪器或探头时,旋转与非旋转样品线形是一个标准的参考数据.氢谱的线形数据是通过测量氘代丙酮中3%的氯仿而得.数据0.3/7/14表明

Hz

at

50%;半峰宽7

Hz

at

0.55%;碳卫星峰高度的峰宽14

Hz

at

0.11%1/5碳卫星峰高度的峰宽13C

satellites215

Hz699/19/20214.

NMR:

Shimming样品旋转在50,0.55

and

0.11%处确定峰宽数值50%0.11%0.55%旋转边带709/19/20214.NMR:匀场(Shimming)50%0.11%0.55%样品不旋转在50,0.55

and

0.11%处确定峰宽数值719/19/20215.NMR:RF脉冲M传统坐标系B0在传统坐标系中,由于外加磁场对原子核的作用，磁化矢量以Larmor频率绕外加磁场进动.如果旋转坐标系的旋转频率与原子核的共振频率相同，在旋转坐标系中则没有磁场而磁化矢量也就会静止不动．但如果旋转坐标系的旋转频率与原子核的共振频率有差别，则磁场就会出现而磁化矢量会围绕此小磁场运动．此小磁场叫偏置场．DwMM旋转坐标系729/19/2021在共振共振偏置旋转坐标系5.NMR:RF脉冲w1=

weffxzw1Dwxweff如果RF脉冲施加在原子核的共振频率，则磁化矢量就绕施加的ＲＦ场转动.zzw1=

weffxM在共振的RF脉冲如果RF脉冲未施加在原子核的共振频率则磁化矢量就绕施加的ＲＦ场与磁场的合场方向转动.M共振偏置的ＲＦ脉冲zxweff739/19/20215.NMR:共振与偏置共振（On

and

off

resonance）在共振749/19/2021接近共振偏置共振通过改变Ｏ１以达到共振频率A

typical

proton

spectrumcovers

a

range

of

10

ppm,

or4000

Hz

on

a

400

MHz

system.

If

one

excites

the

spectrum

in

the

center,

then

thelargest

offset

would

be

about

Dw=2000

Hz.

If

the

90o

pulse

is

10

ms,

w1

is

25

kHz

and

the

effective

field

is

tilted

away

from

the

y-axis

by

about5o,

which

will

not

cause

significant

off

resonance

effects.

However,

if

the

90o

pulse

is

40

ms,

the

tilt

angle

is

18o

and

the

excitation

will

not

beuniform

across

the

spectrum.由于核磁共振的样品经常包含多余一个的峰，ＲＦ脉冲不可能对所有的共振进行在共振激发．但若以高功率的脉冲（使有效场尽可能贴近ＸＹ平面）仍可达到近似的效果．实际应用上使用短而强的脉冲．zw1Dwxweffzw1=

weffxzw1DwxweffRF

(O1)759/19/20215.NMR:RF脉冲020000600008000040000Dw

(Hz)020000600008000040000Dw

(Hz)磁化矢量与偏置共振的关系p/2

=

6

msp/2

=

18

msp

=

36

ms769/19/20215.NMR:RF脉冲计算脉冲强度:若p/2脉冲

10

ms则2p脉冲

40

ms那么w1

＝

1/40ms=25

kHz若p/2脉冲太长，可以增加功率是其变短．不要超过探头所能负担的功率否则会损坏探头！！！RF功率放大器的输出功率是用dB.dB的数值表示与最大输出功率相比实际输出功率衰减的程度．Attenuation(dB)=

-20

log

(V/Vmax)由上式可看出每

6

dB衰减将使输出的伏特值减半而使９００脉冲长度加倍．在ＢＲＵＫＥＲ仪器中，脉冲强度由Ｐln设定．１２０dB表示小强度，０表示大强度．779/19/20215.NMR:RF脉冲5.NMR:９００脉冲测定（Paropt）Paropt是一ＡＵ程序．它可改变某一参数（Ｐ１，Ｄ１，等）并将一系列处理的谱图列出．谱图储存在处理数控９９９的文件中．dp1运行Paropt,首先要得到一谱图以确定谱图战士区域．(dp1).然后在特定的脉冲强度改变Ｐ１值．最大峰为何９００， 第一个零点为１８００．789/19/2021通过限定激发宽度，我们就可选择的激发某一特定区域．施加等幅或调制振幅与相位选择性脉冲可完成这一使命．等幅调制RF选择激发Dante软脉冲整形脉冲Adiabatic

PulsesShaped

Dante5.NMR:选择性脉冲（Selective

RF

Pulses）799/19/2021通过对ＲＦ脉冲的时域涵数傅立叶转换，此脉冲的激发图象可在频域谱中直观的表现出来．frequencyFT频率时间5.NMR:选择性脉冲（Selective

RF

Pulses）809/19/2021Ideally,

one

maywish

to

select

arectangular

region,

in

which

all

resonances

are

uniformly

excited,

while

nothing

is

excited

outside

this

region5000-1000-1500Hz激发脉冲的时域与频域关系，可使制作整形脉冲和选择激发区域变得容易．RF

shapeExcited

region819/19/2021FT5.NMR:选择性脉冲（Selective

RF

Pulses）SincSinc(3)Half

GaussDantePulseGaussExcitationFTPulseRectangleExcitationFT5.NMR:选择性脉冲（Selective

RF

Pulses）829/19/2021选择脉冲的长度决定激发区域．839/19/2021Gauss:

4

ms‘hard’

p/2

pulseGauss:

2

msGauss:

1

ms5.NMR:选择性脉冲（Selective

RF

Pulses）Eburp,

20

ms通过改变选择脉冲的频率可以改变选择激发的位置spoffs1

etc.5.NMR:选择性脉冲（Selective

RF

Pulses）849/19/2021Howto

use

this

table:All

values

are

referenced

toa

square

pulse

of

a

given

length

tp.For

a90

degree

square

pulse

the

RF

field

strength

is

normalized

to

1;

the

excitation

bandwidth

(at

90%)

is

1/tp;

the

attenuation

is

at0

dB.For

a

sinc-pulseof

the

same

length,

the

RF

field

has

to

be

5.8

times

stronger,

or

the

attenuation

has

to

be

-15.3

dB

from

the

value

for

the

squarepulse.

The

resultingbandwidth

is

5

times

the

bandwidth

of

the

square

pulse.5.NMR:整形脉冲的一些特性859/19/2021We

saw

previously

that

the

scalar

couplings

cause

the

resonance

lines

to

be

split

in

multiple

lines,

so-called

multiplets.

Each

multiplet

represents

apossible

combination

of

spins

up

and

down.

For

instance:

consider

the

carbon

spectrumof

a

C-H

fragment.6.

NMR:

Decoupling原子核间的偶合导致谱图的复杂化．CHJCHCHJCHoriginalfrequencyww+J/2w-J/2JCH869/19/2021For

asingle

carbon

spin

or

a

few

spins,

we

can

still

unravel

the

couplingpatterns,

however

whena

lotofchemically

different

carbon

atoms

arepresent

in

the

sample,

the

scalar

coupling

of

the

carbonwith

the

proton

spins

give

rise

to

avery

complicated

spectrum.6.NMR:去偶(Decoupling)如果峰数不多，偶合的方式仍可分析出．但当很多锋出现时，偶合方式的分析就不是那么容易．*CH3-CH2-未去偶氢去偶879/19/2021When

the

proton

spin

is

up,

the

carbon

resonates

at

w+J/2.

After

the

proton

p-pulse,

the

carbon

resonates

at

w-J/2.

If

we

apply

aseries

of

p-pulses

atthe

proton

resonance,

and

if

we

do

this

fast

compared

to

the

size

of

the

J-coupling,

the

carbon

will

resonate

atthe

average

of

thefrequencies

(w-J/2)

and

(w+J/2),

which

is

w.

The

carbon

thus

no

longer

sees

the

effect

of

the

proton

spin,

hence

it

is

decoupled.氢对碳的偶合作用可以通过对氢施加一个脉冲消除.此一技术称为去偶.对氢核的饱和照射,促使氢核的自旋状态快速的变换,临近的碳核无法感觉到氢核的自旋状态的取向而只感受到氢核两种取想的平均效果.具体的说,对氢核的饱和照射使碳核原来的两条共振线w-J/2和w+J/2合并平均而得到[(w-J/2)+(w+J/2)]/2=w.CHJCHCHJCHp-pulse

on

H这相当于使用一系列1800脉冲快速照射氢核.C-HpHC-HpHC-HpHC-HpHC-HpHC-Hw+J/2w-J/2w+J/2w-J/2w+J/2w-J/26.NMR:去偶(Decoupling)889/19/2021intensity

is

distributed

over

two

ormore

resonances.氢去偶除简化碳谱还因为有核的Overhauser效应而增加信噪比.decoupled899/19/2021coupledC-HC-H2*CH3-CH2-6.NMR:去偶(Decoupling)Preparing

for

a

carbon

experiment

with

proton

decoupling:1.

Measure

a

proton

spectrum;2.

Set

O1

tothe

center

of

the

proton

resonances;3.

Use

the

proton

O1

value

asthe

O2

value

inthe

carbon

experiment;4.

Measure

the

carbon

spectrum

with

low

decoupling

power

(pulse

program

zgcw);5.

Increase

the

proton

power

until

sufficient

decoupling

is

achieved,

while

monitoring

the

lock

signal

(it

will

drop

when

the

sample

heatsup)

and

theFID

(which

will

show

spikesif

theprobe

startsarcing).实际应用中,一个连续脉冲照射在氢的共振频率而不是使用一系列1800脉冲.次法称为宽带去偶.去偶实验应注意以下两点:1.氢脉冲应施加在氢的共振频率上.2脉冲的强度要足够强但又要比探头承受的强度低.909/19/20216.NMR:去偶(Decoupling)6.NMR:去偶与脉冲强度的关系00.10.20.40.60.81.01.55去偶与脉冲强度的关系919/19/20216.NMR:去偶,脉冲强度及偏值频率的关系Proton

resonance

offset929/19/2021on

RF

power6.NMR:组合脉冲去偶(Composite

Pulse

Decoupling)939/19/2021在工作上的去偶实验很易成功,但偏置共振中,去偶效率随偏置频率的增加很快降低.虽可增加脉冲强度,但探头对大功率的承受程度又阻止无限增加脉冲强度.

好的解决方法就是将去偶的强度均匀开以增加去偶的宽度.一系列的组合脉冲适用于此一目的.Waltz,Garp,Dipsi,Mlev

etc.称为组合脉冲去偶序列或CPD.使用这些脉冲序列要设置两个基本点参数900脉冲长度及强度.whichmeans

that

the

16

or

18

bitsof

the

ADC

are

fully

used

to

describe

the

water

signal

and

the

small

solvent

resonances

are

only

described

bya

few

bits.7.NMR:水峰压制(Water

Suppression)核磁共振实验样品有许多是溶在水中,而水的共振信号又是实际样品的数千甚至数万倍.ADC的资源基本上被用来描述水峰而很少一部分用来描述实际的样品以致样品的信号被淹没在噪音.x

64949/19/2021问题:动态范围;实际样品的信号低S/N;-实际样品的信号淹没在基线噪音中;接近水峰的信号”骑”在水峰上.解决方法:在采样前压制水峰.一经常用到的方法是预饱和.Water

suppression

can

be

achieved

for

instance

byapplying

along,

low

power

pulse

to

the

water

resonance,

followed

by

ahard

90

degree

pulseto

excite

the

spins

of

interest.

This

so-called

presaturation

pulse

typically

lasts

1-2s

and

it

has

the

effect

that

it

saturates

the

water

resonance,which

means

that

by

the

time

we

apply

an

RF

pulse

to

observethe

spectrum,

there

is

no

net

water

magnetizationleft.

(Remember

that

a

long

pulse

has

a

narrowfrequency

response).

As

a

result

the

receiver

gaincan

be

properly

set

for

the

lowintensityresonances,

resulting

in

a

better

signal

to

noiseand

a

better

dynamic

range.7.NMR:预饱和(Presaturation)使用一长约定1-2s而低的脉冲选择的使水峰达饱和状态,然后用一硬900脉冲激发样品.其结果是使接受器的增益参数增加而提高动态范围及S/N.zgrg=1959/19/2021zgprrg=64压水峰实验:脉冲序列zgpr;预饱和时间为1.5s;O1移到水峰位置.逐渐的增加脉冲强度;优化匀场条件,并准确调整O1位置.8.

Two-Dimensional

NMR如果使用两个基本点脉冲采集一系列谱图,同时依此增加两脉冲的时间间隔t1.第一个脉冲将磁化矢量转到XY平面上,此磁化矢量将围绕Z-轴旋转.由于在不同时间内磁化矢量转到不同的位置,导致第二个脉冲过后采集到的FID具有不同的相位和振幅.于是可以说这一系列FID的相位和振幅被t1所调制.增加t1t1969/19/2021t28.

2D

NMRFID的相位及振幅被t1调制也就等于谱图的相位及振幅被t1调制.从傅立叶转换中很容易看到这一点.FT

(t2)t2t1t1f2979/19/20218.

2D

NMR对t1进行第二次傅立叶转换就可以确定调制频率.就是将所有谱图的第一个点进行傅立叶转换,然后第二个点一直到所有的点.所得的谱图就是一个单位均为频率的两维谱图.FT

(t1)f2f2f1t1989/19/20218.

2D

NMR2D

NMR谱图常以轮廓图表示而不用三维的方式.相同情况同样使用在地图上102030405060204010.5601.52999/19/20211020304050604030201050608.

2D

NMR两维谱图可简化图谱增加分辨率同时也可得到原子间的相关关系.1009/19/20218.

2D

NMR:

Cosy2D

Cosy

谱中,交叉峰